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六味地黄丸对实验性肝癌自杀基因治疗增效作用的病理学研究

王慧峰  
【摘要】:恶性肿瘤是严重危害人类健康和生命的重大疾病,原发性肝癌是常见的恶性肿瘤之一,尽管肿瘤的诊断和治疗水平不断提高,每年恶性肿瘤死亡率仍居高不下。肿瘤自杀基因治疗作为肿瘤治疗的一种新措施展现了良好的应用前景。但单纯自杀基因治疗时,虽然能够直接杀伤转染细胞并通过旁观者效应引起对未转染细胞的杀伤,但仍有部分肿瘤细胞残余导致肿瘤复发,这是该疗法存在的重大缺陷。由于免疫机制是旁观者效应产生的重要机制,改善自杀基因疗法作用的炎症免疫微环境是自杀基因疗法增效的主要途径,鉴于以往的研究表明六味地黄丸有增强机体免疫功能和直接抗肿瘤作用,因此本研究应用自杀基因疗法联合六味地黄丸对荷瘤小鼠进行治疗,观察其疗效并进行病理学研究。 目的:本实验旨在以往研究的基础上,将tk基因导入H22细胞,应用HSV-tk/GCV系统进行小鼠肝癌自杀基因治疗的体内实验,并联合运用中药六味地黄丸,观察联合治疗的疗效,并运用病理学技术及免疫组化等技术初步探讨其机制,为建立中西医结合肿瘤基因治疗方案提供必要条件。 方法:在已建立能稳定产病毒的PT67/tk细胞株的基础上,用NIH 3T3测定病毒滴度。将此病毒感染小鼠肝癌细胞株H22,G418筛选出抗性克隆命名为H22/tk。并将H22细胞与H22/tk细胞以4∶1的比例接种昆明种小鼠,建立移植瘤模型进行体内实验,应用前药GCV及灌服六味地黄丸,16日后处死测肿瘤质量,通过病理切片观察组织的病理变化,应用免疫组化技术观察肿瘤细胞PCNA及FasL的表达,应用TUNEL技术观察肿瘤组织中的细胞凋亡情况。 结果:重新筛选G418的稳定抗性克隆PT67/tk,扩大培养,测重组逆转录病毒液的病毒滴度为2×10~5cfu/mL。以逆转录病毒作为载体,成功将HSV-tk基因导入H22;通过形态学观察到H22/tk显示出对GCV的高敏感性。在体内实验中,HSV-tk/GCV自杀基因系统联合六味地黄丸治疗较单独应用HSV-tk/GCV系统相比,更显著地抑制了肿瘤生长,肿瘤质量相比有统计学意义。病理学及免疫组化研究发现联合组与六味地黄丸治疗组均能明显抑制肿瘤细胞的增殖,而单纯自杀基因治疗无此作用,在促进肿瘤细胞凋亡方面,联合组明显优于其他各组。 结论:体外实验证实GCV能明显杀伤H22/tk细胞,表明自杀基因已成功转入肿瘤细胞,为体内自杀基因疗法的研究奠定了基础;体内实验中,自杀基因系统联合六味地黄丸治疗显示出明显的协同抗肿瘤效应;六味地黄丸增效作用的机制与抑制肿瘤细胞的增殖和促进肿瘤细胞的凋亡密切相关;联合组肿瘤细胞凋亡的增多与肿瘤细胞FasL表达的减少可能有相关性,此相关性可能与FasL减少引起的瘤周免疫微环境的改善有关,尚需进一步研究。实验证实六味地黄丸对自杀基因疗法具有增效作用,通


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3 ;自杀基因疗法对肝肿瘤的作用:以反转录病毒为中介转换胸苷激酶基因的动物实验[J];国外医学.外科学分册;1998年05期
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9 ;消化系统药物[J];国外科技资料目录(医药卫生);2002年03期
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12 钟光玳,温玲珠,谢友玲,罗存敏,万虹,刘士章,张丹,刘黎,陈建宗,敖淑星,宋淑碧,陈介礼,刘力克;内江地区2295例不同人群中抗-HCV的调查[J];现代预防医学;1992年04期
13 张绪清;李梦东;;苦味叶下珠的治疗作用[J];国外医药.植物药分册;1992年03期
14 黄立坤,陈荷仙,王大骏,李晓娥;肝癌特异蛋白与甲胎蛋白联检对早期诊断肝癌的临床意义[J];山西医药杂志;1993年05期
15 邱素芳;潘建基;吴君心;;恶性肿瘤自杀基因放射导向治疗的研究进展[J];现代肿瘤医学;2006年06期
16 刘道柱;江云松;谢敏;肖喜应;;乏血供小肝癌1例[J];医学影像学杂志;2006年11期
17 刘华;刘志苏;袁玉峰;何跃明;钱群;;肝动脉化疗栓塞联合经皮肝穿瘤内无水乙醇注射治疗不能切除肝癌的疗效观察[J];医学新知杂志;2007年01期
18 黄廷荣;费新应;余珊珊;沈震;;膈下逐瘀汤加减方对肝癌H_(22)荷瘤小鼠的作用[J];中国中西医结合消化杂志;2007年05期
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20 严丽丽;;临床护理路径在肝癌介入治疗中的应用[J];齐齐哈尔医学院学报;2007年17期
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1 易火春;;p33~(ING1b)在原发性肝细胞癌的表达及与p53、p21~(WAF1)、Bax的关系和临床诊断意义[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年
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4 唐远平;段学鹏;曾嵘;李亦学;石铁流;;蛋白质相互作用信息在肝癌中的应用[A];中国蛋白质组学第二届学术大会论文摘要论文集[C];2004年
5 王文玲;文小平;黄韵红;韩蕾;;肝动脉栓塞化疗联合三维适形放疗治疗中晚期肝癌的临床研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
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1 牟培源;超声引导超抗原瘤区注射协同微波治疗肝癌后局部免疫应答与预后关系的临床研究[D];军医进修学院;2001年
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1 王慧峰;六味地黄丸对实验性肝癌自杀基因治疗增效作用的病理学研究[D];广州中医药大学;2005年
2 曾艳丽;肝癌消减片段P02在消化系恶性肿瘤中表达状况的研究[D];郑州大学;2004年
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1 黄显斌;唐明山;肝癌“根治”要赶早[N];中国医药报;2004年
2 北京振国肿瘤康复医院主任医师 王振国;肝癌的诱因与防治[N];健康时报;2008年
3 金慰鄂刘士敬;打疫苗 管好嘴 肝癌发病减半[N];大众卫生报;2009年
4 李雪梅;偏食肉鱼不爱吃菜葡萄牙肝癌等高发[N];新华每日电讯;2005年
5 孙川;一种肝癌新药投放临床[N];科技日报;2009年
6 上海岳阳中西医结合医院消化内科 方盛泉 副主任医师;小肝癌的诊断与治疗[N];上海中医药报;2010年
7 上海中医药大学 史雪峰;肝癌的证论[N];上海中医药报;2003年
8 健康时报特约记者 孙理;三招不得肝癌[N];健康时报;2008年
9 河北省秦皇岛市肿瘤医院放疗科 赵成会;怎样早期发现肝癌[N];大众科技报;2005年
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