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滇黔桂地区土壤虫生真菌分离鉴定研究

谢伟文  
【摘要】:为减缓化学杀虫剂的使用带来的环境问题,利用虫生真菌进行害虫生物防治日益受到重视,虫生真菌资源的调查与采集成为一个重要的研究方向,土壤中蕴含的丰富的虫生真菌资源有待开发利用,云南(滇)、贵州(黔)与广西(桂)地区温暖多雨、地形地貌多变、生物多样性丰富,但是人们对该地区土壤中虫生真菌的了解不足。本论文是全国土壤虫生真菌分离鉴定项目的一部分,拟从滇黔桂地区采集土壤样品,再从中分离出真菌菌株,利用形态学、分子生物学技术鉴定菌株属种,通过生物活性测定了解不同菌株对烟粉虱的致病活性。主要研究结果如下:(1)从上述地区采集了147份土壤样品,滇黔桂地区分别为36、34、77份样品;从其中137份样品中分离到真菌菌株316株,平均分离率93.2%,分别从滇黔桂地区的33、31、73份土壤样品分离出60、86、170株真菌,分离率分别为91.7%、91.2%、94.8%;平均每份土样分离2.1株菌株,滇黔桂地区每份土样分离菌株数分别为1.7、2.5、2.2株,而采自杂草地、桉树林、非桉树林、耕地、荒地等环境的土壤样品的每份土样分离菌株数分别为2.6、1.9、2.1、1.6、2.5株。(2)通过菌落形态、产孢结构、分生孢子形态等特征,以及r DNA-ITS和mt DNA COI基因序列的同源性比对,鉴定出来自7属17种的174株已知虫生真菌,占土样分离真菌总量的55%。包括淡紫紫孢菌Purpureocillium lilacinum(原名:淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus)56株、金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae 28株、玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea 20株、马昆德拟青霉Paecilomyces marquandii 20株、球孢白僵菌Beauveria bassiana 10株、黄绿绿僵菌Metarhizium flavoviride 8株、Purpureocillium lavendulum 8株、肉色拟青霉Paecilomyces carneus 6株、厚垣普奇尼亚菌Pochonia chlamydosporia 4株、球芽普可尼亚菌Pochonia bulbillosa 4株、桔青霉Penicillium citrinum 4株、Beauveria felina 1株、布氏白僵菌Beauveria brongniartii 1株、环链棒束孢Isaria cateniannulata 1株、粉棒束孢Isaria farinosa 1株、贵州绿僵菌Metarhizium guizhouense 1株、爪哇棒束孢Isaria javanica(原名:爪哇拟青霉Paecilomyces javanicus)1株。(3)选取10个未见报道致病昆虫的真菌菌株,以球孢白僵菌Beauveria bassiana Bb YN8702菌株为参照,采用浸渍法测定不同菌株对烟粉虱二龄若虫的致病活性。结果表明,使用浓度为108 spores·m L-1孢子悬浮液处理,到第10天,其中,球孢白僵菌Beauveria bassiana Bb YN8702菌株、枝顶孢菌Acremonium sp.A.YN0403菌株、蜡蚧菌Lecanicillium sp.L.GZ5303菌株、粉红粘帚霉Clonostachys rosea Cr GX21G03菌株、丛赤壳属菌Nectria sp.N.GX2905菌株、布兰施帚霉Scopulariopsis brumptii Sb GX7705菌株、疣状瓶霉Phialophora verrucosa Pv GX77A02菌株等7个菌株对烟粉虱致病率分别为55.56%、27.08%、90.97%、44.04%、35.75%、29.02%、38.34%,致死中时间LT50为9.11d、18.37d、6.44d、11.14d、12.87d、16.14d、12.70d。另外,马昆德拟青霉Paecilomyces marquandii Pm GZ4202菌株、球孢枝孢菌Cladosporium sphaerospermum Cs GZ5706菌株、矛束霉Doratomyces sp.D.GX11G02菌株,以及被孢霉Mortierella sp.M.GX13S05菌株等4个菌株,对烟粉虱不致病。


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