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香蕉(Musa spp.)遗传多样性及亲缘关系的RAPD分析

郭文锋  
【摘要】:香蕉(Musa spp.)是一种主要的热带、亚热带农业作物。虽然在国际商贸中占有重要地位,但人们对其遗传系统知之甚少。与其它农作物(水稻、玉米等)相比,香蕉的分子水平研究相对较少。本研究对24个不同国家、地区来源的香蕉进行的RAPD分析。结果如下: 1.暗处理两天,改良SDS和CTAB均可从半展的香蕉幼叶中提取高质量的DNA。 2.对RAPD条件优化分析,确定了香蕉RAPD分析的最佳方案,即PCR扩增程序为94℃预变性4min,94℃变性60S,37℃复性60S,72℃延伸105S,共40个循环,最后72℃延伸10min;25μl反应体系中包括:200 μmol/L dNTP,2.0 mmol/L Mg~(2+),0.3 μmol/L引物,模板DNA20~50ng,Ex-Taq酶1U,2.5 μl 10×缓冲液。 3.利用18个引物对供试品种扩增的DNA谱带,进行了UPGMA聚类分析,在此基础上构建了24个香蕉种质的分子树状图。依据此图,供试香蕉种质分成三大类群:第一类群有20个种质,第二类群包括3个香蕉种质,第三类群只含广西鸡蕉(龙牙蕉类)一个种质。其中第一类群又可分为五个亚群:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。 4.用双引物RAPD评价三个巴西种质的亲缘关系,用双引物RAPD获得巴西变种与巴西香蕉间的相似系数为0.5714,低的相似系数说明巴西变种不大可能由巴西香蕉衍生而来。单、双引物扩增结果的比较表明:双引物RAPD扩增可产生更多的多态性片段。


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