收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

纳洛酮对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响及其神经生物学机制的研究

孙石磊  
【摘要】: 痴呆是由于脑功能障碍而产生的获得性和持续性智能障碍综合征。其中,血管性痴呆(vascular dementia,VD)是因脑血管疾病所致的一种慢性阶梯性进展的疾病。明显的、进行性的学习记忆能力的损害是痴呆患者的主要临床症状,至今对其仍无有效的防治措施。 内源性阿片系统通过阿片受体的介导在人类及动物的学习记忆等智能活动中发挥着重要的作用。Alzheimer病患者脑内的阿片系统发生了明显改变,提示内源性阿片和阿片受体系统可能参与了痴呆的智能障碍。阿片受体拮抗剂纳洛酮可以阻断内源性阿片肽对学习记忆的损害并对部分Alzheimer病患者的记忆障碍有改善作用。但纳洛酮对血管性痴呆的学习记忆减退的影响目前尚未见报道。 海马是大脑的一个重要结构,在学习记忆活动中起着重要作用。海马又是极易受损并极具可塑性的脑区。海马神经细胞的数量减少和功能障碍,是痴呆所致的智能缺陷的病理基础之一。 因此本实验以血管性痴呆大鼠为模型,观察了纳洛酮对其空间学习记忆能力的影响,并在此基础上观察纳洛酮对海马锥体细胞结构和细胞凋亡的影响,结合离体海马脑片电生理实验检测纳洛酮对海马神经元突触可塑性的影响,研究纳洛酮对海马锥体细胞内核酸代谢的影响。结果证实了纳洛酮能够从减少血管性痴呆大鼠海马CA1区细胞的凋亡、调节锥体细胞内核酸代谢和提高海马神经元突触可塑性等方面改善了血管性痴呆的学习记忆障碍。 汕头大学医学院博士学位论文 材料与方法 一、实验材料 1.实验动物 16个月清洁级雄性SD大鼠21只,体重352.1士23.59。 2.实验药品 盐酸纳洛酮注射液困aloxone Hydroehloride Injeetion),商品名:金尔伦, Tofuidine BlueO,饿酸,醋酸双氧铀,叮陡橙,内皮素放免试剂盒。 3.实验仪器 手动脑薄片切片刀(美国Teyler实验室);PD一5微电极拉制器(日本成 贸);sEN一7203三路电子刺激器(日本光电);MEN一8301微电极放大器(日 本光电);55一20lJ隔离器(日本光电);VC一H记忆示波器(日本成贸);日立 H30O型透射电镜,ACAS Ultima一312型激光扫描共聚焦显微镜系统 (Meridian Inc.美国);SN一682型Y一闪烁计数仪(上海原子核研究所)。 二、实验方法 1.动物模型建立和分组 采用双侧颈总动脉永久结扎方法制备血管性痴呆大鼠。大鼠随机分为 三组:假手术对照组,血管性痴呆组,血管性痴呆纳洛酮治疗组(每天0.8 mg瓜g纳络酮腹腔注射,连续7天)。每组均为7只大鼠。 2.Mo币s水迷宫(Morris water maze,MWM)成绩测试 包括Mo雨s水迷宫定位航行实验、可见平台实验和空间探索实验,观 察纳洛酮对血管性痴呆大鼠空间学习记忆能力的影响。 3.海马HE和Nissl染色 将大鼠左侧脑组织置于4%中性福尔马林溶液中固定24小时,常规石 蜡包埋。每只动物在矢状缝外Inlnl处连续切片,等间隔取两张4微米和 四张厚6微米的矢状面切片,分别行常规HE染色和Nissl染色。 4.血浆内皮素水平测定 采用非平衡放射免疫法。 5.海马CAI区超微结构的观察 游离海马,迅速置于2%预冷的戊二醛溶液中固定。将海马CAI区切 汕头大学医学院博士学位论文 成微小组织块,饿酸固定,脱水,树脂包埋,醋酸双氧铀染色,透射电子 显微镜观察。 6.海马CAI区细胞凋亡的观察 TUNEL法和流式细胞仪检测海马CAI区细胞凋亡。 7.海马脑片Schaffer侧枝至CAI通路长时程增强(L ongT’e nn Potentiation, LTP)的检测 刺激电极置于海马CA3区的Schaffer侧枝处,记录电极放置于CAI 区锥体细胞处以记录ps。强直刺激(pulse 50,burst3,main interval 1205)后 观察PS相对于基线的变化。 8.海马锥体细胞DNAJRNA的检测 激光共聚焦显微镜观察海马神经细胞内DNA和RNA的荧光强度,并 用图像分析技术进行处理。 三、数据分析 所有数据以平均值士标准差(Mean士SD)表示,运用SPSS 10.0软件 包进行处理。统计学方法采用双因素重复测量方差分析(two一way rePeated measures ANOVA)和one一w盯ANoVA。