huMSCs、huMSCs源生殖样细胞免疫学特性的实验研究

【摘要】：目的:研究人脐带间充质干细胞(Human Umbilical Cord Wharton’s Jelly-derived Mesenchymal Stem Cells ,huMSCs)及其诱导分化为生殖样细胞后的免疫学特性,为进一步研究huMSCs移植特性提供实验依据。 方法:分离培养huMSCs,在生殖细胞培养条件下定向诱导其分化,倒置相差显微镜下观察诱导后细胞形态。采用FACScan流式细胞仪检测诱导前后huMSCs表面抗原CD40、CD40L、CD80、CD86。半定量RT-PCR检测诱导前后huMSCs的HLA-I、HLA-DR基因表达水平的变化。用CCK-8法检测诱导前后的不同数量级huMSCs对混合淋巴细胞反应体系中经植物血凝素(PHA)激活的同种异体外周血淋巴细胞(PBMC)增殖的影响。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测诱导前后huMSCs对经PHA活化的T细胞分泌IFN-γ的影响。 结果: huMSCs在生殖细胞培养条件下能分化为生殖样细胞,诱导前后的huMSCs均表达HLA-I,不表达CD40、CD40L、CD80、CD86和HLA-DR。huMSCs能抑制经PHA激活的T淋巴细胞增殖,并抑制T淋巴细胞IFN-γ的分泌,但huMSCs源生殖样细胞并不能抑制经PHA激活的T淋巴细胞增殖及IFN-γ的分泌。 结论: huMSCs在体外生殖细胞培养条件定向诱导下,可分化为生殖样细胞,这种细胞与huMSCs一样具有低免疫原性,同时huMSCs在体外具有免疫抑制性,但诱导获得的huMSCs源生殖样细胞不能抑制T细胞的增殖。