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选择性感觉/运动神经切断对大鼠胫骨骨折愈合影响的实验研究

杨亚东  
【摘要】:目的通过建立选择性切断大鼠感觉/运动神经联合胫骨骨折的动物实验模型,研究不同成分神经损伤后对骨折愈合的影响,检测骨折愈合过程中降钙素基因相关肽(CGRP)对骨保护素(OPG)/破骨细胞分化因子(RANKL)信号通路的作用,初步探讨周围神经调节骨折愈合的作用机制。 方法Wistar大鼠60只平均分为3组:前根(运动神经)切断+胫骨骨折组(Anterior rhizotomy group,ART组);后根(感觉神经)切断+胫骨骨折组(Posterior rhizotomy group,PRT组);单纯胫骨骨折组(Sham operated group,SO组)。所有大鼠于神经根暴露或选择性切断侧切断胫骨造成横行骨折,用髓内钉给予固定。分别于骨折术后7d、l4d、2ld、28d处死大鼠,在骨折处上、下5mm部位取骨痂标本行HE及免疫组织化学染色,用图像分析软件IPP6.0计算出CGRP、OPG和RANKL的平均光密度值,然后运用SPSS16.0做出统计学分析。 结果CGRP在SO组各时间点均呈强阳性表达,在ART组随时间逐渐下降,28d(0.152±0.018)为最低;在PRT组7d(0.151±0.016)为阳性表达,以后仅极低水平表达;术后14d和21d,SO组、ART组和PRT组比较差异均有统计学意义(P0.05)。OPG在SO组7d(0.202±0.025)呈强阳性表达,以后逐渐下降但保持较高水平;在ART组中表达逐渐下降,14d(0.178±0.017)为最低,28d开始回升;在PRT组14d(0.150±0.015)表达为最低;术后14d,PRT组和SO组、ART组和PRT组比较差异有统计学意义(P0.05);术后21d,SO组和PRT组、ART组和SO组比较差异有统计学意义(P0.05)。RANKL在SO组14d(0.189±0.015)为表达高峰,以后逐渐下降;在ART组21d(0.188±0.016)为表达高峰,以后逐渐下降;在PRT组各时间点均呈强阳性表达;术后14d,PRT组和SO组、ART组和PRT组比较差异有统计学意义(P0.05);术后21d,SO组和PRT组、ART组和SO组比较差异有统计学意义(P0.05)。 结论在周围神经损伤的骨折愈合过程中,周围神经对骨折的影响作用主要发生在早期(14d~21d)尤以感觉神经纤维对骨折愈合的影响较运动神经纤维显著;CGRP能够调节OPG/RANKL的表达量的比值,从而影响骨折的愈合过程;失神经支配(尤其是感觉神经)导致CGRP对OPG/RANKL表达的调节作用降低,不利于骨折愈合;完整的神经支配是正常骨折愈合的必要条件之一。


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