六0.05表示有统计学差异。 实验结果 一、纳洛酮对血管性痴呆大鼠MWM成绩的影响 1.隐匿平台潜伏期 双因素重复测量方差分析显示纳洛酮对三组大鼠的隐匿平台逃避潜 伏期有显著的影响沪0.001)。痴呆组大鼠的逃避潜伏期与假手术组和纳洛 酮组相比分别明显延长(六0.05),而纳洛酮组大鼠的逃避潜伏期与假手术组 大鼠的比较无显著差异(外0.05)。 2.空间探索实验 痴呆组大鼠穿越原隐匿平台位置的探索次数最少(4 .64士1 .73次/m in)。 纳洛酮组大鼠的平均探索次数(8.36士1 .38次/m in)比痴呆大鼠显著提高(P 0.001),但仍然低于假手术组(8.36土1 .38次俪n,P0.ol)。 3.可见平台实验 假手术组、纳洛酮组和痴呆组动物的可见平台逃避潜伏期未见明显差 汕头大学医学院博士学位论文 异(P0.OS)。 二、纳洛酮对血管性痴呆大鼠血浆内皮素(endothelin,ET)水平的影响 痴呆组大鼠血浆ET水平(134.”士20.76pg闹)比假手术组(74.83士 14.74 pg闹)显著升高沪0.01),纳洛酮


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 郭改会;老年期痴呆证候规律探讨[J];山西中医;1996年01期
2 张津,贾建平,张新卿,董会卿,周卫东,杨静芳,董秀敏;血管性痴呆载脂蛋白E基因多态性分析[J];中华老年心脑血管病杂志;2001年01期
3 郭富成;;金纳多注射液治疗血管性痴呆临床观察[J];中国中医急症;2006年11期
4 赵友文,任桂英,翁雅琴,王庆同,徐文璇,张中兴,马辛;老年性痴呆与血管性痴呆智能障碍的比较研究[J];中国老年学杂志;1993年03期
5 李艳慧,杨文辉,郑凉,潘文宇;血管性痴呆的针灸治疗与微量元素[J];针灸临床杂志;1996年11期
6 ;针刺治血管性痴呆临床疗效观察[J];江西中医药;1998年02期
7 肖世富,严和骎 ,姚培芬,王鲁宁,汤洪川,贾建军,徐文祯,苟婴如,马辛,鲍枫,马崔,王达平,龙洁,王春雪,柴斌,苏炳华;脑活素治疗血管性痴呆对照研究[J];临床精神医学杂志;1999年01期
8 徐武平,张新华,王桂珍,刘世海;血管性痴呆患者红细胞内微量元素的变化[J];河南医药信息;2000年08期
9 孙宏!610075,朱天民!610075;中西医结合综合治疗血管性痴呆70例疗效观察——附单用西药治疗35例对照[J];浙江中医杂志;2001年01期
10 张丽娟;针药结合治疗血管性痴呆临床观察[J];河北医学;2002年07期
11 雷秀珍;靳京;丁京生;;补肾养脑丸治疗血管性痴呆60例[J];中医杂志;2003年03期
12 封银曼,龙旭阳,郑攀;血管性痴呆的中医实验研究近况[J];河南中医学院学报;2004年01期
13 郭鸿;中西医结合治疗血管性痴呆研究进展[J];河北医药;2004年01期
14 张成智,于艳双,张雅梅;中医药治疗血管性痴呆64例临床观察[J];黑龙江医药科学;2005年03期
15 俞丽辉;肖桂芳;张文婷;;综合行为干预方法在血管性痴呆治疗中的应用研究[J];中国社区医师;2006年11期
16 周文泉;郭明冬;;血管性痴呆的中医研究现状与思考[J];继续医学教育;2006年19期
17 魏瑞丽;张霞;周文风;;血管性痴呆病人的护理体会[J];中国实用神经疾病杂志;2006年04期
18 陈亮;王健;;针药并举治疗血管性痴呆48例疗效观察[J];实用中医内科杂志;2006年04期
19 苏国良;洪勇;赵勇;;益气聪明汤加味治疗血管性痴呆临床观察[J];中国中医急症;2006年08期
20 张晶;霍岭霞;黄春华;;中医对血管性痴呆的研究进展[J];内蒙古中医药;2006年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 钱惠忠;;血管性痴呆(血管性认知功能障碍)[A];2009年浙江省医学会精神病学分会老年精神障碍学组学术会议论文汇编[C];2009年
2 方正龙;;血管性痴呆与脏腑关系探讨[A];2010中国医师协会中西医结合医师大会摘要集[C];2010年
3 郑敏;吴基良;陈斌;申太云;;美曲磷酯对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响[A];第七届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2009年
