收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

黄连中黄连碱及表小檗碱抗幽门螺杆菌作用机制研究

谈丽华  
【摘要】:目的:比较黄连中小檗碱、药根碱、表小檗碱、巴马汀和黄连碱抑制幽门螺杆菌(HHelicobacter pylori,H.pylori)及抑制脲酶的作用,并尝试以洋刀豆脲酶(Jack bean urease,JBU)为模式酶,探讨黄连碱及表小檗碱抑制幽门螺杆菌脲酶(Helicobacter pylori urease,HPU)的潜在作用机理,以期为黄连治疗H.pylori感染相关性疾病提供基础的研究资料。方法:1.黄连五种生物碱抑制H.pylori作用研究采用琼脂稀释法,分别以克拉霉素和甲硝唑为阳性药,测定黄连中五种生物碱抑制H.pylor的最小抑菌浓度。2.黄连五种生物碱抑制脲酶作用研究采用靛酚蓝显色法,以乙酰氧肟酸为阳性对照,测定黄连中五种生物碱抑制JBU及HPU的半数抑制浓度(IC50)。3.黄连碱、表小檗碱抑制脲酶机理研究分别以HPU和JBU为研究载体,运用分子对接试验、生物碱-硫醇试剂-脲酶相互作用试验、脲酶Ni2+竞争性抑制剂保护试验及脲酶再活化试验,探讨黄连碱及表小檗碱抑制脲酶的动力学及抑制位点。结果:1.抗H.pylori作用研究黄连中五种生物碱抑制H.pylori的最小抑菌浓度在25-100 μg/mL之间。其中,黄连碱作用效果最佳,其次是小檗碱,表小檗碱,巴马汀和药根碱。2.对脲酶活性抑制作用研究黄连中五种生物碱均能不同程度地抑制HPU及JBU的活性,其抑制HPU的IC50值在2.96-4631.98 μM之间,抑制JBU的IC50值在2.23-10000 μM之间。其中,表小檗碱抑酶作用最强,远远优于标准脲酶抑制剂乙酰羟肟酸,其次是巴马汀、黄连碱、药根碱和小檗碱。3.黄连碱抑制脲酶机理研究研究结果显示,黄连碱抑制HPU及JBU的模式均为混合型;黄连碱可通过与HPU的Ni2+及巯基基团结合,从而影响HPU的活性,而JBU结构中的巯基基团与黄连碱抑制JBU的活性密切相关;此外,黄连碱对两种脲酶的抑制作用具有可逆性,加入二硫苏糖醇可恢复二者的活性。4.表小檗碱抑制脲酶机理研究研究结果显示,表小檗碱抑制HPU及JBU的模式分别为可逆的反竞争性抑制类型及竞争性抑制类型;表小檗碱抑制HPU及JBU的作用可能与其与脲酶氨基酸上的巯基结合有关,而与Ni2+无关。结论:结果显示,黄连中五种生物碱均能有效的抑制H.pylori及脲酶的活性。但是这五种生物碱抗H.pylori与脲酶的作用强弱却存在差异,抗菌作用效果依次为:黄连碱小檗碱巴马汀、表小檗碱、药根碱,而抑酶作用效果却是:表小檗碱巴马汀.黄连碱药根碱小檗碱。各生物碱抑制脲酶机理也有不同,黄连碱为可逆的、作用于脲酶Ni2+及巯基基团的混合型脲酶抑制剂;而表小檗碱则为可逆的、作用于脲酶巯基活性基团的反竞争性HPU抑制剂及竞争性JBU抑制剂。结果提示,黄连碱、表小檗碱能通过靶向脲酶活性位点以抑制脲酶活性,且脲酶为黄连碱及表小檗碱抑制H.pylori的作用靶点之一。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前17条
1 欧文涛;李旺;王李平;庞易英;杨陈阳;郭文彬;张雪松;黄双平;王晓季;;四氢黄连碱中间体的合成[J];江西科技师范大学学报;2019年06期
2 王杰;;黄连的药效及临床应用[J];现代养生;2017年02期
3 ;国产黄连5种生物碱的含量测定[J];华西医科大学学报;1989年04期
4 刘川,赵守训;江苏元胡块茎中化学成分的研究[J];中国药科大学学报;1989年05期
5 孟令杰;阎汝南;陈定一;袁兆梅;阎春;;反相高效液相色谱法测定含黄连中成药中小檗碱、黄连碱和巴马汀的含量[J];中成药;1989年12期
6 黄慧敏;柯昌虎;陈琴华;;四氢黄连碱体内抗炎作用的研究[J];实用药物与临床;2016年07期
7 朱俊平;李龙;曾燕;范诗琪;梁慧慧;何红;张喜利;贺福元;刘文龙;;野生与种植黄连不同部位蛋白质分析与评价[J];中国中医药信息杂志;2018年09期
8 蒋小飞;张宝顺;刘勇;李学刚;;荧光猝灭法研究8-烷基黄连碱衍生物对溶菌酶的作用机制[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2011年03期
9 黄慧敏;王红梅;张斌强;陈琴华;;四氢黄连碱体外抗炎作用及机理研究[J];广州中医药大学学报;2019年01期
