收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

棉花生长素应答因子的克隆及其功能初步分析

张锋  
【摘要】: 棉花是一种重要的全球性的经济作物。棉花纤维以其好的保暖性、保湿性、透气性等不可为其它纤维代替的优点,越来越受到世界各国的重视。同时人们对纤维品质的追求,也越来越高。随着分子生物学的发展,利用基因工程改良棉纤维品质展现了广阔的前景。如通过分离鉴定棉纤维发育相关的基因,并导入棉花中,使其过量或缺失表达,影响纤维的发育。虽然对棉花纤维的改良已有很多成功的例子,但是还未见从生长素响应因子(ARF,auxin response factor)方面的报道。 生长素在植物的生长和发育过程中起着关键的作用。据报道,生长素促进纤维细胞的伸长。纤维原始细胞在开花前3天到前2天,可以由于IAA的刺激从而获得细胞延伸的生理能力。开花前后可以由于外施IAA,明显增加胚珠的纤维数量。ARF是生长素信号转导途径中的关键因子,它可以接受生长素传递的信号,启动或是抑制下游基因的表达。 本研究通过电子克隆技术和生物信息学知识,结合RACE技术,克隆到了一个棉花中的新ARF基因,命名为ARF3(GENBANK登录号为:EF467605),并根据已知的序列,通过RT-PCR的方法获得了棉花中ARF10基因含完整读码框的cDNA序列。将以上获得的cDNA序列克隆到pCAMBIA1301表达载体上,构建了pCAMBIA1301-ARF3和pCAMBIA1301-ARF10植物表达载体。在农杆菌GV3101介导下,通过真空渗透转化技术转化模式植物拟南芥,得到了批量的转基因植株。ARF3转基因植株经抗性筛选,得到了12株T1代转基因植株;ARF10转基因植株经抗性筛选,得到11株T1代转基因植株。PCR检测证明,目的基因已成功导入模式植物拟南芥中;RT-PCR检测目的基因在转基因植株中得到表达。对转基因植株表型的观察,在得到转基因植株纯合子之后进行。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 郝彦伟;李正国;杨迎伍;邓伟;苏丽艳;;番茄CYP71基因的克隆及其功能的初步分析[J];热带作物学报;2009年12期
2 刘艳梅;韩建民;董金皋;;玉米大斑病菌钙调磷酸酶B亚基基因的克隆与生物信息学分析[J];微生物学报;2008年09期
3 王飞燕;吴健;张佳景;程琳;孔福苓;彭真;卢钢;;番茄生长素应答因子SlARF8-1的分离与SlARFs表达特征分析[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2011年03期
4 李蕊沁;冯树丹;于莹;吕召志;黎莉;徐明华;尹悦佳;郝东云;;羊草几丁质酶ClassⅡ基因的克隆、生物信息学分析及原核表达[J];中国农业科技导报;2010年02期
5 肖海霞;托乎提·阿及德;田可川;刘明军;陈从英;;应用RACE技术扩增驴DGAT1基因3′端及序列分析[J];中国奶牛;2011年20期
6 张浩;蔡文伟;张树珍;杨学;刘琳;杨本鹏;;龙血树DCDPK2基因的克隆及表达分析[J];热带作物学报;2010年07期
7 张玉梅;杨毅;汪松虎;刘永胜;;番茄生长素应答因子ARF1基因RNA干涉载体的构建及其对番茄的转化[J];安徽农业科学;2007年11期
8 马春泉;张莹;崔颖;王冰;王玉婷;刘金玲;王宏建;李海英;;甜菜M14品系花期cDNA文库的构建及特异表达基因的筛选[J];植物研究;2008年04期
9 徐大伟;张雨良;檀根甲;;棉花八氢番茄红素脱氢酶GhPDS1基因的克隆与表达谱分析[J];棉花学报;2011年03期
10 王邦俊,王强,张志刚,张劲松,李学刚;利用RACE技术扩增大豆抗病基因同源cDNA 5′末端序列[J];遗传;2003年04期
11 孔凡晶,马有志,陈孝,辛志勇;差异显示和RACE技术的发展与应用[J];生物技术通报;2003年01期
12 刘振林,尹伟伦,戴思兰;新的BADH同源基因:甘菊BADH基因[J];分子植物育种;2005年04期
13 王玉成,禇延广,姜静,杨传平,刘桂丰;紫杆柽柳与其它物种脂质转运蛋白基因编码蛋白的同源性比较[J];植物生理学通讯;2005年01期
14 王旭静,王志兴,贾士荣;海岛棉GbXET基因的克隆及过量表达对酵母细胞伸长的影响[J];农业生物技术学报;2005年03期
15 黄先忠,马正强,魏灵珠,刘彤,张强;小麦泛素融合降解蛋白基因全长cDNA的克隆及分析[J];石河子大学学报(自然科学版);2004年05期
16 王玲平,曹家树,叶纨芝,向珣,余小林;十字花科植物CYP86MF同源基因的克隆及特征分析[J];农业生物技术学报;2005年02期
17 孟丽,戴思兰;花色研究基因新资源:瓜叶菊蓝色花形成相关基因PCFH[J];分子植物育种;2005年04期
18 马志刚,鄢波,黄兴奇,王铃仙,曾仲奎;苦参凝集素蛋白基因的分离克隆(英文)[J];植物学报;2001年08期
