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厚荚相思的组织培养与农杆菌介导遗传转化体系建立的研究

黄燕芬  
【摘要】:本论文研究主要是通过对厚荚相思进行系统的组织培养试验,建立起良好的厚荚相思组织培养体系,并结合农杆菌介导遗传转化建立遗传转化体系,成功的获得了厚荚相思GUS基因转化植株,并进行了检测,为今后的厚荚相思组织培养与遗传转化研究提供重要的参考依据。试验结果表明: 1、厚荚相思种子灭菌后在不添加任何激素的改良1/2MS培养基中培养效果最好,而其组织培养的基本培养基以改良MS培养基效果最佳。 2、使用0.1%升汞(HgCl_2)8′+10%次氯酸钠(NaClO)20′对厚荚相思种子灭菌效果最好,菌污染率为O,发芽率达89%;单独使用次氯酸钠对厚荚相思种子进行消毒灭菌,灭菌不彻底。 3、不定芽的直接分化途径可作为厚荚相思组织培养的主要途径;脱分化产生的厚荚相思愈伤组织分化频率低,不利于厚荚相思组织培养。 4、2,4-D和KT不适用于厚荚相思诱导愈伤组织和不定芽以及进行组织快繁生产有效苗。6-BA对诱导愈伤组织和不定芽有促进作用。最佳诱导不定芽培养基为改良MS+6-BA_(1.0-2.0mg/L)+IBA_(0.2mg/L),不定芽最高增殖倍数达到4.03倍。 5、添加10mg/L的椰子汁对不定芽的诱导有一定促进作用。 6、30天苗龄的子叶是厚荚相思种子组培快繁的最佳外植体苗龄。


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