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急性冠脉综合征瘀毒证及解毒活血抗动脉粥样硬化的分子机制研究

刘美霞  
【摘要】: 目的 1.临床研究:探讨急性冠脉综合征(ACS)标实证与冠状动脉造影指标及炎症指标的相关性,为瘀毒病机探讨及解毒活血治疗方案的设计提供科学依据。2.实验研究:观察解毒活血中药配伍对载脂蛋白E基因敲除[ApoE(-/-)]小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化的影响,探讨其机制。 方法 1.临床研究:搜集ACS患者50例,按照中医标实证辨证标准,分为痰浊证、血瘀证、气滞证、寒凝证、热毒证。每例患者均进行冠状动脉造影,记录冠脉病变支数、冠脉最大狭窄程度,并计算冠脉病变积分;检测患者炎症指标血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)及肿瘤坏死因子(TNF)。将各标实证与冠脉造影指标、炎症指标进行相关性分析。2.实验研究:收集ApoE(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞,分为空白组、解毒组(加入虎杖苷)、活血组(加入山楂提取物)、解毒活血配伍组(加入虎杖苷及山楂提取物)、洛伐他汀组(加入洛伐他汀)、罗格列酮组(加入罗格列酮)、模型组。除空白组外,其他各组均同时加入氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)及脂多糖(LPS)。各组在培养箱内共孵育(泡沫化)2天,电镜下观察48小时后空白组、模型组及解毒活血配伍组细胞内超微结构的变化;并分别观察0小时、24小时、48小时三个不同时相各组细胞内游离钙离子浓度的变化,总胆固醇、游离胆固醇及胆固醇酯的变化,过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、三磷酸腺苷结合盒转运子Al (ABCAl)、白细胞分化抗原36配体(CD36)的mRNA表达,Toll样受体(TLR4)、核因子-KB(NF-KB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-1β(IL-1β)的表达。 结果 1.临床研究:ACS标实证中以血瘀证及热毒证最多,且血瘀证与热毒证冠脉病变程度及范围均较重,其病变积分明显高于痰浊证、气滞证及寒凝证;与其它证相比,血瘀证和热毒证的hs-CRP、TNF均明显增高;随着冠脉病变最大狭窄程度加重、病变支数增加,hs-CRP、TNF呈升高趋势;hs-CRP、TNF与冠脉病变积分均呈正相关。2.实验研究:解毒活血中药配伍能够减轻ox-LDL、LPS对细胞内部超微结构的损害;拮抗巨噬细胞内钙离子水平的增高;显著降低巨噬细胞内总胆固醇、游离胆固醇及胆固醇酯的浓度;提高巨噬细胞内PPARγ、ABCAl的mRNA表达,降低CD36的mRNA表达;减少TLR4、NF-KB、TNF-α及IL-1β的表达;其综合作用优于单纯解毒或活血中药,相当于或优于洛伐他汀及罗格列酮。 结论 1.临床研究:热毒证是ACS的另一重要标实证,瘀毒互结是ACS的主要病机;解毒活血可望成为ACS的重要治法。2.实验研究:解毒活血中药配伍能够通过保护细胞内超微结构,拮抗钙离子水平的增高,改善细胞内胆固醇及胆固醇酯转移,上调PPARy、ABCAl的mRNA表达,下调CD36的mRNA表达,抑制炎症因子分泌等途径干预巨噬细胞泡沫化过程,延缓动脉粥样硬化的发生与发展。


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