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肥大细胞浸润和IgE表达在贲门癌中的意义

丁文双  
【摘要】:背景 贲门癌(Gastr ic cardi a Carci noma,GCC)是我国潮汕地区的高发肿瘤之一。贲门癌大多数分化程度低,侵袭能力强,预后差,严重危害人类健康。探讨贲门癌局部机体反应状况对预防和治疗贲门癌有着重要的意义。肿瘤的发生和发展与其局部微环境变化的关系日益受到研究者的重视。肥大细胞(Mast cell, MC)是肿瘤微环境中浸润的细胞之一,传统观点认为,肥大细胞是介导机体超敏反应,抵抗微生物和寄生虫感染的主要效应细胞,近年来的研究证实肥大细胞也参与了肿瘤生长发展的病理生理过程。免疫球蛋白E(IgE)可特异性结合并且激活肥大细胞,过去免疫球蛋白被认为是成熟分化B细胞特有的产物,近年来的研究表明多种肿瘤细胞中也有免疫球蛋白的表达。因此明确肥大细胞在贲门癌中浸润特点和IgE在贲门癌中的表达情况对认识贲门癌的发生发展有重要意义。 目的 本研究观察肥大细胞在贲门癌组织、癌旁组织以及非癌正常贲门粘膜中的分布的特点,分析肥大细胞数量和分布规律及其与贲门癌的临床病理特征的相关性。同时从mRNA和蛋白水平检测IgE在贲门癌组织以及食管癌EC109细胞系和胃癌SGC790 1细胞系中的表达。材料和方法 材料 1.收集2009-2 010年汕头大学医学院病理科送检的贲门癌手术标本共60例,揭阳胃镜普查贲门粘膜慢性炎症标本15例。每一例手术标本均取了癌组织、癌旁组织以及远离癌旁的正常粘膜组织。60例癌组织中,男性53例,女性7例。年龄41-78岁,平均年龄为59岁。根据病理学形态类别分型:管状腺癌47例,粘液腺癌9例,腺鳞癌1例,乳头状癌1例。管状腺癌按照分化程度的高低分为:高分化1例,中分化20例,中-低分化9例,低分化19例。2.人食管癌EC109细胞系,人胃癌SGC790 1细胞系 方法 1. HE染色 观察贲门癌的组织学类型、分化程度、浸润深度以及淋巴结转移情况。 2.免疫组织化学染色 用肥大细胞特异性标记--抗类胰蛋白酶抗体,观察MC在贲门癌组织、癌旁组织以及正常贲门粘膜组织中的浸润数量和分布特点;用抗IgE重链抗体标记IgE,检测IgE在贲门癌组织中的表达情况。 3.免疫荧光染色 用抗IgE重链抗体检测食管癌细胞系和胃癌细胞系中IgE的表达情况。 4.巢式RT-PCR 巢式RT-PC R从mRNA水平检测新鲜贲门癌组织、食管癌EC109细胞系和胃癌SGC790 1细胞系中mRNA的表达。 5.图像分析法 应用Leica IM50图像采集系统和Image- pro Plus 6.0图像分析系统计数肥大细胞的浸润数量,并对IgE染色结果按信号强度进行强度分级。 6.统计分析 应用SPSS1 7.0对统计结果进行分析,采用单因素方差分析,等级资料非参数检验,Spearm an相关分析。 结果 1.肥大细胞主要分布在癌组织浸润的前沿,在正常粘膜以及炎症组织中,肥大细胞主要分布在粘膜层和粘膜下层。肥大细胞在慢性炎症组织内计数最多,癌旁粘膜组织内的肥大细胞计数高于正常粘膜以及癌组织,癌组织内肥大细胞计数最少。计数差异有显著统计学意义(F=60. 01,P0.01)。 2.癌组织中肥大细胞活化脱颗粒比例最高(90.85 %),细胞体积最大,脱颗粒数量最多,其次是癌旁区贲门粘膜(48.84 %),正常贲门粘膜内肥大细胞活化脱颗粒比例最低(39.46%),不同组别间的差异有统计学意义(P0.0 5) 3.肥大细胞计数与癌组织的浸润深度成负相关(F=4.7 7,P0.0 5),与性别、年龄、肿瘤大小、组织病理分型及淋巴结转移无明显相关性(P0.05)。 4.IgE在贲门癌组织、食管癌EC109细胞系和胃癌SGC79 01细胞系内有mRNA的转录和相应蛋白的表达。 5.IgE在贲门癌组织内表达的信号强度与肿瘤的大小成负相关(P0.0 1),与其他临床参数无相关性(P0.05)。 6.肥大细胞的数量与IgE的表达强度呈正相关(F=15.8 26,P0.0 1),即IgE染色强度越强,肥大细胞在癌组织中浸润的数量越大。 结论 1.MC分布在正常贲门的粘膜层和粘膜下层,在癌组织中,MC主要分布在癌组织浸润的前沿,癌间质内少。癌组织中MC的活化比例高于癌旁粘膜和正常粘膜。 2.MC在慢性炎症粘膜内浸润数量最多,在癌组织中浸润数量最低。癌组织中MC浸润与癌浸润深度负相关。MC分布特征提示可能具有抑制贲门癌发生发展的作用。 3.首次发现IgE在人贲门癌、食管癌和胃癌细胞系内有mRNA和相应蛋白的表达。IgE在贲门癌中表达强度与肿瘤大小成反比。 4.在贲门癌内,IgE的表达强度与肥大细胞的浸润数量成正比,IgE可能对肥大细胞有趋化募集和激活活化的作用。


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