分子克隆和分析一种丝状真菌米曲霉(Aspergillus oryzae)的六个基因5’端上游区域
【摘要】:
米曲霉Aspergillus oryzae是一种广泛应用于工业的丝状真菌,但现在人们对它的转录调控机制还知之甚少。在本论文中,我们报道了克隆并序列分析了六个Aspergillus oryzae基因的5’端上游序列。这六个基因分别编码了果糖1,6-二磷酸醛缩酶(Fructose-bisphosphate aldolase)、6-磷酸葡萄糖异构酶(Glucose-6-phosphate isomerase)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)、丙酮酸激酶(Pyruvic kinase)、丙酮酸脱羧酶(Pyruvate decarboxylase)和丙酮酸脱氢酶(Pyruvate dehydrogenase)。这六个酶均是参与糖酵解反应途径的关键酶。同时,我们还开发了一种新的无辐射凝胶电泳泳动分析(Gel electrophoresis mobility-shift assay)实验方法并成功的探测到Aspergillus oryzae烯醇酶(Enolase)基因5’端上游序列中可能的蛋白结合位点。