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糖蜜酒精废液诱导康氏木霉产纤维素酶的研究

林元山  
【摘要】:糖蜜酒精废液是糖厂的主要污染源之一,是一种深褐色、高酸性、高浓度有机废水。广西大学食品与发酵工程所研究其综合治理时,发现糖蜜酒精废液有促进康氏木霉产纤维素酶的作用,本论文为此作了深入研究。 论文研究了糖蜜酒精废液诱导下的纤维素酶酶学特性:FP,EG,BG,CBH酶的最适pH分别为4.8,4.8,4.8,5.0;最适作用温度分别为50℃,70℃,60℃,55℃;测定了CBH,EG,BG酶的米氏常数;探讨了底物浓度、稀释倍数、金属离子等因素对FP,EG,BG,CBH酶的影响。 论文分离纯化了纤维素酶:EG,BG酶经DEAE C52,CL-6B柱层析分离,酶活力最终回收率分别为2.06%,65.11%,纯化倍数分别为24.55、169.84,比活力分别达189.48IU/mg蛋白,656.28IU/mg蛋白。CBH酶经DEAE-C52分离,回收率和纯化倍数分别为85.61%,31.56。 论文研究分析了糖蜜酒精废液的诱导机理:表明糖蜜酒精废液对纤维素酶的产生具有诱导效应,而非营养因素的作用;其FP酶活力是Mandels营养液的4.8倍;EG,BG,CBH酶活力是Mandels营养液的3~5倍。经电泳测定,糖蜜酒精废液诱导康氏木霉大量表达胞外蛋白p~(17.8),p~(72.9);胞外蛋白p~(17.8),p~(72.9)不具有EG,BG,CBH酶活性,即无纤维素酶活性。


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