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秋茄抗菌、抗胃溃疡活性产物研究

符健  
【摘要】: 生长于热带、亚热带潮间带的红树林,在我国主要分布于海南、广西、广东、福建及香港澳门等地。其不仅具有防海潮、保护海岸、维护生态平衡的功能,在民间还是传统药用植物。因海洋红树植物生长在高湿、高盐和高渗透压的特殊环境,可能含有普通陆地植物所没有的特殊化学成分,故引起学者强大的兴趣,现今已成为海洋药物研究开发的热点之一。鉴于此,对海洋红树植物进行提取分离,筛选出具有药理活性的提取物或者单体化合物,对于红树植物的进一步研究、开发、利用和保护等均具有重要意义。 红树林植物-秋茄的根、枝、叶和果,分别经95%乙醇提取,得到浓缩液和残渣,将浓缩液分别减压干燥得到根、枝、叶和果醇提取物,将残渣经水提取得到浓缩液,干燥,分别得到根、枝、叶和果的水提取物。枝水提物经大孔树脂分离,浓缩、干燥得到A、B和C三部位。其中A部位经硅胶柱层析、C-18柱层析、Sephadex LH-20柱层析和薄层层析等技术分离纯化得到单体化合物HS-2,B部位经硅胶柱层析、C-18柱层析和薄层层析等技术分离纯化得到单体化合物HS-4, B部位经硅胶柱层析、C-18柱层析、Sephadex LH-20柱层析和薄层层析等技术分离纯化得到单体化合物HS-5。经核磁共振(1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HMQC、H-H COSY)、质谱(MS)等现代波谱分析技术分析鉴定,HS-2为京尼平甙酸(Geniposidic acid),化学名:Cyclopenta[C]pyran-4-carboxylicacid 1-(β-D-glucopyranosyloxy)-1,4a ,5,7a- tetrahydro- 7- (hydroxymethyl)- (1s,4as,7as) -;HS-4为HS-2衍生物,是一个新的化合物,命名为10-(4’-羟基-3’,5’-二甲氧基苯甲酰基)-京尼平甙酸,英文名:10-(4’-hydroxy-3’,5’-dimethoxybenzoyl)-geniposidic acid;HS-5尚在进行结构鉴定。 取秋茄枝水提取物B部位进行小鼠急性毒性试验。结果表明,枝水提取物B部位灌胃给药,小鼠未见明显毒性反应,最大耐受量(maximum tolerable dose,MTD)为4.0g/kg,说明其半数致死量(median lethal dose,LD50)大于4.0g/kg,表明秋茄枝水提取物B部位急性毒性作用较小。利用大鼠幽门结扎型和水浸束缚应激型胃溃疡模型,探讨秋茄枝水提取物B部位抗实验性胃溃疡功能,结果显示秋茄枝水提物B部位能明显减轻幽门结扎型胃溃疡大鼠胃粘膜损伤的程度,高、中、低3个剂量的溃疡抑制百分率分别为模型对照组的55.6%、36.1%、30.6%,其抗溃疡机理可能与降低胃蛋白酶活性和胃液量、提高血清和胃组织中NO含量有关。秋茄枝水提取物B部位能明显减轻应激型胃溃疡大鼠胃粘膜损伤的程度,高、中、低3个剂量的溃疡抑制百分率分别为模型对照组的41.1%、40.4%、25.4%,其抗溃疡作用可能与提高血清和胃组织中SOD活力、降低血清和胃组织中MDA含量有关。对2种胃溃疡模型试验结果表明,秋茄水提物B部位可有效地减轻应激型和幽门结扎型胃溃疡大鼠的胃粘膜损伤。 采用常量稀释法分别检测秋茄果、叶、根、枝四个部位的乙醇和水提取物及A、B部位对10种临床常见产酶菌株的体外抗菌作用,用最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)表示各部分的抗菌活性,采用同一方法分别检测从秋茄枝水提物A、B部位分离出的单体化合物HS-2、HS-4和HS-5的体外抗菌活性。结果发现,秋茄根、叶、果和枝的水和乙醇提取物及枝水提取物A、B部位对多数临床分离菌株均显示有体外抑菌和杀菌活性。其中以枝水提取物B部位的体外抗菌活性最强,对10种临床常见产酶菌株的MIC值为1.953mg/ml,最低杀菌浓度试验B部位除对产β-内酰胺酶乙型链球菌的MBC值为15.625mg/ml外,对其他9种临床常见产酶菌株的MBC值均为3.90625mg/ml。3个单体化合物HS-2、HS-4和HS-5对所试产酶革兰阳性菌有明显的抑制作用和一定的杀菌作用,其中HS-2对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和乙型链球菌的MIC值分别为0.5mg/ml、0.125mg/ml和0.25mg/ml,HS-4对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和乙型链球菌的MIC值分别为0.125 mg/ml、0.03125 mg/ml和0.0625mg/ml,HS-5对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和乙型链球菌的MIC值分别为0.25mg/ml、0.125mg/ml和0.25 mg/ml。HS-4对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌MBC值为1mg/ml,HS-5对表皮葡萄球菌MBC值为1mg/ml,提示在所分离的单体化合物中,以HS-4的抗菌活性较强。对所试产酶革兰阴性菌,除HS-2对肠球菌有较弱的抑制作用外,其它单体化合物在所试浓度下未见抗菌作用。


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