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基于Tet-on系统下的诱导型RNAi表达体系的建立

黄炼  
【摘要】:RNA干扰(RNAi)是双链RNA分子或sh RNA分子特异性降解同源m RNA的一种转录后水平的基因表达调控机制。由于RNAi能快速、高效、特异的降解目的基因,因此被广泛应用于生物学研究中。研究表明Ago2/c Ago2能明显增强RNAi效果,但Ago2的表达影响质粒的慢病毒包装。由于基因功能的研究需要对RNAi效果进行更精确的调控,故研究者多采用Tet诱导型慢病毒载体进行RNAi体系构建。本研究在改良sh RNA骨架结构的基础上,对Tet诱导型慢病毒表达载体进行更进一步的改进,期望构建一种新型高效的诱导型慢病毒表达载体。首先,研究比较了mi R-451骨架的sh RNA与两种商业化mi R-30a骨架的sh RNA(Esh R与Osh R)的干扰效果;然后,在三种sh RNA骨架的基础上,反向插入内含子在mi R-30a-sh RNA的两端,进而研究反向插入内含子在Tet ON3G骨架的反向诱导系统中的功效;接着,通过改良四环素诱导系统来达到提高目的基因诱导表达水平的作用,比较了Tet O6/TRE3G两种启动子与rt TA3/Tet ON3G两种反式作用因子在载体诱导表达水平中的功效;并比较了IRES与P2A两种连接肽在四环素载体表达中的作用;最后,比较了四环素诱导系统的正反诱导方向及不同反式作用因子启动子对载体诱导效率的影响。主要研究结果如下:(1)三种sh RNA骨架结构中,与两种mi R-30a骨架相比,mi R-451骨架没有明显的增强RNAi效果;而在mi R-30a的两种新型骨架中,Osh R的RNAi干扰效果要强于Esh R。(2)在内含子插入的Tet ON3G反向诱导表达载体中,只有Esh R能观察到微量的增强RNA干扰效果。(3)Thermofisher开发的rt TA3型正向诱导系统的系统诱导效率明显强于Clontech开发的Tet ON3G型反向诱导系统(4)在Tet O6/TRE3G两种启动子与rt TA3/Tet ON3G两种反式作用因子的比较中,Tet O6-Tet ON3G这种启动子与反式作用因子体系能表现出更强的目的基因诱导表达水平。(5)IRES与P2A两种连接肽的比较中,能观察到P2A构成的诱导系统蛋白表达水平有一定的上调。(6)在已筛选处的高效诱导系统中,反向诱导表达系统有一定的背景表达,而在正向诱导系统的不同反式作用因子启动子的筛选中,PGK与Ubc两种启动在低背景表达的基础上,有明显更强的最大表达量。


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3 王领 中国青年报·中青在线记者 王磊;10分钟内将车开走可免罚[N];中国青年报;2017年
4 记者 杨学聪;CBD停车诱导系统5月底“上岗”[N];北京日报;2008年
5 通讯员 王建运;尽快普及应用“停车诱导系统”[N];联合时报;2008年
6 徐赫 鲁克 本报记者 郑宗杰;停车诱导系统建设亟待破茧发力[N];中国交通报;2006年
7 ;广州市停车诱导系统 疏导交通 改善环境[N];中国计算机报;2004年
8 陈卫保 颜志欣;长沙拟建智能行车诱导系统[N];中国交通报;2010年
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