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宣肺化痰活血法治疗支气管哮喘的疗效观察及其对LTD4、NGF的影响

许丽梅  
【摘要】:支气管哮喘是一种常见的慢性气道炎症性疾病,气道炎症和气道重塑是支气管哮喘的两个主要病理学特征,抗炎及抗气道重塑治疗是哮喘的基本治疗方法。目前以糖皮质激素抗炎及支气管舒张剂解痉平喘为主要手段的治疗方案,对哮喘气道炎症具有一定的改善作用,但对气道重塑的改善作用却有限,且长期、大剂量使用糖皮质激素将不可避免地出现不良反应及毒副作用。而中医药在治疗支气管哮喘时具有疗效好、副作用小、药效缓和而持久的优点。中医认为“痰瘀阻肺,肺气不宣”是哮喘的基本病机,宣肺化痰活血法是哮喘的根本治疗大法。我们前期的研究表明,宣肺化痰活血法不仅能改善哮喘患者的临床症状,还能改善患者的肺功能、降低哮喘患者血浆内皮素和血浆粘度水平。动物实验研究表明,宣肺化痰活血法能调节CAMP/cGMP的失衡,抑制哮喘小鼠气道炎症细胞浸润,对豚鼠离体气管的平滑肌有松弛作用,并有抗组胺、抗乙酰胆碱的作用,整体豚鼠有延长哮喘潜伏期的作用,降低气道高反应性。此外,还能减少过敏性哮喘豚鼠肺部胶原纤维形成,改善毛细血管增厚的基底膜,抑制平滑肌细胞增殖,从而可能在对抗哮喘气道重塑中发挥作用。本研究分临床和实验研究两部分:临床研究部分,观察宣肺化痰活血中药对哮喘患者的临床症状、证候积分、肺功能及血清白三烯D4(LTD4)、神经生长因子(NGF)的影响;实验研究部分,观察宣肺化痰活血中药对哮喘大鼠的气道病理改变、支气管总管径厚度、平滑肌厚度及血清NGF的影响,并分析支气管总管径厚度、平滑肌厚度与血清NGF的相关性。从而探讨该法在支气管哮喘治疗中的意义及其可能的作用机制。 1.临床研究部分 目的: 本课题通过前瞻性对照的临床研究,观察宣肺化痰活血法对支气管哮喘患者的临床证候、证候积分、肺功能、血清LTD4、 NGF的影响,探讨宣肺化痰活血法对支气管哮喘患者的作用。 内容与方法: 本研究58例病例全部为2010年1月—2012年2月广州中医药大学第一附属医院呼吸专科门诊及病房的支气管哮喘患者,符合本研究的诊断标准、纳入标准和排除标准。按随机方法分为观察组30例,对照组28例。所有纳入研究的病例治疗前进行中医证候积分评分,肺功能测定,ELISA法检测血清LTD4、 NGF的含量,然后给予相应治疗,治疗组为西医常规治疗基础上加用根据宣肺化痰活血法而拟定的中药汤剂,对照组则为单纯西医常规治疗,疗程为10天,治疗结束后再次进行中医证候积分评分,肺功能测定,EL ISA法检测血清LTD4、 NGF含量。统计分析两种方法对支气管哮喘患者的临床症状、证候积分、肺功能及血清LTD4、 NGF的影响。 研究结果: (1)在临床症状评分方面:两组治疗前后自身比较均有明显的改善(P0.01)其中,治疗组在喘息、咳痰、哮鸣音等方面的改善作用优于对照组(P0.05)。 (2)在证候积分方面:两组治疗前后自身比较均有明显的改善(P0.05),治疗组中医证候积分减少幅度大于对照组,差异具有显著性(P0.05)。 (3)在综合临床疗效方面:两组的综合临床疗效无显著性差异(P0.05) (4)在肺功能改善方面:两组治疗后PEF占预计值%、FEVl占预计值%均比治疗前有所提高(P0.05),两组间治疗后PEF%、 FEV1%比较,差异无统计学意义(P0.05)。 (5)在血清LTD4、 NGF水平方面:两组治疗后血清LTD4、 NGF水平均较其自身治疗前降低,差异具有显著性(P0.01);两组间治疗后血清LTD4、 NGF水平比较,治疗组较对照组低,差异具有显著性(P0.01)。 (6)在安全性方面:两组治疗后与治疗前血WBC、 RBC、 PLT、 ALT、 AST、 BUN、 Cr比较,差异均无显著性(P0.05)。 研究结论: (1)西药治疗基础上联合宣肺化痰活血中药能改善哮喘患者症状、证候积分、证候疗效及临床综合疗效,其较单纯西医治疗对哮喘患者喘息、咳痰、哮鸣音、中医证候积分具有更明显的改善作用,在一定程度上体现了中西医结合治疗哮喘的优势。 (2)西药治疗基础上联合宣肺化痰活血中药能改善哮喘患者肺功能,但其效果并不优于单纯西药治疗。 (3)血清LTD4、 NGF水平均可作为监测哮喘气道炎症及气道重塑的指标,与哮喘病情严重程度密切相关。