香蕉（Musa spp.）遗传多样性及亲缘关系的RAPD分析

【摘要】：香蕉(Musa spp．)是一种主要的热带、亚热带农业作物。虽然在国际商贸中占有重要地位，但人们对其遗传系统知之甚少。与其它农作物(水稻、玉米等)相比，香蕉的分子水平研究相对较少。本研究对24个不同国家、地区来源的香蕉进行的RAPD分析。结果如下： 1．暗处理两天，改良SDS和CTAB均可从半展的香蕉幼叶中提取高质量的DNA。 2．对RAPD条件优化分析，确定了香蕉RAPD分析的最佳方案，即PCR扩增程序为94℃预变性4min，94℃变性60S，37℃复性60S，72℃延伸105S，共40个循环，最后72℃延伸10min；25μl反应体系中包括：200 μmol／L dNTP，2.0 mmol／L Mg~(2+)，0.3 μmol／L引物，模板DNA20～50ng，Ex-Taq酶1U，2.5 μl 10×缓冲液。 3．利用18个引物对供试品种扩增的DNA谱带，进行了UPGMA聚类分析，在此基础上构建了24个香蕉种质的分子树状图。依据此图，供试香蕉种质分成三大类群：第一类群有20个种质，第二类群包括3个香蕉种质，第三类群只含广西鸡蕉(龙牙蕉类)一个种质。其中第一类群又可分为五个亚群：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。 4．用双引物RAPD评价三个巴西种质的亲缘关系，用双引物RAPD获得巴西变种与巴西香蕉间的相似系数为0.5714，低的相似系数说明巴西变种不大可能由巴西香蕉衍生而来。单、双引物扩增结果的比较表明：双引物RAPD扩增可产生更多的多态性片段。