猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查研究

【摘要】：猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病。该病自发现以来给世界各国养猪业造成了巨大的经济损失,近几年来该病在广西各猪场频繁发生,给养猪业带来严重经济损失。 本研究通过RT-PCR技术对78份送检病料进行PRRSV检测,结果41份为阳性。本实验选其中15份阳性病料作为研究对象,根据北美洲株ATCC-VR2332和中国标准株CH-1a的序列利用Primer设计一对针对E基因的特异性引物E1/E2,通过RT-PCR扩增出668bp的基因片段。将其插入克隆载体质粒PMD18-T。构建重组质粒PMD-E,对克隆的E基因进行序列测定,测序结果显示E基因全长603bp。包含完整的E基因的开放阅读框架,编码200个氨基酸。将E序列与VR-2332、CH-1a和LV的E基因进行同源性比较,结果显示,15份毒株的E基因序列之间的相似性为84.1%～100%,推导编码的氨基酸序列之间的相似性为81.1%～100%;与VR2332、CH-1a、LV株的相似性分别为85.4%～98.5%、87.1～96.2%、62.5～63.8%,与VR2332、CH-1a、LV株氨基酸的相似性分别为83.1%～95.5%、86.1～95.0%、51.7～57.2%,表明国内流行毒株的E基因区域变异较大,证实15份毒株均属美洲型。 把15株流行毒株与国内外已发表的37株PRRSV相应序列进行比较,并建立了遗传进化树。本研究获得的毒株分别属于3个亚群。其中GXGG和广东的GDZJ与本实验室分离的GXA株以及国内已发表的毒株序列BJ-4属