刚果12号桉（Eucalyptus 12ABL）胚乳离体培养及植株再生的研究

【摘要】： 本研究以刚果12号桉授粉后的胚珠为外植体,进行胚乳愈伤组织的诱导及植株再生的研究,重点研究了胚乳培养的最佳时期、愈伤组织的诱导、不定芽的分化、增殖培养、芽苗生根、试管苗的移栽等有关问题。 1.对刚果12号桉胚乳胚胎学的研究发现:用常规压片法对授粉后1～30d的胚乳进行胚胎学观察,结果表明授粉后1～7d是胚乳早期发育阶段;8～12d胚乳组织月牙形状开始生长;授粉13～16d胚乳生长比较旺盛,胚乳组织在短时间内迅速变大;授粉17～20d胚乳生长较慢;授粉21～24d胚乳组织开始退化,胚乳组织由大变小;授粉30d后已经观察不到胚乳组织。 2.建立了胚乳植株的再生体系:确定了外植体的最佳取材时期及表面消毒方法;外植体经低温处理3d效果最好;诱导愈伤组织阶段表现最好的培养基是: MS+BA1.5mg/L+IAA1.0mg/L+蔗糖40g/L +琼脂粉7g/L,可以获得红色紧密型胚性愈伤组织;分化效果最好的培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖40g/L +琼脂粉7g/L;增殖最好的培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L +蔗糖30g/L+琼脂粉7g/L;生根效果最好的培养基为1/2MS +IBA 0.5mg/L +蔗糖30 g/L +琼脂粉7g/L。 3.三倍体植株与二倍体植株相比,具有叶片肥厚宽大、茎较粗壮等特征;三倍体植株的叶片极显著宽于二倍体,长度差异不显著;三倍体植株的气孔长、宽均极显著大于二倍体;对形态学上鉴定为三倍体的植株作染色体计数,染色体数目均为2n=3x=33。