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油茶皂素及其水解产物的分离及降血脂抗氧化活性研究

王延芳  
【摘要】:茶皂素是存在于茶籽或油茶籽中的一类齐墩果烷型五环三萜混合物,由皂苷元、糖体和有机酸三部分组成。它是一种性能优良的非离子型天然表面活性剂,具有较强的发泡、乳化、分散等作用,已用于生产各种类型的乳化剂、洗涤剂、防腐剂及杀虫剂、杀菌剂等,但均为粗制品,含量低。近年来对其生物活性有较多关注,但由于茶皂素结构复杂多样、提取纯化困难及易吸潮、易水解、不易保存等缺点使其在应用研究受到限制,尤其在药理活性方面,因得不到具有确切疗效的单体化合物使其无法应用到临床。我国各类茶籽资源十分丰富,利用潜力巨大,开发茶皂素的应用有重要的现实意义和十分广阔的前景。 本实验选择从油茶籽粕中提取的皂素粗提物为原料,分离纯化油茶皂素,对其水解产物药理活性进行比较研究,并探讨其作用机理,主要研究思路和创新点如下: (1)采用超滤膜串联大孔树脂法纯化油茶皂素,本法操作简单,成本低,连续化程度高,可工业化生产。优化超滤工艺为:操作压力为0.1~0.15MPa,样液浓度为10g/L,温度为30℃;超滤后用反渗透膜浓缩,操作压力为0.3~0.5MPa,样液浓度为2g/L,所得浓缩液用AB-8型大孔树脂进一步纯化,所得油茶皂素颜色浅、纯度高,含量达到95%。 (2)考虑到油茶皂素的不稳定性,对油茶皂素进行碱水解和酸水解以期得到性质稳定的水解产物。碱水解条件为:碱用量为6g/10g油茶皂素,水解时间4小时,水解温度为90℃;酸水解条件为:盐酸溶液浓度2mol/L,溶液体积160mL,水解时间5小时,水解温度80℃。油茶皂素水解后,产物极性降低,容易纯化分离,可得到单体化合物,通过质谱核磁等鉴定了茶皂苷元的结构为茶皂草精醇。(3)本研究首次对油茶皂素水解产物进行了降血脂、镇痛和消炎药理实验研究,并与 油茶皂素的活性做比较,研究表明水解产物的活性没有消失,有些甚至高于油茶皂素,如碱水解产物降低总胆固醇活性最大;油茶皂素酸水解产物抑制耳肿胀的效果最好等。(4)本实验研究了油茶皂素及其水解产物的体内和体外抗氧化活性,并对其药理作用机理进行了探讨,其作用机理与产物结构有关,同时降血脂活性与抗自由基活性具有相关性。


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