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抗干扰微生物数量快速测定机理研究

吴清平  
【摘要】:微生物数量测定是微生物分析检测学的重要研究内容,也是食品、饮料及医药工业产品中重要的限量检测指标。目前国内外在微生物数量检测中主要存在三大主要问题:抗干扰性差、灵敏度低和速度慢。针对上述这些问题,在抗干扰机理研究中,建立了通过苯甲酸降解菌产生的苯环双加氧酶降解样品中的苯甲酸和化学方法屏蔽防腐剂的防腐性能,从而使防腐剂失去作用的两种消除防腐剂对微生物检测干扰的有效方法,其中化学方法比微生物酶法更直接、方便和迅速。进一步的研究还发现,通过合适的中和还原剂中和分解样品中的消毒剂和臭氧、并使中和还原产物无害化,可有效地消除消毒剂和臭氧对微生物检测的严重干扰。 按照抗干扰机理,设计、摸索并建立的抗防腐剂指数和抗消毒剂指数及其数学模型,确定了防腐剂解抑剂抗防腐剂干扰能力和消毒剂解抑剂抗消毒剂干扰能力的评价体系。在此评价体系中,把抗防腐剂指数控制在81.1-94.5之间和把抗消毒剂指数控制在12.0-24.5之间,可分别较好地消除防腐剂或消毒剂对微生物检测的严重干扰。防腐剂解抑剂Ⅲ的抗防腐剂指数为92.34,消毒剂解抑剂Ⅰ的抗消毒剂指数为12.0,它们对细菌和真菌生长无抑制作用,加入培养基后,在灭菌前后和一年的保存期内,都能维持其原来各自的抗防腐剂指数及抗消毒剂指数基本不变,把防腐剂解抑剂Ⅲ和消毒剂解抑剂Ⅰ分别加入经改良和优化的普通培养基后,分别制得抗防腐剂型和抗消毒剂型系列培养基。根据抗消毒剂干扰机理研究,亦由此制得抗臭氧型系列培养基。 抗干扰微生物灵敏检测机理研究表明,取大样本采用抗干扰微生物培养基可以消除干扰物质对微生物检测的严重影响,大大提高检测的灵敏度。采用研究中建立的抗干扰大样倾注平板法、液体大样法及最近似数法与抗干扰微生物培养基有机结合,形成的抗干扰灵敏检测技术,在检测中与采用普通培养基的常规检测手段相比,在检测含有防腐剂、消毒剂或臭氧的样品时,抗干扰微生物灵敏检测技术可提高样品中细菌和真菌的检出率5-100倍。 在生物发光法细胞ATP释放机理探索中,根据微生物细胞壁的结构特


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