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文昌红树林微生物细胞毒活性物质的筛选

陈华  
【摘要】:本文报道从红树林取样进行微生物分离、细胞毒活性菌株的筛选以及菌株0616167的发酵条件优化。 本次采样采集18种红树林植物和4种半红树林植物的土壤、根、果、叶等共60个样品,共分离得到1206株海洋微生物菌株。其中,细菌531株,细胞毒活性菌83株;真菌384株,细胞毒活性菌77株;放线菌291株,细胞毒活性菌66株。强抗B_(16)细胞活性菌中,细菌和真菌占据主要地位。 对实验结果进行SAS6.12统计软件分析处理得:不同微生物类型与不同活性强度菌株数间有极显著的关联,其中,从真菌中筛选得到强抗B_(16)细胞活性菌株29株,占总强活性菌株的43.28%;不同采样部位与所筛选微生物类型间有极显著的关联,其中,土壤是筛选放线菌的主要来源,共筛得放线菌244株,占总放线菌的83.85%;黄槿和杯萼海桑的土壤的微生物资源最为丰富,分别从其中筛选得到9株和5株产强抗B_(16)细胞活性物质的菌株。 菌株0616167是从海南文昌红树林的海泥中分离得到的一株放线菌,有较强的细胞毒活性。其最适生长的NaCl浓度是6%,当盐度为0~3%时,活性最高,随着盐度的增加活性下降甚至丧失。接种量对菌丝生成量的影响不大,接种量为10%时生成抗B_(16)细胞活性物质的活性最高。 菌株0616167的发酵条件优化为:碳源为葡萄糖,20g,氮源为硝酸钾,15g,酵母粉5g,蛋白胨2g,CaCO_3 4g,NaCl 4g,50%陈海水1000 mL,pH 7.2-7.4,装液量为75mL,发酵时间为5d。菌株0616167所产抗B_(16)细胞活性物质的热稳定性较差,随着温度的升高,活性逐渐下降;pH稳定性好,在pH值5~11范围内能保持较强的抗B_(16)细胞活性。


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