闽粤琼三省土壤虫生真菌分离鉴定及生物活性研究

【摘要】：虫生真菌是昆虫病原微生物中的最大类群,利用真菌杀虫剂防治农林害虫是生物防治的一个重要方向。虫生真菌在土壤中分布广泛,不同的生态环境中真菌群落有着显著差异。我国南部沿海地区生物多样性丰富,有利于分离出适应当地气候耐高湿、高温的优良虫生真菌菌株,为了了解本地区虫生真菌资源分布情况,发现优良菌株,本研究将分离鉴定闽、粤、琼三省各地土壤中虫生真菌的种类,并开展生物活性研究,主要结果如下:自闽、粤、琼三省不同地区采集了123份土壤样品,利用选择性培养基,从98份土样中分离了121个虫生真菌菌株,其中,有22个土样中分离出虫生真菌有2种以上,这些土样主要来自菜地、野地、荔枝园和香蕉园等农耕地;另外的25份土样中,没有分离到虫生真菌,这些土样主要来山脚、山坡等山区环境与桉树林等荒地或林地。根据菌落形态、大小、颜色以及分生孢子与产孢结构等形态特征,以及比对分析ITS1-5.8S-ITS4 r DNA基因和β-微管蛋白的同源性,鉴定了121株虫生真菌分属于9属13种,主要种有淡紫紫孢菌Purpureocillium lilacinum(原名:淡紫紫孢菌Paecilomyces lilacinus)51株、球孢白僵菌Beauveria bassiana20株、玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea15株、金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae 12株、肉色拟青霉Paecilomyces carneus10株、马昆德拟青霉Paecilomyces marquandii3株、厚垣普奇尼亚菌Pochonia chlamydosporia3株、Pochonia bulbillosa(原名:Verticillium bulbillosum)2株、裂褶菌Schizophyllum commune 1株、爪哇棒束孢Isaria javanicus(原名:爪哇拟青霉Paecilomyces javanicus)1株、渐狭蜡蚧菌Lecanicillium attenuatum 1株、刀孢轮枝菌Lecanicillium psalliotae 1株、Simplicillium lanosoniveum1株。选择10个不同种的菌株,分别是刀孢轮枝菌L.psalliotae的Lp GD62菌株、马昆德拟青霉P.marquandii的Pm GD01菌株、玫烟色棒束孢I.fumosorosea的If GD07菌株、厚垣孢普可尼亚P.chlamydosporia的Pc GD43菌株、淡紫紫孢菌P.lilacinus的Pl HN09菌株、玫烟色棒束孢I.fumosorosea的If FJ05菌株、球孢白僵菌B.bassiana的Bb HN05菌株、淡紫紫孢菌P.lilacinus的Pl HN01菌株、金龟子绿僵菌M.anisopliae的Ma FJ07菌株、裂褶菌S.commune的Sc GD28的菌株。采用浸渍法对烟粉虱二龄若虫进行生物活性测定。结果表明,当孢子悬浮液浓度为108 spores·m L-1处理后第10天,Lp GD62、Pm GD01、If GD07、Pc GD43、Pl HN09、If FJ05、Bb HN05、Pl HN01、Ma FJ07、Sc GD28菌株对烟粉虱致病率分别为88.44%、84.84%、82.90%、82.07%、78.96%、75.84%、73.96%、73.81%、69.98%、67.31%,致死中时间LT50为6.82、6.46、6.89、6.80、7.03、6.89、7.28、7.10、7.04、7.10天。