穗冠花愈伤组织的诱导和花色素苷积累的研究

【摘要】： 本文研究了穗冠花Celosia cristata(phumosa)愈伤组织诱导和影响愈伤组织生长及花色素苷积累的培养条件。比较了来自不同苗龄的不同外植体愈伤组织诱导率、愈伤组织生长量及花色素苷含量。筛选并建立了生长快速稳定的产花色素苷的愈伤组织体系JSA10和JSA25。并以JSA10为试验材料，就影响愈伤组织生长和花色素苷积累的条件进行了筛选。主要实验结果如下： 穗冠花种子播种于1／2MS培养基上萌发，无菌苗健壮，对诱导愈伤和花色素苷的积累都有利。以20d或30d龄的无菌苗下胚轴作外植体，效果好，愈伤组织生长量大，花色素苷的含量也高。MS+2，4-D 0.1 mg／L+BA 0.5 mg／L培养基适合愈伤组织诱导和继代培养。 经继代培养筛选分离出JSA10洋红和JSA25橙红两种愈伤组织系列。JSA10愈伤组织生长能力和积累花色素苷能力均比JSA25强。JSA10和JSA25的愈伤组织生长曲线均呈“S”形，JSA10在第8d进入对数生长期，8d～12d是愈伤组织的快速生长期，14d～18d是愈伤组织生长缓慢期，20d以后是愈伤组织衰老期。花色素苷的积累在愈伤组织生长缓慢期(14d～18d)达到高峰。JSA10愈伤组织生长好，花色素苷含量稳定，花色素苷产量高峰期相对较长。JSA25与JSA10相比，生长周期较短，进入对数生长期提前2d，增长高峰期短，较快进入生长缓慢期，花色素苷的积累高峰也是在生长缓慢期。 以JSA10继代培养和进行各种因素的影响实验，发现，2，4-D_(0.2)+BA_(1～2)；2，4-D_(0.2)+KT_5；NAA_2+BA_1为适合愈伤组织生长和花色素苷积累的几种组合。其中以2，4-D_(0.2)+BA_2为最好，愈伤 l 组织鲜重增长最快，花色素苦的产量达到最高。 在试验的 10种基本培养基中，MS、BS、LS三种培养基适合 穗冠花愈伤组织生长和花色素昔的积累，其中LS最好。 在 7种所试验的碳源中，以蔗糖效果最好，30～40g／L的浓 度对愈伤组织生长和花色素苦的积累较为有利。浓度高至 90 g／L 时花色素苦的含量最高，但不利于愈伤组织的生长。 培养基中的总含氮量以 30 m mol几为宜，浓度大时促进花色 素芳的积累，但对愈伤组织的生长不利。以 NH／作唯一氮源时， 会对愈伤组织的生长起抑制作用。 光照对愈伤组织的生长和花色素苦的积累有明显的促进作 用。蓝光和红光都促进愈伤组织的生长；而对花色素昔的积累， 蓝光有效。