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通痹灵对小鼠T细胞活化的影响:体外及血清免疫药理评价

全世明  
【摘要】: 目的: 应用体外及血清免疫药理方法探讨通痹灵对T细胞体外活化的影响,以进一步揭示通痹灵的免疫调节分子机理,为临床用药提供理论依据。同时初步的建立多组分免疫调节药物对T细胞活化影响的评价系统,为包括通痹灵在内的多组分免疫调节药物的研究提供工具。 方法: (1)分离小鼠肠系膜淋巴结细胞,一部分细胞分别与CHX、CsA、通痹灵正丁醇部位、乙酸乙酯部位、氯仿部位、总生物碱部位和水相部位预孵后加入多克隆刺激剂继续培养;另一部分细胞与不同浓度的通痹灵总生物碱部位预孵后加入多克隆刺激剂继续培养;(2)分离小鼠肠系膜淋巴结细胞,分别与5%CHX血清、5%CsA血清、5%通痹灵血清预孵后加入多克隆刺激剂继续培养;总计培养24h后收获细胞,进行双色免疫荧光标记,以流式细胞术对T细胞的CD69分子表达情况进行分析。 结果: (1) 氯仿部位、总生物碱部位作用下Con A活化的T细胞CD69表达百分率分别为(55.38+2.24)%、(44.47±2.90)%,与相应对照[(65.47±1.67)%)比较有显著差异(P<0.05);药物作用下PDB活化的T细胞CD69表达的百分率依次为(77.66±1.01)%、(69.11±2.14)%,与相应对照[(86.63±3.77)%]比较无显著差异(P>0.05),提示氯仿部位、总生物碱部位强烈抑制活化T细 刚卜生毕业论文(2002)通痹灵对小鼠T细胞活化的影响:体外及以清兔疫药理计价 胞CD69表达。当浓度从0、50mg/L、100mg/L、200mg/L升高到400mg/L, 总生物碱部位作用下COn A刺激的T细胞CD69表达依次为(68*ot 2.59)%。 (65.72士1.81风、(59.39士2刀1)%、(54.95士1.75)%、⑤9.54土3.22)%,总生 物碱部位对Con A刺激CD69表达的下调作用逐渐增强,;相应的PDB刺激 的T细胞CD69表达依次为(gi刀0土1石0)%、(86.gi土0.58)%、(76.15上6.18)%、 (71厂2土1.42)%、(27石7土2.5一%,总生物碱部位对POB刺激C069表达的下 调作用也逐渐增强。 (2)5%通痹灵作用下 Con A活化的 T细胞 CD69表达百分率为(54.67土 6.69)%, 与相应对照「(64.35ti0.13)%」比较有显著差异(peo.05);药物作用下PDB 活化的T细胞C069表达的百分率为(SO.99土6.1①%,与相应对照「(79.68士 4.17)%〕比较无显著差异(WO.05)。 结 论: ’通痹灵总碱、氯仿部位强烈抑制小鼠T细胞体外活化。通痹灵总碱抑制小鼠 T细胞体外活化呈剂量依赖方式。临床等效剂量下,5%含药血清抑制 Con A刺激 的T细胞活化,抑制异常的T细胞活化可能是通痹灵治疗类风湿性关节炎重要机 制之一。以血清免疫药理技术为核心,初步的建立了多组分免疫调节药物对T细 胞活化影响的评价系统,这一系统具有快速、灵敏、准确的特点,为包括通痹灵 在内的多组分免疫调节药物的研究提供了工具。


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