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快慢羽鸡抗ALV-J天然免疫差异的研究

谭艳  
【摘要】:快慢羽伴性遗传性状广泛应用于养鸡生产上的雌雄鉴别,但慢羽鸡对禽白血病较快羽鸡敏感且更难净化。慢羽K基因携带内源性禽白血病病毒ev21,可能造成快慢羽鸡对禽白血病病毒(avian leukemia virus,ALV)的感染具有不同的免疫效应。本研究以天然免疫为切入点,探索了快慢羽鸡对ALV感染的天然免疫反应是否具有差异。我们调查了广东省某三个养殖场快慢羽鸡的禽白血病(avian leukemia,AL)感染情况,筛选出未感染ALV-J并且携带ev21的快慢羽鸡后代进行动物实验,实验组接种J亚型禽白血病病毒SCAU-HN06,对照组正常饲养,采取处理后不同时间快慢羽鸡的脾脏检测天然免疫因子干扰素(IFNα、IFNβ和IFNγ)、白介素(IL10、IL12和IL18)、肿瘤坏死因子(TNF-α)以及抗病毒基因(Mx、PKR和OAS)的表达量;从感染个体中分离出ALV-J,将ev21的基因序列与分离毒株的序列进行了比对并分析了二者的亲缘关系。发现慢羽鸡AL的感染率远大于快羽鸡的感染率(P0.0001),说明慢羽鸡比快羽鸡易感AL;同时证实矮小白和矮脚麻品系的慢羽鸡均携带ev21,矮小黄和矮脚麻品系快羽鸡均没有,说明本研究选取的快慢羽鸡属于快羽基因(k+)回复突变时将ev21序列全部删除的类型;分离得到2株ALV-J同源性达96%,并发现慢羽鸡中分离得到的毒株M180没有与内源性禽白血病病毒ev21重组。SCAU-HN06接种后检测其在慢羽鸡体内的复制量比快羽鸡早6 d迅速升高,可见慢羽鸡的天然免疫系统比快羽鸡更容易被突破。天然免疫因子干扰素与抗病毒基因等的表达显示出如下规律:(1)干扰素类、白介素类和TNF-α的慢羽组出现差异表达的时间均在其体内病毒复制量迅速升高之后的4 d及4 d后,快羽组和其体内病毒复制量升高的时间一致或早于其病毒复制量升高前,并且蛋白质检测水平均只有快羽组出现显著差异表达。(2)抗病毒基因类:快羽组PKR和OAS的作用比慢羽组显著,快慢羽鸡Mx基因都抑制了病毒的复制。综上所述,慢羽鸡各个天然免疫因子的表达较快羽鸡滞后,并且强度也基本小于快羽鸡,说明快慢羽鸡抗ALV-J的天然免疫反应具有显著差异,表现为慢羽鸡抗ALV-J的天然免疫反应比快羽鸡迟钝且强度较弱。本文对快慢羽鸡抗ALV感染天然免疫反应的情况的研究,为进一步深入研究快慢羽鸡对ALV感染的天然免疫应答反应机制及其分子遗传机制积累了资料,有利于培育出抗病性能好的快慢羽鸡,更好的在育种工作中运用快、慢羽基因培育性别自别品系。


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