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火龙果茎中黄酮类化合物的分离、分析及其抗氧化性研究

戴文娟  
【摘要】: 火龙果属于热带亚热带植物,集“水果”、“花卉”、“蔬菜”、“保健”、“医药”为一体,全身都是宝。目前我国的广东、福建、海南、山西、广西等地均有种植。 本文以处理好的火龙果茎干粉为原料详细研究了提取分离其中黄酮类化合物的方法与条件,建立最佳提取与纯化方法,然后鉴定了其中黄酮类化合物的结构类型,最后对纯化后的火龙果茎中的总黄酮的抗氧化活性进行了评价,为火龙果茎的利用及其黄酮的开发应用奠定了良好的基础。 本文首先研究了分光光度法测定火龙果茎总黄酮的方法,优选了测定波长及显色条件等分析条件,测定方法的回归方程为A=0.00158+0.031*C,相关系数r=0.99991。然后研究了火龙果茎中总黄酮的提取方法,以乙醇为溶剂,采用溶剂回流法进行提取,通过单因素实验考察了乙醇浓度、提取温度、提取时间、料液比四个因素对火龙果茎中黄酮类化合物提取效率的影响。在单因素实验基础上,通过正交实验L9(34),得到溶剂回流法的最佳提取条件为:乙醇浓度70%,料液比1:40,提取温度75℃,提取时间3小时。在该条件下得到每克火龙果茎干样中黄酮类化合物的含量为4.94 mg,方法的回收率为98.42%,RSD=2.5%。 然后对提取的火龙果茎总黄酮进行了纯化研究,通过3种大孔吸附树脂对火龙果茎总黄酮的吸附和解吸性能的比较,筛选出最适合纯化火龙果茎黄酮的树脂为D-101树脂。并通过单因素实验确定了纯化的最佳条件为:上样量为75 mL(4倍体积湿树脂),上样液浓度为820 mg/L,上样流速为2 mL/min,用50 mL体积分数为70%乙醇以2 mL/min洗脱速度洗脱,洗脱率为99.21%,纯化后产物中的总黄酮纯度为70.61%,为过大孔树脂柱前的5.11倍,达到了纯化、富集的目的。 通过IR、颜色反应、UV以及TLC等分析手段分析了纯化后的样品中黄酮基本结构,表明火龙果茎中含有3`,4`-OH,7-OH,5-OH,3-烷氧基,6,8-含氧取代基的黄酮类化合物,且根据多种结果显示其中含有芦丁。 最后在抗氧化实验中,通过绘制火龙果茎黄酮的自由基清除率曲线,并与火龙果花黄酮、Vc、芦丁、槲皮素标准品对照,结果表明火龙果茎黄酮在浓度大于145 mg/L后,对DPPH自由基清除率达到了100%,而芦丁、槲皮素、Vc的自由基清除率曲线显示在自由基清除率分别为89.01%、89.21%、96.75%即为最大值。由此可以看出火龙果茎黄酮具有很强的自由基清除能力。


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