10 潘激扬;;苦寒良药 黄连[J];中医健康养生;2018年05期
11 韦晟;刘金春;葛卫红;;黄连碱对过氧化氢损伤的血管内皮细胞保护作用[J];中国医药导报;2019年03期
12 王海霞;王青;朱向东;;黄连临床应用及其用量[J];吉林中医药;2019年09期
13 彭琪;黄连碱保留灌肠治疗小儿秋季腹泻58例疗效观察[J];儿科药学杂志;2001年02期
14 王钰乐;刘文;杨道斌;卿勇军;杜平;;基于灰色关联分析的黄连谱效关系研究[J];中华中医药杂志;2017年12期
15 蒋小飞;李学刚;汤琳;叶小利;;8-烷基黄连碱同系物的合成及体外降糖作用[J];中草药;2011年04期
16 董贞荣;胡兴娥;邱海蕴;;黄连有性生殖对其质量和产量的影响[J];辽东学院学报(自然科学版);2018年02期
17 盖晓红;刘素香;任涛;刘毅;田成旺;;黄连的化学成分及药理作用研究进展[J];中草药;2018年20期
中国重要会议论文全文数据库 前8条
1 谢猛;张志辉;邓安珺;李志宏;秦海林;;黄连碱的结构修饰及其构效关系研究[A];中国化学会第十届全国天然有机化学学术会议论文集——第二分会场:天然产物全合成和结构修饰[C];2014年
2 张海;李佳川;孟宪丽;周小玲;;黄连碱对3T3-L1脂肪细胞糖代谢及细胞分化的影响[A];第十一届全国中药药理学术大会论文摘要[C];2010年
3 魏清;;黄连的临床应用[A];2011年全国医药学术论坛交流会暨临床药学与药学服务研究进展培训班论文集[C];2011年
4 张志辉;于金倩;邓安珺;秦海林;;黄连碱的研究进展[A];中国化学会第9届天然有机化学学术会议论文集[C];2012年
5 杨光明;刘晓;张永鑫;杨欣文;彭稳稳;李俊松;蔡宝昌;;黄连4种饮片特征图谱研究及生物碱含量测定[A];中华中医药学会中药炮制分会2011年学术年会论文集[C];2011年
6 张新峰;裘福荣;蒋健;高成璐;;左金丸类方的小檗碱、巴马汀、黄连碱和药根碱在Caco-2细胞转运的比较研究[A];第十次全国中医药传承创新与发展学术交流会暨第二届全国中医药博士生优秀论文颁奖会议论文集[C];2011年
7 余静雯;;黄连对2型糖尿病的作用及相关机制的研究进展[A];中华中医药学会糖尿病分会全国中医药糖尿病大会(第十九次)资料汇编[C];2018年
8 赵明;安自强;郭秀梅;姚旭颖;张树军;;白屈菜化学成分研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 李阳;“黄连—干姜”药对预防炎症性肠病及其相关结肠癌作用机制研究[D];广州中医药大学;2017年
2 蒋小飞;8-烷基黄连碱同系物的合成与药理活性[D];西南大学;2011年
3 范辉;田黄片有效成分(群)治疗脂肪肝的效应和机理研究[D];南方医科大学;2014年
4 王广泉;药物分子对葫芦脲空腔的竞争作用研究及分析应用[D];山西师范大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 谈丽华;黄连中黄连碱及表小檗碱抗幽门螺杆菌作用机制研究[D];广州中医药大学;2019年
2 陈涵婷;基于转录组测序分析不同产地黄连化学成分含量差异的分子机制研究[D];成都中医药大学;2019年
3 张久旭;基于质—效关联的黄连采收加工方法研究[D];北京中医药大学;2019年
4 洪凌;基于抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路的黄连碱改善LPS诱导急性肺损伤的研究[D];中国医科大学;2018年
5 柴芳妮;黄连碱抗肝癌及对急性肝损伤保护作用的初步研究[D];西南大学;2018年
6 王丽;黄连碱对内毒素发热大鼠解热、抗炎作用的PK-PD模型研究[D];成都中医药大学;2018年
7 陈汉斌;醇式黄连碱的合成与抗炎、抗胃溃疡作用研究[D];广州中医药大学;2018年
8 周颖;黄连对朱砂肾毒性配伍减毒的物质基础及机制研究[D];锦州医科大学;2018年
9 施岚尔;《伤寒杂病论》中黄连的应用规律研究[D];南京中医药大学;2018年
10 杨智睿;基于降糖活性的黄连体内配伍规律初步研究[D];成都中医药大学;2017年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 沈尔安;苦口良药说黄连[N];中国医药报;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978