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鸦胆子与药用鸦胆子油质量的研究

周鹏飞  
【摘要】:中药鸦胆子化学成分丰富,已报道的苦木苦味素、糖苷类、生物碱、萜类、脂肪酸、黄酮类、苯丙素类等有较强的药理活性,如抗白血病、抗疟疾、抗病毒、抗椎体虫病、抗肿瘤和抗癌等。目前,相关研究多停留在基础研究阶段,鸦胆子油制剂鸦胆子油乳口服液和鸦胆子油乳注射液在临床上已被广泛用于治疗肿瘤、癌症、胃溃疡和胸腹水等疾病。而且鸦胆子油的化学成分尚不明了,鸦胆子油制剂的原材料、条件和贮藏时化学成分的变化情况研究较少。鸦胆子油原材料和制剂的质量标准只对鸦胆子油中油酸含量进行了规定,不能有效的控制鸦胆子及药用鸦胆子油的质量。 据此,本课题对鸦胆子药材和药用鸦胆子油的组分及主要成分的含量进行了研究。首先采用显微法和薄层色谱法对鸦胆子药材进行了鉴定。其次对鸦胆子油测定的气相色谱条件进行了考察,最佳条件为色谱柱:CP-WAX52CB(30m×0.32mm×0.50μm);进样口:250℃;检测器:300℃;柱温:205℃;分流比:5:1;进样量:1μL;载气流速:1mL·min-1。鸦胆子油中的脂肪酸必须进行甲酯化处理增大它的极性才能用于GC法分析,采用单因素法和响应曲面法确立了鸦胆子油甲酯化的最优条件:3mg鸦胆子油和2mL0.5mol/L氢氧化钾甲醇溶液混匀后60℃水浴25min,冷却后加入2mL14%三氟化硼甲醇溶液,60℃水浴酯化时间2min,冷却后加2mL正己烷萃取,再加入1mL饱和氯化钠水溶液后取上层溶液。通过比较超声提取法和索式提取法的提取率及含量,发现采用索式提取法提取较好。最后结合上述气相色谱条件和甲酯化条件,建立了气相色谱法测定鸦胆子药材和鸦胆子油中油酸、亚油酸含量的方法,测得结果为:(1)⑧广西北海、⑩广西鸦胆子药材中油酸小于8%,其余产地均大于8%;⑧广西北海、⑨海南、⑩广西、海南海口药材中亚油酸小于3%,其余产地均大于3%。(2)各批次鸦胆子油中油酸、亚油酸的含量分别大于50%、16%。(3)测得所有样品中油酸亚油酸含量的比值均大于2.5。 对不同产地鸦胆子药材、不同批次药用鸦胆子油的气相色谱指纹图谱进行研究,色谱条件为CP-WAX52CB(30m×0.32mm×0.50μm);进样口:250℃;检测器:300℃;柱温:205℃;分流比:5:1;载气流速:1mL·min-1。采用基于中位数的中药色谱指纹图谱相似度分析软件对测得数据进行分析,结果显示不同产地鸦胆子药材的相似度均大于0.99,不同批次药用鸦胆子油的相似度均为1,相似度较好,但只有将特征成分和指纹图谱结合起来才能有效控制鸦胆子药材及鸦胆子油的质量。采用聚类分析对相对峰面积数据进行分析,将质量、组分相近的样品分类,了解不同产地鸦胆子和不同批次药用鸦胆子油之间的内在关系及统计规律。 此外,采用气相质谱联用对鸦胆子油甲酯化产物进行分析,共分离鉴定了11个化合物;采用液相质谱联用对鸦胆子油进行分析,确定了42种甘油三酯类成分。最后根据课题研究结果,草拟了鸦胆子油质量标准方案。


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