对比剂对大鼠氧化应激和肾近球小管Na~+，K~+-ATPase活性的影响

【摘要】： 研究目的：探讨对比剂对大鼠氧化应激和单根肾近球小管Na+,K+-ATPase活性的影响；比较不同渗透压对比剂急性肾损伤的差异；探讨对比剂肾病的发病机制。 方法：(1)健康成年SD大鼠54只,随机分3组,经尾静脉注射高渗、低渗对比剂和等量生理盐水,分高渗组(HC组),低渗组(LC组)及对照组(NS组),每组再按48小时、72小时、7天后取材分3亚组,每组6只；(2)健康成年SD大鼠18只分3组(LG、MG和HG组),分别按不同剂量(5ml／kg、10ml／kg和15ml／kg)注射高渗对比剂72小时后取材；(3)腹腔单次注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型18只,分3组,分别注射高渗(HD组)、低渗(LD组)对比剂和等量生理盐水(ND组),72小时后取材；(4)显微镜下微分离法获取大鼠单根肾近球小管(PT),电镜鉴定,液闪法测定PTNa+,K+-ATPase活性；(5)测定大鼠血清、肾组织丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性；(6)免疫组化SABC法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白在大鼠肾脏的定位和表达。 结果：(1)正常大鼠注射对比剂后血清Scr值升高(P0.05),LC和HC组之间无明显差异；(2)与NS组相比,LC、HC组大鼠PT的Na+,K+-ATPase活性明显降低(P值均0.01),HC组低于LC组,但两组间差别无统计学意义；(3)糖尿病大鼠注射对比剂后,与NS、LC及HC组比较,Na+,K+-ATPase活性均明显进一步降低(P值均0.01),HD组低于LD组(P0.01)；(4)与NS组比较,LC、HC组MDA的含量均明显升高(P0.05,P0.01),SOD活性降低(P0.05,P0.01)；LC、HC组iNOS阳性表达上调(P0.01)；与NS、LC及HC组比较,LD、HD组MDA的含量更高(P值均0.01),SOD活性更低(P值均0.01)；LD、HD组iNOS阳性更强(P值均0.01),HD组较LD组表达明显(P0.01)；(5)Na+,K+-ATPase活性与SCr值呈负相关(r=—0.438,P0.01)；(6)注射高渗对比剂,HG组PT Na+,K+-ATPase活性降低较LG组和MG组更明显；(7)注射对比剂后2、3天时对比剂肾损害较明显,第7天恢复近正常。 结论：对比剂显著抑制大鼠PT Na+,K+-ATPase的活性,对于正常大鼠,高渗与低渗间无明显差异性,但对糖尿病大鼠,高渗较低渗明显；高剂量的高渗对比剂对大鼠PT Na+,K+-ATPase活性的抑制较低剂量高渗对比剂明显；大鼠注射对比剂后,肾脏iNOS表达明显增强；氧化应激是CIN的发病机制之一；大鼠注射对比剂后2、3天时肾损害较重,7天时恢复近正常。