不同频率电针背俞穴对CFS大鼠HPA轴及免疫影响与临床研究

【摘要】：目的:探讨2Hz、100Hz电针背俞穴对慢性疲劳综合征(CFS)患者的影响。同时,通过动物实验探讨2Hz、100Hz电针背俞穴对慢性疲劳大鼠行为学、HPA轴及免疫系统的影响。方法:本课题研究分为临床及动物实验两个方面:1.临床研究将符合纳入标准的92例慢性疲劳综合征患者按随机数字表法分为三组,其中100Hz组31例,2Hz组30例,常规针刺组31例。100Hz(100Hz,1mA)组取穴:以背俞穴为主,选取肝俞、心俞、脾俞、肺俞、肾俞。2Hz(2Hz,1mA)组取穴同100Hz组。常规针刺组取穴同100Hz组及2Hz组,不加电刺激。经过2个疗程治疗后,根据各组患者疲劳积分、抑郁积分、焦虑积分、SF-36各维度积分、33个临床症状积分进行评价。其中疲劳、抑郁、焦虑量表积分分三个时间点进行观察(治疗前,治疗1疗程后,治疗2疗程后),SF-36各维度积分、33个临床症状积分分两个时间点进行观察(治疗前,治疗2疗程后)。2.动物实验以SPSS20.0随机数字生成器将60只大鼠分为空白组、100Hz组、2Hz组、常规针刺组、模型组各12只。采用睡眠剥夺+力竭游泳+慢性束缚对100Hz组、2Hz组、常规针刺组、模型组大鼠进行造模刺激。造模结束后进行治疗:100Hz(100Hz,1mA)组治疗取穴:肺俞、心俞、脾俞、肝俞、肾俞;2Hz(2Hz,1mA)组治疗取穴同100Hz组。常规针刺组取穴同100Hz组及2Hz组,不加电刺激。以上组别在进行治疗同时继续同前造模刺激,模型组继续同前造模刺激但不治疗,空白组不做任何干预。各组分别在造模前、造模后与治疗后进行行为学评估,治疗4周后经腹主动脉采血、断头取脑,采用酶联免疫法检测其血液中免疫因子水平、ACTH与C0RT水平,以qPCR法检测其下丘脑 5-HT1aRmRNA、CRHmRNA 的表达。结果:1.疲劳积分:治疗1疗程后,2Hz组积分较治疗前相比显著降低,差异具有统计学意义(P0.05),100Hz组及常规针刺组积分较治疗前相比未见明显降低,差异不具有统计学意义(P0.05);组间积分比较,2Hz组低于100Hz组及常规针刺组,差异具有统计学意义(P0.05),100Hz组与常规针刺组相比,差异不具有统计学意义(P＞0.05)。治疗2疗程后,三组患者的疲劳积分均显著低于治疗前,差异具有统计学意义(P0.05),组间比较,2Hz组低于100Hz组,100Hz组低于常规针刺组,差异均具有统计学意义(P0.05)。2.抑郁积分:治疗1疗程后,2Hz组及100Hz组积分较治疗前相比均显著降低,差异具有统计学意义(P0.05),常规针刺组积分较治疗前相比未见明显降低,差异不具有统计学意义(P0.05);组间比较,2Hz组低于常规针刺组,差异具有统计学意义(P0.05),而2Hz组与100Hz组、100Hz组与常规针刺组相比,差异均不具有统计学意义(P0.05)。治疗2疗程后,三组患者的抑郁积分均显著低于治疗前,差异具有统计学意义(P0.05),组间比较,2Hz组低于100Hz组,100Hz组低于常规针刺组,差异均具有统计学意义(P0.05)。3.焦虑积分:治疗1疗程后,2Hz组积分较治疗前相比显著降低,差异具有统计学意义(P0.05),100Hz组及常规针刺组积分较治疗前相比未见明显降低,差异不具有统计学意义(/0.05);组间比较,2Hz组低于常规针刺组,差异具有统计学意义(P0.05),而2Hz组与100Hz组、100Hz组与常规针刺组相比,差异均不具有统计学意义(P0.05)。