收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

黄芪多糖、丹皮酚对高血压病血瘀证内皮细胞损伤模型TLR4、NF-κB表达的影响

张竞之  
【摘要】: 目的 通过TLR-NF-κB信号转导通路,探讨高血压病血瘀证的形成机理,黄芪多糖、丹皮酚治疗高血压病血瘀证的作用机制,验证高血压病血瘀证细胞模型。方法 1.对高血压病血瘀证的研究: (1).10%的高血压病血瘀证患者血清干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC-C)24h,建立血瘀证细胞模型(血瘀证组),非血瘀证组、健康组、空白对照组分别用同等浓度的高血压病非血瘀证患者血清、健康人血清和不含血清培养基干预相同时间。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的活性,倒置相差显微镜观察细胞形态。 (2).不同浓度的黄芪多糖、丹皮酚干预10%的高血压病血瘀证患者血清损伤HUVEC-C 24h,MTT法检测细胞的活性,倒置相差显微镜观察细胞形态。 (3).实时荧光定量(PCR)法测血瘀证组,非血瘀证组、健康组细胞果蝇样受体(TLR4)mRNA的表达。 (4).不同浓度的黄芪多糖、丹皮酚干预脂多糖(LPS)诱导HUVEC-C TLR4表达(24h)及核转录因子(NF-κB)活化(2h)。PCR法测TLR4 mRNA及NF-κBmRNA的表达,免疫印迹(Western-blot)技术测TLR4蛋白及NF-κB蛋白的表达。NF-κB的活化均用IκBα的降解反映。 2.对高血压病不同病情分级的研究: (1).高血压病1级组、2级组、3级组、健康组HUVEC-C分别用10%的高血压病1级患者血清、2级患者血清、3级患者血清、健康人血清干预24h,MTT法检测细胞的活性,倒置相差显微镜观察细胞形态。 (2).PCR法检测高血压病1级组、2级组、3级组、健康组细胞TLR4 mRNA的表达。 结果 1.血清作用24h后,细胞活性按健康组(0.3697±0.0548)、非血瘀证组(0.3196±0.0479)、血瘀证组(0.2120±0.0317)、空白组(0.1853±0.0129)的顺序降低,组间差异显著(P0.01或P0.001);血瘀证组细胞逐渐收缩变形,细胞间隙增大,胞浆内有暗色颗粒。 2.黄芪多糖、丹皮酚可减轻高血压病血瘀证患者血清对细胞形态变化的影响;细胞活性呈剂量依赖性增强,APS各组的OD值为:健康组(0.4419+±0.0216)、血瘀证组(0.2243±0.0298)、小剂量组(0.2340±0.0376)、中剂量组(0.2656±0.0233)、大剂量组(0.3487±0.0469),组间比较差异显著(P0.01或P0.001);Pae各组的OD值为:健康组(0.5290±0.0946)、血瘀证组(0.2888±0.0319)、小剂量组(0.3227±0.0371)、中剂量组(0.3732±0.0736)、大剂量组(0.4510±0.0909),组间差异显著(P0.01或P0.001)。 3.血清作用24h后,TLR4 mRNA的表达按健康组(5.4160×10~(-4)±0.2488×10~(-4))、非血瘀证组(6.4692×10~(-4)±0.0956×10~(-4))、血瘀证组(8.2598×10~(-4)±0.2685×10~(-4))的顺序逐渐增高,组间差异显著(P0.01)。 4.