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产脂肪酶菌株的筛选及酶法合成单甘酯

胡朝阳  
【摘要】:从富油土壤中分离筛选到58株脂肪酶产生菌,其中GXL02菌株产生的酶催化油脂甘油解的能力最强,根据其形态特征及16S rDNA序列同源性比较,初步鉴定为不动杆菌Acinetobacter sp.。经培养条件的初步优化,发酵液脂肪酶活力达12.44u/mL。发现GXL02发酵产酶需油脂的诱导,对油脂的需求是亚适量的;同时也依赖Mg~(2+)、Ca~(2+)等金属离子,其中Mg~(2+)的激活作用最强,微量的Mg~(2+)就能激活菌体产酶。表面活性剂吐温80能促进菌体产酶。葡萄糖、蔗糖等糖类物质不利于GXL02产脂肪酶。该酶的最适作用温度为50℃,最适作用pH为9.0,60℃保温90分钟酶活基本不损失,在pH3.0~10.0范围内、4℃下保持48小时酶活力基本不损失,pH12时仍能保持84%的酶活,具有极高的稳定性。以该酶为催化剂,通过无溶剂法棕榈油甘油解反应合成了单脂肪酸甘油酯,结果表明,反应适宜温度为32℃,甘油对油脂的摩尔比为2.5:1,甘油中适宜含水量为4%,适宜水溶液pH为10.0,适宜加酶量为200u/g油脂,反应24小时后单甘酯含量达41.42%。酶促甘油解的用酶量不到同类研究的一半,显示出很高的催化效率,具有良好的应用前景。


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