治疗2疗程后,三组患者的焦虑积分均显著低于治疗前,差异具有统计学意义(P0.05),组间比较,2Hz组低于100Hz组,100Hz组低于常规针刺组,差异均具有统计学意义(P0.05)。4.SF-36评分:治疗后,三组患者8个维度积分均较治疗前显著升高,差异具有统计学意义(P0.05)。①在GH、PF、RP、RE、SF方面:组间积分比较:2Hz组高于100Hz组,100Hz组高于常规针刺组,差异均具有统计学意义(P0.05);组间积分差值比较:在GH、RP方面,2Hz组大于100Hz组,100Hz组大于常规针刺组,差异均具有统计学意义(P0.05);在PF、RE方面,2Hz组与100Hz组差值相当(P0.05),且均大于常规针刺组(P0.05);在SF方面,2Hz组大于100Hz组与常规针刺组(P0.05),100Hz组与常规针刺组差值相当(P0.05)。②在VT、MH积分与积分差值方面,2Hz组与100Hz组均优于常规针刺组(P0.05),2Hz组与100Hz组积分与积分差值相当(P0.05)。③在BP方面,三组积分与积分差值相当,差异不具有统计学意义(P0.05)。5.33个临床症状积分:①100Hz电针治疗具有相对优势的症状包括:健忘、口干、关节疼痛、便溏,其积分较治疗前显著降低(P0.05),且100Hz组低于2Hz组及常规针刺组(P0.05)。组间积分差值比较:在口干方面,100Hz组大于常规针刺组(P0.05);100Hz组与2Hz组,2Hz组与常规针刺组相比,差异均不具有统计学意义(P0.05)。在关节疼痛方面,100Hz组大于2Hz组(P0.05);100Hz组与常规针刺组,2Hz组与常规针刺组相比,差异均不具有统计学意义(P0.05)。在便溏方面,100Hz组大于2Hz组及常规针刺组(P0.05);2Hz组与常规针刺组相比,差异均不具有统计学意义(P0.05);在健忘方面,三组差值比较不具有统计学意义(P0.05)。②2Hz电针治疗具有相对优势的症状包括:神疲乏力、肌肉痛或酸困不适、精神抑郁、心悸、过敏、颈腋下淋巴结肿大、盗汗、感到肌力下降、头痛、胸胁胀满不适、便秘、食欲不振、思考问题反应迟钝、做事注意力不集中,其积分较治疗前相比显著降低(P0.05),且低于100Hz组及常规针刺组(P0.05);组间积分差值比较:在感到肌力下降方面,2Hz组大于100Hz组、100Hz组大于常规针刺组(P0.05);在神疲乏力、头痛、胸胁胀满不适、便秘方面,2Hz组大于100Hz组及常规针刺组(P0.05),100Hz组与常规针刺组相比,差异不具有统计学意义(/＞0.05);在肌肉痛或酸困不适、心悸、食欲不振、思考问题反应迟钝方面,2Hz组大于常规针刺组(P0.05),2Hz组与100Hz组、100Hz组与常规针刺组比较,差异均不具有统计学意义(P0.05);在精神抑郁、过敏、颈腋下淋巴结肿大、盗汗、做事注意力不集中方面,三组差值相当,差异不具有统计学意义(P0.05)。③100Hz组与2Hz组电针治疗效果相当的症状包括:咽喉疼痛、脘腹满闷不适、嗜睡,且100Hz组、2Hz组以上临床症状积分均低于常规针刺组(P0.05),组间积分差值变化与积分变化趋势一致。④三组治疗效果相当的症状包括:急躁易怒、焦躁不安、善太息、失眠、恶心、吞酸,且以上临床症状积分与治疗前相比显著降低,差异具有统计学意义(P0.05);其组间积分差值变化与积分变化趋势一致。⑤与治疗前未见明显差异的症状包括:头晕、暖气或呃逆、自汗、低热、咳嗽、畏光羞明。其组间积分差值变化与积分变化趋势一致。