黄芪多糖、丹皮酚可呈剂量依赖性减少LPS诱导的TLR4 mRNA高表达,各组值分别为,健康组(5.4160×10~(-4)±0.2488×10~(-4))、血瘀证组(8.2598×10~(-4)±0.2685×10~(-4))、LPS诱导组(97.3569×10~(-4)±0.9599×10~(-4))、APS小剂量组(33.4288×10~(-4)±0.8112×10~(-4))、APS中剂量组(13.5707×10~(-4)±0.6434×10~(-4))、APS大剂量组(7.2484×10~(-4)±0.0566×10~(-4))、Pae小剂量组(10.7065×10~(-4)±0.6657×10~(-4))、Pae中剂量组(7.1994×10~(-4)±0.0939×10~(-4))、Pae大剂量组(6.4403×10~(-4)±0.1271×10~(-4));黄芪多糖、丹皮酚可呈剂量依赖性抑制LPS诱导的IκBαmRNA的降解,各组值分别为,健康组(0.4536±0.0164)、LPS诱导组(0.0665±0.0007)、APS小剂量组(0.0873±0.0007)、APS中剂量组(0.1333±0.0005)、APS大剂量组(0.1371±0.0004)、Pae小剂量组(0.0973±0.0003)、Pae中剂量组(O.1357±0.0016)、Pae大剂量组(0.1425±0.0012)。 5.黄芪多糖、丹皮酚可抑制LPS诱导的TLR4蛋白高表达和IκBα蛋白的降解。 6.血清作用24h后,细胞活性按健康组(0.4609±0.0382)、高血压病1级组(0.4241±0.0270)、2级组(0.3330±0.0249)、3级组(0.2116±0.0222)的顺序降低,健康组高于高血压病1级组,但差异不显著(P0.05),与其它各组差异显著(P0.01);2级组、3级组细胞逐渐收缩变形,细胞间隙增大,胞浆内有暗色颗粒。 7.血清作用24h后,TLR4 mRNA的表达按健康组(5.4160×10~(-4)±0.2488×10~(-4))、高血压病2级组(5.9333×10~(-4)±0.3431×10~(-4))、1级组(8.0697×10~(-4)±0.1249×10~(-4))、3级组(8.1314×10~(-4)±0.0702×10~(-4))的顺序逐渐增加,健康组低于1级组和3级组,差异显著(P0.01);健康组低于2级组,但差异不显著(P0.05)。 结论 1.血瘀证内皮细胞损伤模型符合中医发病因素,体现“病”“证”结合特点,又易于复制,有较高的可重复性。 2.APS、Pae可减轻高血压病患者血清对内皮细胞的损伤,增强细胞活性和维持细胞形态结构。 3.TLR-NF-κB信号途径介导的炎症反应和免疫紊乱可能是高血压病血瘀证形成的机制之一。 4.APS、Pae通过降低TLR4表达,抑制IκBα降解起抗炎调节免疫的作用,这可能是其活血化瘀作用的机理之一。 5.APS、Pae可通过降低TLR4的表达,抑制IκBα的降解,抗炎、调节免疫,起保护内皮细胞的作用。 6.TLR-NF-κB信号途径介导了高血压病的炎症反应和免疫紊乱,这可能是高血压病的发病机制之一。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 张竞之;陈利国;贾会欣;胡小勤;;黄芪多糖对高血压病血瘀证患者血清损伤的人脐静脉内皮细胞形态学、活性的影响[J];中国实验方剂学杂志;2010年16期
2 郑峰;褚剑锋;熊尚全;乔建峰;郑良朴;;灯盏细辛注射液对瘀证型高血压病患者PcⅢ的影响[J];中国中医急症;2006年12期
3 刘琳琳;范吉平;郭蓉娟;张允岭;;高血压病证候要素与白细胞介素6的关系[J];中医杂志;2011年02期
4 陈贵海;武丽;邓巍;陈娟;曾晓艳;运晨霞;;抵抗素、脂联素浓度与高血压病血瘀证关系的研究[J];中西医结合心脑血管病杂志;2010年08期
5 麦志广;朱琳;杨群玉;;双石汤对高血压病血管内皮功能保护作用的临床研究[J];湖北中医杂志;2006年07期
