收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

三种常见虾类热休克蛋白70基因的克隆及组织表达分析

孙勇  
【摘要】:热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)是热休克蛋白家族中最重要的一类家族成员,它具有“分子伴侣”、细胞保护、抗凋亡以及肿瘤免疫治疗等独特复杂的生物学功能,因此,它的研究已成为生命科学领域研究的热点之一。 本研究首先电子克隆了蓝蟹(Callinectes sapidus)HSC70基因cDNA的全长序列以及日本对虾(Marsupenaeus japonicus)HSP70部分序列,设计引物,采用RT-PCR和RACE(rapid amplification of cDNA ends)相结合的方法,从35℃热休克的克氏原螯虾(Procambarus Clarkii)的心脏组织克隆得到长2271bp的HSP70基因(命名为Pro-HSP70基因),编码635个氨基酸的多肽分子,推测的分子量为70kDa,理论等电点为5.34。经基因组DNA扩增,发现该基因不含内含子。与已知的29个其它生物的HSP70或HSC70蛋白序列的同源性为68.4~86.3%,通过构建系统发生树,发现Pro-HSP70可能是一种诱导型HSP70基因。 从未经热休克的刀额新对虾(Metapenaeus ensis)的心脏组织中克隆得到长2242bp的HSC70(heat shock cognate 70)基因(命名为Met-HSC70基因),包括长1947bp的完整编码区,在poly(A)尾上游发现一加尾信号(AATAAA)。编码648个氨基酸的多肽分子,分子量为71kDa,理论等电点为5.06。经基因组DNA扩增,发现该基因含有内含子。与已知的29个其它生物的HSP70或HSC70蛋白序列构建系统发生树,发现Met-HSC70可能是一种组成型HSP70基因。 从35℃热休克的日本沼虾(Macrobrachium nipponense)的心脏组织克隆得到长2553bp的HSP70基因(命名为Mac-HSC70基因),编码649个氨基酸的多肽分子,推测的分子量为71kDa,理论等电点为5.04。通过序列分析构建系统发生树,发现Mac-HSC70可能是一种组成型HSP70基因。 采用半定量RT-PCR方法,对两种虾的HSP70组织表达进行研究。克氏原螯虾的HSP70 mRNA正常情况下在心脏、肌肉、血液、消化腺、触角腺、精巢和肠组织中表达量相当低下,但是经过35℃、2h热休克以后,表达量显著升高,进一步说明Pro-HSP70是一种热诱导型的热休克蛋白,其中心脏的表达量为最高。在1~8h的热应激实验中,心脏和触角腺Pro-HSP70 mRNA的变化呈上升趋势。非应激状态下,刀额新对虾在心脏、肝胰腺、鳃、脑、胃、精巢和肠中均大量表达HSC70 mRNA,表明克隆得到的Met-HSC70为组成型HSC70基因。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 江尧森;国外虾类的冷冻保鲜[J];世界农业;1986年07期
2 魏青山;关于河(螯)虾类名称的商榷[J];动物学杂志;1989年06期
3 ;世界虾市坚挺[J];湖南农业;1994年09期
4 宋海棠,丁天明;东海北部海域虾类不同生态类群分布及其渔业[J];台湾海峡;1995年01期
5 陈昌福;鱼虾类的营养性疾病(二)[J];渔业致富指南;1998年15期
6 温周瑞;淡水养殖虾类新品种——刀额新对虾[J];农村百事通;1999年22期
7 彭琼英;滇池虾类[J];水利渔业;2002年02期
8 ;国内市场已经饱和 虾产业向深加工方向突围[J];渔业致富指南;2004年14期
9 魏玉昌;海洋浮游虾类生物学研究进展[J];大连水产学院学报;1990年Z1期
10 蔡云龙,臧维玲,刘学华;河口区虾类育苗用水预处理工艺研究[J];水产科技情报;2005年03期
11 李振兴;林洪;李明华;曹立民;;不同虾类的过敏原及其过敏原性[J];水产学报;2006年02期
12 董聿茂,王复振;中国寄居虾类区系初步报告[J];动物学报;1965年04期
13 温综;美反倾销使广东虾业受严重冲击[J];渔业致富指南;2004年16期
14 曹梅;王兴强;阎斌伦;张庆起;;三疣梭子蟹与不同虾类混养技术研究[J];河北渔业;2009年03期
15 王鸿泰;鱼虾类暴发性疾病的中医学探讨[J];淡水渔业;1995年06期
16 ;淡水养殖虾类新品种——刀额新对虾[J];渔业致富指南;1999年08期
17 常泰;淡水养殖虾类常见病害诊治一览表[J];渔业致富指南;2002年16期
18 缪圣赐;;2009年美国虾类进口量为12亿磅同比减少2.1%[J];现代渔业信息;2010年07期
19 姚翠鸾,王维娜,王安利;虾类氨基酸营养需求的研究进展[J];饲料研究;2001年01期
20 冀贞阳;鱼、虾类的“观色”诊病及其防治[J];中国农村科技;2004年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈健;赵盛龙;;浙江海域游泳虾类种类组成及区系研究[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
