铁皮石斛超微粉的质量评价研究

【摘要】：铁皮石斛是我国传统的名贵药材,有悠久的药用和食用历史,其主要的有效成分为多糖、黄酮及氨基酸等,具有抗氧化、降血糖及增强免疫等多种功效,其保健功能已得到人们广泛认同。近几年,随着超微粉碎技术逐步成熟,铁皮石斛超微粉已逐步应用于冲剂、泡腾片等多种中药药剂的制备,但到目前为止,铁皮石斛超微粉尚没有完善的质量评价体系。为了更全面评价铁皮石斛超微粉的质量,本论文对铁皮石斛超微粉的粒度和显微特征进行研究,并对其中的醇溶性浸出物、多糖、黄酮及氨基酸等成分的含量进行分析。本文的主要工作如下:1、铁皮石斛超微粉中的显微特征图仅能观察到螺纹导管、表皮细胞及草酸钙针晶等碎片。同时以无水乙醇为稀释剂,采用显微镜法测定铁皮石斛超微粉的粒径,其D_(90)、D_(50)及D_(10)的平均值分别为32.99μm、12.28μm及5.10μm。2、参考药典方法,测定了铁皮石斛超微粉的醇溶性浸出物及多糖的含量。结果表明,各批次样品的醇溶性浸出物含量在13.96%～25.92%之间,多糖含量在33.93%～45.85%之间。3、采用Phenomenex Gemini C18(250×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.2%磷酸(48:52)为流动相洗脱,流速为1.0 m L/min,检测波长为330 nm,建立了HPLC法测定铁皮石斛超微粉中柚皮素、槲皮素及芹菜素的含量。结果表明,柚皮素、槲皮素及芹菜素在各自浓度范围内,浓度与峰面积的线性关系良好(R~20.996),平均加样回收率在98.54%～104.29%,RSD在0.64%～3.43%之间,该法稳定、重复性好;测得铁皮石斛超微粉样品中的柚皮素、槲皮素及芹菜素的含量分别在0.335%～1.26%、0.012%～0.099%、0.005%～0.018%之间。4、采用Agilent 5 TC-C18(2)色谱柱(250×4.6 mm,5μm),以p H 6.5的醋酸钠缓冲液-甲醇-乙腈(60:30:10)为流动相洗脱,流速为0.8 m L/min,检测波长为360 nm,建立了柱前衍生-HPLC法测定铁皮石斛超微粉中7种氨基酸的含量。结果表明,7种氨基酸在各自浓度范围内,浓度与峰面积呈良好线性关系(R~20.9981),加样回收率在100.29%～104.38%,RSD在1.32%～3.39%之间,该法稳定、重复性好;测得样品中天冬氨酸、L-谷氨酸、L-丝氨酸、L-精氨酸、L-苏氨酸、L-脯氨酸及L-丙氨酸的含量分别在0.35%～0.58%、0.092%～0.293%、0.101%～0.273%、0.155%～0.384%、0.021%～0.111%、0.079%～0.333%、0.036%～0.218%之间。本文从显微特征及醇溶性浸出物、多糖、黄酮、氨基酸的含量测定等方面对铁皮石斛超微粉进行质量评价研究,得出以下结论:(1)通过显微鉴定研究,发现铁皮超微粉中组织细胞的显微特征中能鉴别出螺纹导管、草酸钙针晶等结构;(2)通过对铁皮石斛超微粉中醇溶性浸出物及多糖含量测定研究,表明铁皮石斛超微粉中的醇溶性浸出物及多糖的含量均符合药典标准;(3)建立的HPLC法可用于测定铁皮石斛超微粉中柚皮素、槲皮素及芹菜素的含量,该法简便且重复性好;(4)建立的柱前衍生-HPLC法可用于测定铁皮石斛超微粉中7种氨基酸的含量,该法操作简单、稳定性较好。本论文为铁皮石斛超微粉的质量标准的研究提供了参考,对其进一步深入开发和利用具有一定的意义。