6 王丹;杨振伟;张国伦;;高血压病基本证型与血瘀的相关性研究[J];江西中医学院学报;2007年01期
7 张竞之;陈利国;贾会欣;胡小勤;;高血压病血瘀证患者血清对HUVEC-C形态、活性的影响[J];辽宁中医杂志;2011年02期
8 张永红;常增义;曹登瑞;乔钦增;乔钦才;;芪红口服液治疗瘀证型高血压病的临床研究[J];山西医药杂志;2008年03期
9 侯安存;;肺炎支原体肺炎与血瘀证[J];现代中西医结合杂志;2010年33期
10 王丹;杨振伟;张国伦;;血瘀证与高血压病辨证论治关系的临床研究[J];贵阳中医学院学报;2007年01期
11 矫朝波;吉中强;纪文岩;;新血府逐瘀软胶囊对高血压患者内皮功能及氧化低密度脂蛋白影响的临床研究[J];世界中西医结合杂志;2010年04期
12 张莹莹;郑星宇;;高血压病从血瘀论治研究概况[J];陕西中医学院学报;2010年04期
13 王奇,陈云波,梁伟雄,温泽淮,赖世隆;血瘀证兔模型血管内皮细胞内分泌功能变化及血府逐瘀汤作用的影响[J];中国中医基础医学杂志;1998年06期
14 钱海凌,黄琛;活血化瘀法治疗高血压病的理论探讨[J];实用中西医结合临床;2004年06期
15 白瑞娜;于婧;衷敬柏;;病证结合高血压病基因多态性与中药干预相关性研究进展[J];中西医结合心脑血管病杂志;2010年12期
16 郭慧君;高血压病与血瘀证[J];北京中医;1995年02期
17 丁琪,朱静雯,林美琴;从红细胞变形性和—氧化氮的变化探讨“证”与“病”的关系[J];安徽中医临床杂志;1999年05期
18 郑峰;褚剑锋;熊尚全;乔建峰;;灯盏细辛注射液治疗瘀证型高血压病的临床观察[J];广东医学;2007年02期
19 李林森;田金洲;蔡艺灵;时晶;崔箭;徐斯凡;;血瘀证生物学基础研究进展[J];山东中医杂志;2010年12期
20 张丽娜;;冠心病血瘀证机理研究解析[J];实用中医内科杂志;2008年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 胡小勤;陈利国;;丹参酮ⅡA对高血压病血瘀证患者血清损伤血管内皮细胞形态结构的影响[A];第二届临床中药学学术研讨会论文集[C];2009年
2 韩学杰;丁毅;王丽颖;沈绍功;;高血压病痰瘀互结与炎症因子相关的机理探讨[A];中华中医药学会心病分会第十一届学术年会论文精选[C];2009年
3 韩学杰;丁毅;王丽颖;沈绍功;;高血压病痰瘀互结与炎症因子相关的机理探讨[A];2009年中华中医药学会内科分会全国中医内科临床科学研究专题研讨会论文汇编[C];2009年
4 黄春林;;AMI中血瘀证与其它诸证的相关关系探讨(附30例AMI证型调查)[A];第五次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会论文汇编[C];2001年
5 孙喜稳;陈利国;王华强;屈援;颜亮;唐海兰;李晴;;高血压病血瘀证患者血清致伤HUVEC的差异蛋白质组学研究[A];第五次全国中医药防治血栓病学术交流会暨中华中医药学会血栓病分会换届改选工作会议论文集[C];2011年
6 陈利国;屈援;张春玲;何孟栖;葛红颖;聂优爱;胡小勤;孙兆贵;张庆祥;;RT-PCR分析血瘀证(大鼠)血管内皮细胞粘附分子表达情况[A];全国中西医结合基础理论学术研讨会论文集[C];2004年
7 石洁;胡元会;周雪忠;杜柏;商秀洋;王阶;;高血压病中医方-药-证关系的无尺度网络分析[A];第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛论文汇编[C];2008年
