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siRNA干扰MDR1逆转舌癌耐药性表型的实验研究

方首镕  
【摘要】:目的:探讨MDR1 siRNA对人舌癌耐药细胞株TCA8113多药耐药性的影响。 方法:诱导建立人舌癌耐药细胞株TCA8113/DDP,并以该耐药细胞株为靶细胞,将针对MDR1基因合成,并已鉴定和测序后的siRNA分子利用脂质体介导转染TCA8113/DDP细胞,采用G418筛选克隆细胞,RT-PCR检测MDR1基因mRNA表达,免疫组化法测定P-糖蛋白(P-gp)表达;MTT比色法检测TCA8113/DDP细胞对顺铂(DDP)、五氟尿嘧啶(5-Fu)、平阳霉素(PYM)的敏感性。 结果:经转染成功的阳性克隆细胞TCA8113/DDP的MDR1 mRNA和P-gp的表达均被抑制。TCA8113人舌癌耐药细胞顺铂(DDP)、五氟尿嘧啶(5-Fu)、平阳霉素(PYM)的IC_(50)分别降至3.43μmol/L,1.72μmol/L和1.05μmol/L ( P0 .01)。结论:稳定转染含编码MDR1 siRNA的质粒载体能特异性地阻抑人舌癌多药耐药细胞TCA8113细胞MDR1基因的表达,逆转其对抗癌药物的耐受性。 结论:稳定转染含编码MDR1 siRNA的质粒载体能特异性地阻抑人舌癌多药耐药细胞TCA8113/DDP细胞MDR1/P-gp的表达,增加抗癌药物的敏感性,从而逆转因P-gp高表达所介导的细胞耐药性。本研究为采用MDR1逆转剂提高舌癌化疗敏感性提供了理论依据。


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