大鼠球囊损伤后主动脉壁MMP3的变化及雷帕霉素的干预作用

【摘要】： 背景与目的：经皮腔内成形术和支架术是目前治疗动脉狭窄性疾病的重要手段，然而术后再狭窄发生率高，影响其远期疗效。术后的主要病理改变是血管平滑肌细胞(VSMC)激活、迁移、增殖，新生内膜形成。细胞外基质和基底膜的降解是VSMC迁移的前提条件，基质金属蛋白酶3(MMP3)表达异常是导致细胞外基质降解的重要原因。本课题在建立大鼠主动脉球囊损伤模型的基础上，模拟再狭窄的病理变化，应用雷帕霉素进行干预，研究内膜损伤后雷帕霉素对内膜增殖的影响，以及MMP3的变化，探讨雷帕霉素预防再狭窄的可能机制。 材料与方法：健康成年雄性SD大鼠150只，随机分为4组：第1组为假手术组(n=20)；第2组为单纯球囊损伤(球囊损伤组，n=40)；第3组为球囊损伤+羧甲基纤维素钠干预(羧甲基纤维素钠组，n=40)；第4组为球囊损伤+雷帕霉素干预(雷帕霉素组，n=40)。术后3天、7天、14天、21天、28天处死动物。病理切片分析血管内膜面积、内膜平均厚度、中膜面积，计算内膜／中膜面积比，计数术后3天内膜有核细胞数。免疫组织化学high-SABC法分别检测MMP3、 汕头大学医学院硕士研究生毕业论文 PCNA、Q一Actin在腹主动脉上的表达。电镜观察VSMC表型的变化。 测定血脂、肾功能和外周血白细胞。测量实验前后动物的体重。 结果:(l)雷帕霉素组新生内膜面积比梭甲基纤维素钠组减少36.4 %(0.14士0.03二2 vs 0.23士0.O6nunZ at14 days，p(0.01)，内膜/ 中膜比减少28.9%(17.7士3.37%vs 28.86士10.25%at 14 days，p0.01)。(2)术后3天雷帕霉素组内膜有核细胞数比梭甲基 纤维素钠组明显减少(8.88士3.04 vs12.87士3.44，p0.05)。(3) 球囊损伤后3天动脉壁MMP3表达逐渐增加，以14天最明显，以后 逐渐下降，雷帕霉素组MMP3的表达明显减少。(4)损伤早期MMP3 的表达与新生内膜面积、内膜厚度成正相关，r分别为0.821和 0.771，p均0.05;(5)电镜表现:假手术组vSMC呈收缩表型，肌 丝多，细胞器少;球囊损伤后VSMC呈合成表型，肌丝少，大量细胞 器;雷帕霉素组VSMC表型介于收缩表型与合成表型之间。雷帕霉素 组电镜下未见VSMC穿越弹力膜小窗现象。(6)雷帕霉素组血胆固醇 升高，肾功能、外周血白细胞计数无改变;大剂量雷帕霉素组出现 间质性肺炎。 结论:(l)动脉损伤后血管壁MMP3的表达呈动态变化，3天后表达 开始增加，14天达高峰，以后逐渐下降;本实验首次证明雷帕霉素 可以减少术后MMP3的表达。(2)雷帕霉素减少内膜有核细胞数，减 少内膜面积和内膜/中膜比，说明雷帕霉素可以抑制大鼠腹主动脉球 囊损伤术后体内VSMC的迁移，减轻术后新生内膜增生程度。(3)雷 帕霉素可以影响VSMC表型的改变。(4)小剂量的雷帕霉素对造血系 汕头大学医学院硕士研究生毕业论文 统、肾功能影响不大;大剂量的雷帕霉素可能引起间质性肺炎。