活血化瘀为主治疗骨髓增生异常综合征的研究

【摘要】： 骨髓增生异常综合症（MDS）属中医学“虚劳”、“血证”、“症积” 等的范畴，目前多数学者均以此立论，临床上或重气血虚，或重阴阳 虚，或偏脾虚、肾虚，总以虚为主，虚中可挟实，如伴瘀血、火热、 痰湿之类，治疗也总以补虚为主，或双补气血，或补脾益肾，或滋阴 填精，辅以活血化瘀、清热解毒、化痰等祛邪之法，取得了一定疗效。 导师组根据多年的工作经验，认识到MDS非同于“再障”之类， 以一般“虚劳”辨治MDS疗效有限，而以“干血劳”立论，抓住其 病机根本在于内有瘀血（干血），瘀血不去，妨碍新血的生成，新血 不生而发病，治疗上施予化瘀通络之法以开血源，再辅以益气养血、 滋阴补脾肾等法，组成具有活血破瘀、清热解毒、滋阴养血功效的瘀 毒清方药，临床上以此为主结合辨证、辨病用药治疗MDS。 本研究总结近年来导师组以活血化瘀为主治疗的MDS18例，发 现不仅有较好的主观疗效，能明显改善患者证侯，提高患者生存质量； 治疗后患者症侯积分明显下降（P＜0.01），也有一定的客观疗效，临床 缓解率为11.11％，显效率为16.67％，总有效率达66.67％，近期疗效 较为满意，治疗后患者白细胞、红细胞、血色素、血小板等均有上升， 尤其以血小板上升较明显（P＜0.05），而幼稚细胞却有下降趋势 （P＜0.05），且能明显改善三系病态造血现象，远期疗效亦较好，患者 生存期较长，最长者已达66个月，3年生存率为55.56％，白血病转 化率则较低，3年白血病转化率为16.67％。 在临床工作基础上，我们用血清药理学方法观察了含瘀毒清血清 对白血病细胞系HEL细胞的作用，发现瘀毒清各剂量组之活细胞百 分率、绝对值、四唑盐（MTT）法OD值均较对照组低（P＜0.05）， 尤以中剂量组明显，细胞生长抑制率达83.99％，中、高剂量组的细胞 毒活性分别为30.27％和32.11％，均＞20％，表明瘀毒清有一定的抑制 HEL细胞增殖的作用。 流式细胞术（FCM）分析HEL细胞DNA含量和细胞周期，发 现瘀毒清高剂量组G_1期DNA含量较对照组低（P＜0.05），亦证明了 瘀毒清有一定的抑制HEL细胞增殖的作用。 HEL细胞形态学观察和细胞化学观察发现，含药血清组细胞胞体 较大，多核细胞增多，符合巨核细胞特征，而细胞化学染色非特异性 酯酶阳性，被氟化钠抑制较明显，糖原染色阳性率和阳性指数均增加， 酸性磷酸酶呈阳性反应，且被酒石酸抑制，而苏丹黑、过氧化物酶和 卜 特异性酯酶等粒单系特征性标志酶则均为阴性，以上特点符合巨核细 胞特征，说明瘀毒清有促使HEL细胞向巨核细胞分化成熟的作用。 FCM检测发现瘀毒清中剂量组培养之HEL细胞有明显的凋亡 峰，似有诱导HEL细胞凋亡的作用。 以615小鼠微小残留白血病模型为工具，我们观察了瘀毒清对模 型小鼠骨髓有核细胞分类和白血病细胞百分率及小鼠存活时间的影 响，用FCM检测骨髓有核细胞DNA含量及细胞周期，并通过肝脾病 理检查观察白血病细胞的肝脾浸润情况．结果发现低剂量组和高剂量 组白血病细胞百分率均较对照组低（P＜0．of），而正常成熟细胞较对 照组高①＜0刀5人 肝脾白血病细胞浸润程度则均较对照组轻，两个 剂量组小鼠生存期均较对照组明显延长（Ped刀5），尤以低剂量组更 明显，生命延长率达 194．22％顺剂量组 GZ和 S期细胞百分率似较对 照组有减低趋势，表明瘀毒清有一定的抑制白血病细胞增殖即抗白血 病作用。 在发现瘀毒清有一定诱导HEL细胞分化作用的基础上，我们又初 步观察了含瘀毒清血清对HM细胞的分化诱导作用，结果发现含 瘀毒清血清组三个剂量组硝基四氮晔蓝（NBT）还原能力均明显高于 对照组①＜0．of），细胞形态观察显示实验组早幼粒细胞减少O＜0．of＼ 而中晚幼粒细胞则增多仅功o5卜初步表明瘀毒清对HL一七0细胞也 有一定的诱导分化作用。 总之，体内、体外实验均表明活血化瘀为主的疗法对恶性细胞（白 血病细胞）有一定的增殖抑制、分化诱导和凋亡促进作用，这也许正 是临床治疗MDS取效的原因所在，分析瘀毒清对细胞DNA含量的 影响，我们推测认为瘀毒清可s腿过抑制细胞DNA的合成进而抑制 恶性细胞的增殖，其更深的机制尚待我们从免疫学、细胞和分子生物 学等角度进一步研究揭示。