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基于表面等离子共振(Surface Plasmon Resonance)扫描成像的DNA芯片的研究

张崇文  
【摘要】: 生物芯片技术具有的高速度、高效率、高通量等特点,为微生物的基因检测提供了良好的技术平台。表面等离子共振(Surface plasmon resonance,SPR)传感技术是一种折射率检测表面分析技术,生物分子与沉积在传感器表面的探针分子发生的特异性反应,会导致传感器表面膜层折射率的变化,因此,分析SPR信号的变化可以实现生物分子识别、分子浓度及反应动力学参数监测。因为其灵敏度高、免标记、可实时且无污染等特点成为DNA芯片检测的研究重点。 本文的研究重点在于建立一套基于列扫描SPR检测系统的DNA芯片的制备和检测分析技术。首先以酵母和乙型溶血性链球菌的的探针及其互补序列为实验对象,采用分子自组装技术(Self-assembled monolayer,SAM)进行芯片的构建并且优化各种条件,然后应用自组装的SPR检测系统针对样品进行检测。 本研究取得了以下成果: 1.采用分子自组装的方法把有巯基修饰的探针成功地固定在金膜芯片表面,并且成功的进行了杂交。 2.采用SPR检测技术对探针与各自的互补序列的杂交情况进行了检测,结果显示互补序列成功地进行了杂交,其特异性良好。 3. SPR检测系统的灵敏度和稳定性得到了较好的验证,所制备的SPR传感芯片,不仅大大降低了仪器的运行成本,而且在一定程度上提高了SPR生物传感器的检测分析能力,为SPR生物传感器的进一步推广以及国产SPR生物传感器的研发应用奠定了初步基础。


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