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知母提取物药时曲线测定及大鼠肠道菌代谢研究

梁均乐  
【摘要】: 知母是百合科植物知母的干燥根茎、有清热泻火、滋阴润燥、止渴除烦等功效。大量药理研究证明,知母甾体皂苷及苷元是其主要活性成分,近年来对知母药用成分的研究已成为研究热点。课题组将从中药知母中提取的甾体皂苷制成欣舒片,取得新药证书,并进行产业化研究。已建立了稳定的生产工艺,知母提取物及其制剂的质量标准,药效学和急性毒性试验。本课题为了解药物的体内过程及肠道菌代谢转化特点,对知母提取物进行了大鼠体内外肠道菌代谢研究,并对知母提取物中主要单体成分知母皂苷B-II进行了含量测定及对其在大鼠的体内过程进行了研究,为提高知母提取物的生物利用度,药效机理研究,及制定合理的用药方案,提供了依据。 首先,建立了HPLC-ELSD测定知母皂苷B-II含量的方法,在0.506~10.12μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,回归方程y=1.6427x+1.9001(r=0.9999),平均回收率为98.26%,RSD=3.56%(n=6),测得各批知母提取物含量为55~76%。同时建立LC-MS测定大鼠血浆中知母皂苷B-II浓度的方法,结果表明浓度在4.95~1980ng/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,回收率达70%以上。 接着,对知母皂苷B-II在大鼠体内的药动学进行了研究,得到药动学参数,药时曲线下面积AUC0-24=3233.65±594.61ug.L-1.h-1,半衰期t1/2=5.01±1.81h,达峰时间Tmax=1.15±0.49h,达峰浓度Cmax=953.15±186.75ng.mL-1 最后,对知母提取物进行大鼠肠道菌体内外代谢研究,发现体内外代谢产物中均含有三个色谱峰,经TLC和LC-MS初步鉴定为菝葜皂苷元及其同分异构体。对体外代谢产物之一菝葜皂苷元进行了含量测定,其得率随代谢时间延长而增加,到第五天测得菝葜皂苷元的得率为28.18%。


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