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光固定化生物材料的合成及其活性研究

关燕清  
【摘要】: 本文采用光化学固定法,对选用的生物医用高分子材料——组织培养聚苯乙烯膜进行表面改性和活性分子接枝,成功地合成出两种新的,具有良好生物相容性和医用性能的生物材料——光固定化温敏生物材料和光固定化抑癌生物材料。通过体外细胞培养体系研究,探讨它们的生物活性及在细胞培养工程和生物医学工程领域的应用前景,并为进一步研制具有温敏和抑癌两种性能的生物材料奠定基础。全文分前言和两大部分。 前言:简介光固定化生物材料、温敏生物材料、抑癌生物材料的研究现状及本文的研究目的和意义。 第一部分:研制并探讨光固定化温敏生物材料,共分两章。在第一章中,首次采用光固定法将合成的温敏性能显著,NIPAAm与AA共聚物(PIA,LCST为38.5℃)的叠氮苯基衍生物(AzPhPIA,LCST下降为21.5℃)区域接枝到组织培养用聚苯乙烯(PS)膜上,制成具有区域温敏性能的温敏生物材料。接着在这一新材料表面对鼠成纤维细胞(STO)进行无血清培养,培养2小时后,在低于LCST的温度下对STO细胞进行选择性脱附。这是至今报道中,首次成功通过温敏膜实现细胞的选择性脱附。第二章中,继续探讨血清培养情况下细胞的选择性脱附。用两种典型的血清蛋白(牛血清白蛋白BSA和纤维粘连蛋白fibronectin)模拟复杂的血清系统,研究血清蛋白对细胞脱附的影响。分析了血清蛋白阻害温敏膜表面细胞脱附的原因,同时得出血清蛋白不影响温敏材料表面温度应答性的结论,为进一步研究降低血清蛋白的阻害作用,促使温敏生物材料更广泛应用于细胞培养工程,取代胰酶回收细胞奠定了基础。 第二部分:研制并探讨光固定化抑癌生物材料,共分三章。在第三章中,首次成功将具有抗肿瘤活性的藻蓝蛋白、藻总蛋白、硒化藻蓝蛋白,通过光化学固定法,共价接枝到聚苯乙烯膜上,制成新的光固定化抑癌生物材料,接着 华南师范大学博土学位论文 中文摘要 研究藻蓝蛋白光固定化聚苯乙烯膜对肝癌细胞7402生长的体外抑制作用及硒 和螺旋藻中其它蛋白质对藻蓝蛋白活性的影响。实验表明,光固定化藻蓝蛋白 对7402细胞的抑制率由未固定化的6We高到55%。微量元素硒对藻蓝蛋白抑 癌活性在一定浓度范围有增效作用。螺旋藻中其它蛋白质的共固定化,抑制藻 蓝蛋白的抑癌活性,表现为藻总蛋白(ASP)光固定化PSt膜对肝癌细胞生长 有营养促进作用。在第四章中,研究了光固定化藻蓝蛋白在藻多糖的协同作用 下对人胰腺癌细胞SW1990生长的抑制作用。实验表明,表面吸附多糖活性组 分 PSPI(当 PSPI浓度为 17.smgjLX 可使固定化藻蓝蛋白对 SW1990细胞的 抑制率由不加多糖的40%上升为50%。在第五章中,首次采用铜离子配位吸 附与离子交换技术(静态-动态)相结合的多糖提纯新方法,得到纯度为98.4丸 回收率达97.8%的干苔多糖。接着研究了干苔多糖与固定化藻蓝蛋白的协同抑 癌作用,实验表明,活性多糖组分*可协同光固定化藻蓝蛋白,使对SW1990 细胞的抑制率由40%提高到80%。


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