β-甘露聚糖酶产生菌的选育及发酵条件的研究

【摘要】：本论文以魔芋、番鬼芋、土壤、海水等从自然界采集到的样品为实验材料，经过富集培养、分离纯化、选择性平板分离，筛选出200株产β-甘露聚糖酶的菌株，再经过平板水解圈初筛得到20株酶活较高的菌株，经过摇瓶复筛，选出一株酶活最高的菌株(编号为C3)，其酶活为15.66U／mL。对C3进行16S rDNA序列测定，并在互联网上与其它菌株的相关序列进行比对，结果发现C3是一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。 对C3进行~(60)Co诱变，经过分离、平板水解圈初筛和摇瓶复筛，得到一株酶活为31.89U／mL的菌株(编号为N40)，其酶活是出发菌株的2.04倍。再对N40先后进行了三次紫外诱变和筛选，但却遗憾地没有获得酶活更高的菌株。 对N40菌株的发酵产酶条件进行研究，发现最佳产酶条件为：1.0％瓜儿豆胶作碳源，0.5％NH_4Cl+0.5％Tryptone作氮源，培养基其它组分为MgSO_4·7H_2O 0.1％，KH_2PO_4 0.05％，Na_2H PO_4 0.05％，pH 7.0，接种量为1％，发酵温度为37℃，摇床转速为160r／m，摇瓶装液量为100mL(500mL三角瓶)。在此发酵条件下发酵24h，该菌产生的β-甘露聚糖酶活力为39.07U／mL，是优化前的1.23倍。 对N40菌株所产的β-甘露聚糖酶酶学性质进行了初步研究，初步确定