4 韦云;周文泉;;血管性痴呆的中医治疗进展[A];第六次全国中西医结合养生学与康复医学学术研讨会论文集[C];2009年
5 宋莉莉;邵福源;;对血管性痴呆的的再认识[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
6 何苏民;;中西医结合治疗首发血管性痴呆8例报告[A];全国精神疾病中西医结合治疗及研究新进展学习班、浙江省中西医结合学会精神疾病专业委员会第九次学术年会资料汇编[C];2007年
7 刘峘;田金洲;陈彪;;血管性痴呆与血脂异常[A];2008年全国抗衰老与老年痴呆学术会议论文集[C];2008年
8 黄龚春;;血管性痴呆中医药治疗进展[A];第五次全国中西医结合神经科学术会议论文集[C];2004年
9 周敏亚;朱慧梅;;针灸治疗血管性痴呆的临床研究进展和相关机理概况[A];庆祝浙江省中西医结合学会成立三十周年论文集粹2011[C];2011年
10 王发渭;仝战旗;方平;刘毅;;参龙汤对血管性痴呆的治疗研究[A];中医药学术发展大会论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 仇一青;铁螯合剂对血管性痴呆小鼠模型的保护作用及机制研究[D];第二军医大学;2012年
2 赵奕;通督调神针刺法治疗血管性痴呆的临床研究[D];广州中医药大学;2013年
3 王四平;活血化痰法治疗血管性痴呆的机理研究[D];北京中医药大学;2005年
4 张吉仲;益智五海胶囊治疗血管性痴呆的作用机理研究[D];成都中医药大学;2009年
5 张爱林;复方银杏滴丸防治血管性痴呆的作用及其机理分析[D];北京中医药大学;2005年
6 韦云;从络病理论论治轻度血管性痴呆的疗效观察及其对胆碱能系统的影响[D];中国中医科学院;2011年
7 赵清山;血管性痴呆从肺论治理论及其组方调节cAMP/PKA信号通路保护神经元细胞的作用机制研究[D];湖南中医药大学;2014年
8 庄慧魁;脑血辨证对血管性痴呆的适用性研究[D];山东中医药大学;2004年
9 危玲;丹龙醒脑方类雌激素效应治疗老年肾虚血管性痴呆的机制[D];湖南中医药大学;2011年
10 樊爽;电针对实验性血管性痴呆的基础研究[D];黑龙江中医药大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 许凤华;血管性痴呆血瘀证的临床研究[D];山东中医药大学;2001年
2 张志刚;脑血疏通口服液治疗血管性痴呆的临床研究[D];中国中医科学院;2010年
3 苏净;载脂蛋白E基因多态性与血管性痴呆的相关性研究[D];青岛大学;2001年
4 李铮;参芍怡脑方抗血管性痴呆有效物质基础研究[D];北京中医药大学;2003年
5 孟迎春;“益气调血,扶本培元”针法治疗血管性痴呆的临床研究及发病相关因素分析[D];天津中医学院;2004年
6 张宏;神经干细胞移植于血管性痴呆大鼠海马的研究[D];福建医科大学;2003年
7 杨俊;补肾化瘀颗粒治疗血管性痴呆肾虚瘀阻证的临床研究[D];长春中医药大学;2010年
8 张春英;甲基维生素B_(12)对反复前脑缺血再灌注大鼠学习、记忆功能的影响[D];吉林大学;2004年
9 翁姣;独活干预血管性痴呆模型大鼠自由基和免疫炎性损伤的实验研究[D];辽宁中医药大学;2010年
10 邓桂英;复方丹参片治疗血管性痴呆后的随访研究[D];北京中医药大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 上海市精神卫生中心 陈斌;常发无名火 小心血管性痴呆[N];大众科技报;2006年
2 陈燕琳;血管性痴呆重在预防[N];大众卫生报;2006年
3 健康时报特约记者  陶有庆;情绪不定警惕血管性痴呆[N];健康时报;2006年
4 陈志萍;血管性痴呆的治疗进展[N];中国中医药报;2003年
5 陶有庆;情绪不稳 警惕血管性痴呆[N];中国中医药报;2006年
6 陶有庆;情绪波动警惕血管性痴呆[N];中国中医药报;2007年
7 马云枝;对血管性痴呆病机的认识[N];中国中医药报;2004年
8 衣晓峰;针灸开辟血管性痴呆治疗新领域[N];中国中医药报;2003年
9 张燕;针刺治疗血管性痴呆[N];中国中医药报;2003年
10 记者刘道安;天津中医学院一附院针刺治疗血管性痴呆通过鉴定[N];中国中医药报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978