2 艾春香;李少菁;王桂忠;林琼武;;虾类磷脂营养研究进展[A];中国动物学会甲壳动物学分会、中国海洋与湖沼学会甲壳动物学分会2004年甲壳动物学分会会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2004年
3 徐兆礼;李春鞠;陈亚瞿;;东海浮游磷虾类(Euphausiacea)数量分布[A];中国动物学会甲壳动物学分会、中国海洋与湖沼学会甲壳动物学分会2004年甲壳动物学分会会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2004年
4 徐兆礼;李春鞠;陈亚瞿;;东海磷虾类种类组成和多样性研究[A];中国动物学会甲壳动物学分会、中国海洋与湖沼学会甲壳动物学分会2004年甲壳动物学分会会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2004年
5 郭明申;康现江;武志军;张磊;李云峰;温秀荣;刘龙;;虾类眼柄神经内分泌细胞的初步研究[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
6 宋海棠;;东海虾类的生态群落与区系特点[A];中国海洋与湖沼学会甲壳动物学分会、中国动物学会、中国海洋与湖沼学会生态学分会2000年学术研讨会论文摘要集[C];2000年
7 徐兆礼;陈亚瞿;;东海磷虾类优势种环境适应的研究[A];中国动物学会甲壳动物学分会、中国海洋与湖沼学会甲壳动物学分会2004年甲壳动物学分会会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2004年
8 钱国英;;虾类对脂质的需求特点[A];第三届全国饲料营养学术研讨会论文集[C];1998年
9 李新正;;南海北部的长臂虾科(甲壳动物亚门:十足目)虾类[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(上册)[C];1999年
10 黄美珍;;台湾海峡及邻近海域无脊椎动物的食性和营养级研究[A];中国海洋湖沼学会鱼类学分会、中国动物学会鱼类学分会2004年学术研讨会摘要汇编[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 吴志刚;中国主要出口虾类的分子鉴定标记研究[D];浙江工商大学;2010年
2 刘文亮;中国海域螯虾类和海蛄虾类分类及地理分布特点[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
3 章跃陵;南美白对虾类Ig的定性、功能和免疫分子进化的研究[D];厦门大学;2003年
4 宋兵;太湖渔业和环境的生态系统模型研究[D];华东师范大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 冯宁宁;虾类IMD基因的功能分析及抗病指标的筛选[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2013年
2 林妙玲;基于机器视觉的虾体位姿和特征点识别[D];浙江大学;2007年
3 王甲刚;舟山沿岸张网作业区虾蟹类群落结构和多样性的研究[D];浙江海洋学院;2012年
4 孙勇;三种常见虾类热休克蛋白70基因的克隆及组织表达分析[D];暨南大学;2006年
5 党昕;多酚氧化酶卵黄抗体的制备及其抑制虾类黑变效果研究[D];中国海洋大学;2013年
6 易志全;湛江港红树林生态系统有机碳源对渔业资源的贡献率研究[D];广东海洋大学;2010年
7 柏育材;余氯对海洋生态系统供给功能影响的研究[D];上海海洋大学;2011年
8 凌立彬;日本沼虾不同地方种群的遗传多样性研究[D];南京农业大学;2005年
9 张文浩;山东半岛南部近海沉积物和海洋生物中持久性有机污染物的分析与研究[D];中国海洋大学;2009年
10 虎贞贞;红树林地区常见鱼类对重金属的生物放大作用的研究[D];厦门大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报见习记者 蒋强;美国打响“虾战”[N];国际商报;2004年
2 李伟;美国虾类消费收缩进口下滑[N];中国渔业报;2008年
3 本报记者 王昌存 路程程;山东虾价大幅下跌[N];国际商报;2004年
4 王忠田;印尼虾类出口日本实现零关税[N];中国渔业报;2008年
5 本报实习记者 范嵬 实习生 袁娜;虾产业链此劫难逃[N];国际商报;2004年
6 金陵;南京虾类价格上扬[N];中国渔业报;2008年
7 陈玲玲;2007年欧洲虾类市场回顾[N];中国渔业报;2008年
8 吴湘生;走出持续低迷 价格大幅攀升[N];中国渔业报;2005年
9 记者 孙燕明;鱼虾类产品市场准入制呼之欲出[N];中国消费者报;2004年
10 记者 马灿 通讯员 刘阳 李兆颖;湛江虾夺回市场主动权 首季出口虾类7600吨[N];民营经济报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978