19 马月萍,方晓华,申业,陈凡,戴思兰;植物开花基因新资源:甘菊中花分生组织决定基因DFL[J];分子植物育种;2004年04期
20 王桂荣,吴孔明,梁革梅,郭予元;棉铃虫中肠钙粘蛋白基因的克隆、表达及Cry1A结合区定位[J];中国科学C辑;2004年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李国平;陈保生;;不易感动脉粥样硬化动物——树鼩载脂蛋白A5基因的克隆、表达和结构分析[A];2004全国血脂分析及其临床应用学术研讨会、第七届全国脂蛋白学术会议论文汇编[C];2004年
2 叶冰莹;连玲;陈由强;陈如凯;;甘蔗UGPase基因cDNA3'端的扩增[A];中国植物生理学会第十次会员代表大会暨全国学术年会论文摘要汇编[C];2009年
3 刘贯山;陈珈中国农业大学生物学院植物生理生化国家重点实验室;王学臣;;蚕豆钙依赖蛋白激酶VfCPK1的基因克隆和表达分析[A];2004中国植物生理生态学学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年
4 吴健敏;阳玉彪;吕茂民;谢放;郭艳茹;章金刚;;五指山猪内源性反转录病毒5’端非编码区的RACE扩增及其结构和调控元件分析[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
5 张晓军;田丽萍;张绍萍;李富花;相建海;;中国明对虾肌动蛋白基因的克隆和分析[A];中国动物学会甲壳动物学分会、中国海洋与湖沼学会甲壳动物学分会2004年甲壳动物学分会会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2004年
6 周平坤;隋建丽;杨素霞;;低剂量辐射诱导新基因的转录调控和初步功能分析[A];中国毒理学会第三届全国学术会议论文(摘要)集[C];2001年
7 陈敏;陈珈;王学臣;;玉米Na~+/H~+反向转运器编码基因zmNHX1的克隆及其表达特性分析[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年
8 丁兆军;王台;;水稻减数分裂基因OsSPO11-1的克隆与表达特性分析[A];中国植物学会七十周年年会论文摘要汇编(1933—2003)[C];2003年
9 夏秀英;苏乔;安利佳;;辽宁碱蓬胆碱单加氧酶基因转化欧美杨107培育耐盐植株的研究[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
10 姚冬生;刘大岭;管敏;谢春芳;宋艳萍;;Aflatoxin-detoxifizyme的质谱鉴定及其cDNA的克隆与表达[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 陈茂华;两种麦蚜乙酰胆碱酯酶的分子生物学研究[D];南京农业大学;2005年
2 黎云祥;珍稀濒危植物珙桐(Davidia involucrata)苞片差异表达基因的克隆与分析[D];四川大学;2002年
3 王桂荣;棉铃虫气味结合蛋白的分子结构及对气味的识别[D];中国农业科学院;2002年
4 高志强;猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组分子遗传特征分析[D];中国农业大学;2003年
5 齐湘杰;高恶性膀胱移行细胞癌与相应正常上皮差异表达基因的克隆及功能研究[D];天津医科大学;2003年
6 余爱丽;斑茅抗逆性评价及其BADH基因的克隆表达[D];福建农林大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张锋;棉花生长素应答因子的克隆及其功能初步分析[D];华南热带农业大学;2007年
2 张玉梅;番茄生长素应答因子ARF1、ARF2基因RNAi植物表达载体的构建及其转化番茄的研究[D];四川大学;2007年
3 郭惠明;陆地棉纤维发育相关基因Ghkob的克隆及功能分析[D];中国农业科学院;2005年
4 郭宝福;中国野生菰谷蛋白基因分子克隆及序列分析[D];东南大学;2006年
5 林水玉;香蕉中S-腺苷-L-蛋氨酸合成酶基因的克隆及表达分析[D];华南热带农业大学;2006年
6 王业桥;龙血树钙依赖型蛋白激酶基因的克隆与表达分析[D];华南热带农业大学;2007年
7 张彦萍;RACE初步克隆胡麻β-酮脂酰-CoA合酶基因以及胡麻再生体系建立的研究[D];兰州大学;2009年
8 赵百慧;Ⅰ:沙蚕纤溶酶—沙蚕激酶的克隆、表达及活性测定 Ⅱ:汉滩病毒截短核蛋白的表达和初步应用[D];青岛大学;2004年
9 亓飞;RACE技术克隆大菱鲆蛋白磷酸酶1催化亚基基因和金属蛋白酶基因及其序列分析[D];中国海洋大学;2006年
10 唐博;骆驼β-防御素caBD-1 cDNA的克隆及序列分析[D];内蒙古农业大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978