三组患者临床症状总积分均显著降低,与治疗前相比,差异具有统计学意义(P0.05);组间比较,2Hz组低于100Hz组,100Hz组低于常规针刺组,差异均具有统计学意义(P0.05),且组间积分差值变化趋势与积分变化一致。6.大鼠行为学结果:造模前,五组大鼠各行为学结果无显著差异(P0.05);造模后,模型组、100Hz组、2Hz组、常规针刺组与空白组大鼠比较,体重增长较慢、力竭游泳时间缩短、鼠尾悬挂不动时间延长;旷场试验中,在中央格停留时间延长、水平与垂直运动次数减少,差异均具有统计学意义(P0.05)。治疗后,100Hz组、2Hz组以及常规针刺组与模型组大鼠比较,体重增长较快、力竭游泳时间延长、鼠尾悬挂不动时间缩短、在中央格停留时间缩短、水平与垂直运动次数增多,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。7.大鼠免疫因子水平:治疗后,三个治疗组大鼠血清IL-4水平降低、IFN-γ水平升高、IFN-γ/IL-4比值升高、IL-2水平升高、IL-10水平降低,与模型组相比,差异均具有统计学意义(P0.05)。其中2Hz组IL-4水平低于100Hz组,100Hz组低于常规针刺组,差异均具有统计学意义(P0.05);2Hz组IFN-丫水平高于100Hz组及常规针刺组(P0.05),而100Hz组与常规针刺组相比,差异不具有统计学意义(P0.05);2Hz组IFN-γ/IL-4比值高于100Hz组,100Hz组高于常规针刺组,差异均具有统计学意义(P0.05);2Hz组大鼠血清IL-2水平升高,与100Hz组及常规针刺组相比,差异具有统计学意义(P0.05),100Hz组与常规针刺组相比,差异不具有统计学意义(P0.05);三个治疗组大鼠血清IL-10水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。8.大鼠血清中ACTH、CORT水平:三个治疗组大鼠血清中ACTH、CORT水平下降,与模型组相比,差异具有统计学意义(P0.05);且组间比较,2Hz组大鼠血清ACTH水平下降,与常规针刺组相比,差异具有统计学意义(P0.05),而100Hz组与常规针刺组,100Hz组与2Hz组相比,差异均不具有统计学意义(P＞0.05)。2Hz组大鼠血清CORT水平下降,低于100Hz组,而100Hz组低于常规针刺组,差异均具有统计学意义(P0.05)。9.大鼠下丘脑5-HT1aRmRNA、CRHmRNA的表达:三个治疗组大鼠下丘脑5-HT1aRmRNA表达上升,且组间比较:2Hz组高于100Hz组,差异具有统计学意义(P0.05),100Hz组与常规针刺组水平相当,差异不具有统计学意义(P＞0.05);三个治疗组大鼠下丘脑CRHmRNA表达下降,与模型组相比,差异均具有统计学意义(P0.05);且组间比较,2Hz组低于100Hz组,100Hz组低于常规针刺组(P0.05)。结论:电针背俞穴治疗慢性疲劳综合征具有明显优势,其中2Hz电针治疗效果更佳。动物实验说明电针背俞穴不仅能使大鼠的体重增长速度加快,行为活动能力增强,还可调节本病大鼠的免疫功能,抑制Th细胞向Th2分化,使IL-2水平升高、IL-10水平降低来帮助维持Th1/Th2的平衡。且电针背俞穴还可使慢性疲劳大鼠血清中ACTH与CORT水平下降,调节下丘脑内5-HT1aRmRNA、CRHmRNA的表达;临床研究说明电针背俞穴能改善患者的疲劳、抑郁、焦虑状态,提高患者生活质量与活动能力,且2Hz电针效果更优、起效较快且作用较持久,与动物实验结果相符合。