西药治疗基础上联合宣肺化痰活血中药能显著降低哮喘患者血清LTD4及NGF水平,提示宣肺化痰活血中药可能是通过降低哮喘患者血清LTD4及NGF水平而达到治疗目的,该作用可能是宣肺化痰活血中药治疗哮喘产生疗效的重要因素之一。 (4)此外,宣肺化痰活血中药安全性较好,未见明显副作用。 2.实验研究部分 目的: 通过建立支气管哮喘大鼠模型,从血清LTD4、 NGF含量及病理学两方面观察宣肺化痰活血法对哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响,从而探讨宣肺化痰活血中药治疗哮喘的作用及其可能的作用机理。 内容与方法: 72只SPF级健康SD大鼠随机分为6组,每组12只,A组为空白组,B组为模型组,C组为中药高剂量组,D组为中药中剂量组,E组为中药低剂量组,F组为地塞米松组。采用腹腔注射卵蛋白、氢氧化铝混悬液,雾化吸入卵蛋白溶液的方法建立哮喘大鼠动物模型。在第1天腹腔注射lml OVA/AL (OH)3混合液(含OVA l0mg和AL(OH)200mg)致敏,第8天再次致敏,第15天开始应用超声雾化器于半密闭有机玻璃容器中以雾化吸入卵蛋白生理盐水溶液以激发哮喘,隔日11次,每次激发时间为20min,持续8周,卵蛋白激发浓度分别为:第1、2周1%;第3、4周1.5%;第5、6周2%;第7、8周2.5%。空白组则以等体积(1m1)生理盐水腹腔注射,生理盐水雾化吸入。C、D、E、F组从第一次激发开始给药,C、D、E组分别按射麻止喘液40g/kg、20g/kg、10g/kg灌胃给药,日1次,连续8周,F组给予0.5mg/kg地塞米松溶液灌胃,日1次,持续8周。A、B组给予等体积(2m1)生理盐水灌胃。末次给药后24h,用10%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉,腹主动脉抽血后处死,开胸结扎,迅速取出右肺,用4%多聚甲醛灌注及固定,石蜡包埋,用于HE染色病理切片,血液离心后取血清于-30℃保存,ELISA法检测LTD4、 NGF含量。 研究结果: (1)大鼠气道病理学改变:空白组大鼠支气管、肺组织结构正常,各级支气管上皮完整,肺泡间隔正常,无或仅有极少量炎性细胞浸润。模型组大鼠支气管黏膜上皮大片坏死和脱落,管壁炎性细胞浸润明显,气道壁及气道平滑肌明显的增厚,黏膜皱褶增多,黏膜下水肿,黏膜下层增宽,管腔狭窄。中药高、中、低剂量组及地塞米松组大鼠气道病理改变与模型组相似,但程度较轻,仅见轻度炎性细胞浸润,支气管粘膜上皮基本完整,肺泡间隔、平滑肌和基底膜轻度增厚,程度较模型组轻。 (2)空白组、中药各剂量组及地塞米松大鼠支气管总管径厚度、平滑肌厚度均小于模型组大鼠,差异具有显著性(P0.01)。中药高、中、低剂量组及地塞米松之间大鼠支气管总管径厚度、平滑肌厚度比较,差异无显著性(P0.05)。 (3)模型组大鼠血清LTD4、NGF含量均大于空白组大鼠,差异具有显著性(P0.01);中药高、中、低剂量组及地塞米松组大鼠血清LTD4、 NGF含量均小于模型组大鼠,差异具有显著性(P0.01)。中药高、中、低剂量组及地塞米松组之间大鼠血清中LTD4、 NGF含量比较,差异无显著性(P0.05)。 (4)相关性分析结果显示大鼠气道总管壁厚度分别与大鼠血清LTD4、 NGF(r=0.687,P0.01,r=0.723,P0.01)呈正相关关系;大鼠气道平滑肌厚度分别与大鼠血清LTD4、 NGF (r=0.629,P0.01,r=0.712,P0.01)呈正相关关系。 研究结论: (1)宣肺化痰活血中药能减轻哮喘气道炎症细胞浸润,改善气道粘膜上皮坏死,能降低哮喘大鼠气道总管壁、平滑肌厚度,具有改善哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的作用,效果与地塞米松相当。宣肺化痰活血中药高、中、低剂量对哮喘大鼠气道总管壁、平滑肌厚度的改善作用相当,未显示出量效差异。 (2)宣肺化痰活血中药能降低哮喘大鼠血清LTD4及NGF水平,其效果与地塞米松相当。宣肺化痰活血中药可能通过降低哮喘患者血清LTD4及NGF水平而达到治疗目的,该作用可能是宣肺化痰活血中药治疗哮喘产生疗效的重要因素之一。 (3)哮喘大鼠血清LTD4、 NGF水平与哮喘气道重塑密切相关,可作为反映气道重塑的指标。宣肺化痰活血中药可能通过降低LTD4、 NGF水平而改善气道重塑,这可能也是本方治疗哮喘的机制之一。


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