疣毒净制剂治疗复发性尖锐湿疣临床与机理研究

【摘要】： 尖锐湿疣(Condyloma Acuminatum简称CA)是由人乳头瘤病毒(HPV)，所引起的一种常见性传播疾病，极易复发，与生殖器恶性肿瘤有密切关系，现代医学尚没有理想的根治方法。虽然实践证明中医药治疗CA有较好疗效，但国内尚未见中医药抗CA复发的作用机理的研究，本项目在多年应用疣毒净治疗CA尤其是防治CA复发取得较好疗效基础上进一步观察其抗复发性CA的临床疗效并应用荧光定量PCR、免疫学、电镜等现代的实验技术，从DNA分子、细胞超微结构和细胞免疫水平探讨并初步阐明疣毒净治疗和防治复发性CA的作用机制，为今后中医药防治CA和其它病毒感染性疾病提供现代的实验室依据和新的方法思路。 1 文献研究 目的： CA发病率居高不下，传统的疗法治疗CA不理想，复发率高。因此，搞清楚复发的原因，找出有效的治疗方法，是值得研讨的问题之一。 方法： 本研究综述了近十年国内外有关CA复发原因以及中医药治疗CA的临床与实验研究的现状。 结果： 本病极易复发的原因主要有三点：①对临床及亚临床感染(SP1)病灶治疗不彻底，②周围非皮损区及尿道、生殖器存在着人类乳头瘤病毒(HPV)潜伏感染(LP1)，③宿主免疫力尤其是外周血细胞免疫能力低下、紊乱。中医药防治CA的临床研宄报道较多，但对CA复发的问题尤其是中医药抗CA复发的机理研究几乎空白，提出了今后要将复发性CA作为我们研究的重点方向。 2 临床三究 目的： 2002届博士学位论文 ［：I前对CA的治疗，仍以外治法为上，治疗后复发率较高，伸用某些抗病毒 药物、兔疫增强剂作为辅助治疗，仍有较高的复发率。为提高疗效，《咸少复发率， 我们拟从中医中药方面寻求抗C人复发的治疗方法，本研究从临床的角度观察中 药疣毒净系列制剂在复发。籽CA中的防治作用。 方法： 120例患者随机分为 A组、单纯 CO。激光治疗X B组（激光术后用因特芬治 疗），C组（以疣毒净制剂治疗），治疗后观察4个月，以复发情况作为观察指标。 结果： 临床观察结果看，疣毒净制剂能有效陀低复发性CA治疗后的复发率，与单 纯激光组及因特芬治疗组比有显著差异（p＜0刀1〕u而单纯激光组与冈特芬治疗组 相卜无统计学意义（P＞0刀5）。 3．枉理研究 目的 由于HPV的高度宿主和组织特异性，体外分离和培养尚未成功，以至目前 尚不能建立CA的动物模型；细胞培养法、鸡胚法及整体动物试验等抗病毒作用 研究的药理实验方法均不能应用于eV的药理研究。故给CA的抗病毒研究带来 了困难。 中医认为CA复发的原因为湿热毒邪博结于外阴皮肤，湿为阴邪，其性粘滞， 缠绵难去，容易耗伤正气，正虚邪恋以致尖锐湿疣容易复发，难以根治。 中药疣毒净具有清热燥湿、解毒散结、益气扶正、腐蚀赘疣的作用，据现代 药理研究，疣毒净处方中的一些药物如板兰根、虎杖、紫草、土贝母、该仁等 有抗病毒作用；北蔑、白术、甘草等有调节兔疫功能作用；鸦胆子、蘸术等有细 胞毒和抗肿瘤作用，因此从理论上讲中药疣毒狰降低CA的复发的机理可能是通 过清除局部亚临床感染和潜伏感染的HPV，破坏宿主细胞的超微结构以及提高人 体的免疫功能。因此本研究的目标就是试图从细胞超微结构、免疫学以及分子生 物学三个方面探讨和初步阐明中药疣毒挣制剂抗CA复发的作用机理。 方法 （l）选择前述经疣毒净制剂治疗前、中、后的疣体组织行 HPV荧光定量 PCR 检测及nV分型检测以观察疣毒净治疗前后eVDNA的变化以及不同病毒型 别经过治疗后的复发情况，从而探讨疣毒净抗病毒机制。 （2）选择前述经疣毒净系列制剂治疗前、中、后的疣体组织行电镜观察， 旨在从超微形态学方面探讨疣毒净治疗前后的机理。 （3）选择前述经疣毒净系列制剂治疗前、后的血液行淋巴细胞凋亡调控蛋 白以及肿瘤坏死因于检测，拟从免疫学方面探讨其作用机理。 2 2002届博士学位论文 结果： 门）荧光定量PCR检测： 实验发现复发性CA患者疣体经疣毒浮制剂治疗前、中、后的HPV－DNA的 拷贝数显著递减，经统计学处理有极显著差异（W001）；R治疗一个月后HP V 清除率为67．86％。分型检测表明混合有e＼，16／18型感染者，其治疗后复发率显 著高于单纯 HPV6／l感染型。 Q）形态学观察 光镜下皮损部位有乳头瘤样增生，空泡细胞大量散在，血管增生显著；治疗 后空泡细胞大大减少甚至消失，血管中及周围有大量免疫细胞浸炯；组织结构基 本恢复正常。 电镜下病变处角肮细胞、棘细胞体积增大，核肥大，核仁明显，胞浆内张力 微丝增生，出现空泡细胞。有1例胞核中出现结晶状病毒颗粒。治疗后CA患者 皮损区病理组织学改变大多恢复正常。 （3）淋巴细胞凋亡调控蛋白的表达 复发性CA患者治疗前后外周血淋巴细胞 （PBLC）的CD95＋、CD95L表达水平均高于健康对照组，BclZ则低于