拟除虫菊酯生殖和神经毒性及补肾健脾中药干预作用的研究

【摘要】：目的 1.以溴氰菊酯染毒妊娠大鼠模型为实验对象,观察、分析拟除虫菊酯对母体妊娠及子代生长发育和生殖能力的影响,评估拟除虫菊酯所致妊娠缺失、胚胎缺陷情况。并初步揭示其机理。 2.通过研究补肾健脾复方助孕3号对溴氰菊酯所致妊娠缺失、胚胎缺陷的干预作用,评估中药对拟除虫菊酯生殖毒性的防治作用,并初步阐明作用机理。 3.从另一角度验证中药复方的母胎保护作用,为中药制剂在母胎保护方面的推广应用提供理论依据,促进中医药在妊娠期母胎保护和优生优育等方面的推广应用。 方法 1.溴氰菊酯对母鼠妊娠的影响及中药干预作用研究:以72只成年健康妊娠的SD大鼠为研究对象。分6组,其中模型组、模型+中药高剂量组、模型+中药中剂量组、模型+中药低剂量组、模型+牛磺酸组共5组自妊娠第1天至第15天经口灌服1/20LD_(50)(即6.93mg/kg)溴氰菊酯,每日1次,染毒4—6小时后分别灌服生理盐水、相当于成人等效剂量或其2倍、4倍的中药药液及牛磺酸溶液(0.2克/kg)。另一组为空白对照组。妊娠中期(第15天)杀死半数母鼠,余下一半继续妊娠至分娩。观察母鼠的一般情况、母鼠体重增长情况、妊娠情况、分娩情况,以及脾、卵巢、子宫等脏器系数、胎鼠数量及发育情况,并在孕中期及分娩后采血检测β—内啡肽、内分泌激素E2、P和细胞因子IFN—β、IL-2、IL-4、IL-10等指标。 2.溴氰菊酯对胎鼠发育的影响及中药干预作用:以妊娠第15天处死之母鼠子宫内的胎鼠为研究对象。观察胎仔外形有无畸形;胎鼠总数、吸收胎数、活胎数,计算活胎率;测定胎鼠体重、身长、尾长,并取部分胎鼠用荧光定量PCR检测胚胎总Pax3和Cx43mRNA,用免疫组化法测胎鼠脑Cx43蛋白水平。 3.溴氰菊酯对仔鼠生长发育的影响及中药干预作用:以实验各组母鼠分娩的仔鼠为研究对象。观察并比较仔鼠出生时及出生后同一时间点发育情况、仔鼠性别比例、出生存活率和哺育存活率;观察并记录出毛、张耳、睁眼、睾丸下降、