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穴位敷贴干预支气管哮喘气道重构机制的研究

戴文军  
【摘要】:目的:从对气道重构的干预作用的角度探讨穴位敷贴治疗支气管哮喘的机理,为临床上防治哮喘提供新的思路和线索。方法:结合以往研究的经验和文献记载的方法进行造模:选择豚鼠作为实验动物,随机分为模型组、穴位敷贴组、激素组和空白对照组,通过长期反复吸入卵蛋白喷雾制作哮喘气道重构的动物模型。对照组则吸入生理盐水作对照。穴位敷贴组动物在激发哮喘的同时接受由麻黄、细辛、甘遂、延胡、白芥子、鲜姜汁等调成的药膏在大椎、肺俞、脾俞和肾俞敷贴。激素组动物在激发哮喘的同时接受腹腔注射地塞米松注射液。整个实验共持续8周,其中喷雾诱发哮喘和治疗6周。在治疗开始和结束时分别记录各组豚鼠的致喘时间,哮喘持续时间和呼吸困难程度。治疗结束后,光镜下观察哮喘豚鼠模型气道和肺组织的病理形态学改变,电子显微镜观察其气道的超微结构,采用图文分析系统对气道进行图文分析,包括管壁内周长、气道壁面积、平滑肌面积、管壁厚度等。用免疫组化法检测与气道重构密切相关的转化生长因子β_1(TGFβ_1),表皮生长因子EGF,纤维连接蛋白FN,基质金属蛋白酶MMP-9和基质金属蛋白酶抑制剂TIMP-1在气道壁和肺间质的表达情况,并与对照组作比较。观察通过穴位敷贴的干预,哮喘豚鼠气道结构的变化以及气道和肺组织中TGF-β、EGF、FN、MMP-9、TIMP-1等的水平,并与模型组和激素组作比较。 结果:1.穴位敷贴对哮喘豚鼠模型哮喘发作的影响 在连续和反复的诱发哮喘刺激后,模型组,治疗组和西药组豚鼠均有诱发哮喘所需要的时间延长,哮喘发作的持续时间缩短和哮喘发作时症状减轻的趋势。穴位敷贴能进一步延长豚鼠诱发哮喘所需要的时间,减少哮喘发作的持续时间,减轻哮喘发作时症状的严重程度,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01)。 2.穴位敷贴对哮喘豚鼠模型的组织病理形态学影响和图文分析通过6周的卵蛋白诱喘,可成功制作支气管哮喘气道重构豚鼠模型,光镜下观察,与模型组相比较,穴位敷贴和西药组豚鼠气道上皮破坏较轻微,管腔分泌物少,管壁增厚不明显,平滑肌,胶原纤维和腺体等的增生不明显。图文分析显示穴位敷贴治疗组和西药组豚鼠中小气道的气道壁面积,管壁厚度,平滑肌面积等均少于模型组,差异有统计学意义(P0.01)。治疗组、西药组和模型组豚鼠在大气道的气道壁面积,管壁厚度,平滑肌面积上的差异没有统计学意义(P0.05)。


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