8 夏成霞;陆曙;;中药改善高血压血管内皮功能的研究进展[A];中华中医药学会心病分会第十一届学术年会论文精选[C];2009年
9 王升启;周喆;张红胜;高月;田琳琳;邢雅玲;马增春;伯晓晨;张敏丽;李鲁;;复方丹参方治疗血瘀证的分子机理研究[A];中医药优秀论文选(下)[C];2009年
10 陆甘;任斌;仲肇舒;;睡眠呼吸暂停对高血压病血压昼夜节律的负效应[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张竞之;黄芪多糖、丹皮酚对高血压病血瘀证内皮细胞损伤模型TLR4、NF-κB表达的影响[D];暨南大学;2009年
2 胡小勤;高血压病血瘀证血管内皮细胞损伤模型的研究[D];暨南大学;2007年
3 张瑞江;血瘀证传统辩证诊断的数学模型初探[D];广州中医药大学;2010年
4 黄旭东;膝骨关节炎骨髓水肿与血瘀证的相关性研究[D];广州中医药大学;2012年
5 周永红;2型糖尿病血瘀证血管内皮细胞损伤模型的研究[D];暨南大学;2008年
6 王万智;损伤血瘀证大鼠骨骼肌细胞凋亡、免疫机制研究[D];成都中医药大学;2011年
7 郝旭亮;罗布麻总黄酮抗血栓作用物质基础及抗人脐静脉血管内皮细胞凋亡作用机理研究[D];山西医科大学;2009年
8 刘坤;高血压病血瘀证研究与中药干预[D];中国中医科学院;2010年
9 马民;血瘀证形成的微观机理研究[D];山东中医药大学;2003年
10 李杰;冠心病血瘀证家系的易患基因研究[D];湖南中医药大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 潘立敏;活血化瘀治疗对高血压病患者生活质量的影响[D];中国中医科学院;2006年
2 王吉元;高血压病血瘀证证候特点及其与动态血压相关性研究[D];中国中医科学院;2008年
3 李权;丹参酮ⅡA、黄芪多糖及其配伍对血管内皮细胞保护作用的研究[D];暨南大学;2008年
4 贾会欣;高血压病血瘀证患者血清对血管内皮细胞损伤的研究[D];暨南大学;2008年
5 李眺;川芎嗪、黄芪多糖及其配伍对血管内皮细胞保护作用的研究[D];暨南大学;2008年
6 丛丛;老年高血压“络病”与动脉僵硬度相关性的预试验[D];山东中医药大学;2008年
7 邢亚楠;冠心病患者血瘀证与颈动脉粥样硬化的相关性研究[D];北京中医药大学;2008年
8 叶玺;加味温胆汤对高血压病痰瘀证内皮功能干预研究[D];广州中医药大学;2009年
9 贾丽;中药足浴治疗高血压病(阴虚阳亢型)的临床研究[D];长春中医药大学;2009年
10 周世琴;高血压病并发心力衰竭患者血浆内皮素、一氧化氮及降钙素基因相关肽的变化[D];第四军医大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 容小翔;治高血压方[N];大众卫生报;2005年
2 施洋 本报记者 姚艳春;高血压,你了解多少[N];黑龙江日报;2005年
3 戴秀娟 李尤佳;血压骤降危害大[N];中国中医药报;2006年
4 凯艳;控制高血压降压要达标[N];大众卫生报;2006年
5 唐洪梅;高血压病患者如何服参进补?[N];中国中医药报;2006年
6 张献怀;专家提醒:高血压病患者要保持平和心态[N];大众科技报;2006年
7 陶春祥;高血压病患者能不能补钙[N];中国中医药报;2001年
8 易善永;高血压老人冬季洗澡十忌[N];家庭医生报;2007年
9 张献怀;高血压悄然逼近年轻人[N];科技日报;2007年
10 冼绍祥 胡世云 刘小虹;天麻钩藤饮干预高血压病患者心肌纤维化的临床研究[N];中国中医药报;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978