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基于生物可降解纳米载体的VEGF siRNA干扰在肝癌中的实验研究

王刚敏  
【摘要】:目的: 研究基于可生物降解纳米载体PEG-SS-PLL构建PEG-SS-PLL/siVEGF在体内外的抑瘤效果并初步探讨其可能机制。 方法: 1.利用可生物降解纳米载体PEG-SS-PLL,装载VEGF siVEGF合成PEG-SS-PLL/siVEGF。 2.肝癌HepG2细胞株的培养及HepG2荷瘤裸鼠模型的建立。 3.细胞水平用荧光显微镜检测其转染率,MMT检测其细胞毒性,流式细胞仪检测细胞凋亡率;动物模型给药后绘制肿瘤生长曲线,计算其抑瘤率; 4.PCR和western-blot检测HepG2细胞内VEGF的mRNA及蛋白含量,PCR和western-blot及免疫组化检测肿瘤组织内VEGF的mRNA及蛋白含量,初步探讨PEG-SS-PLL/siVEGF在体内外的抑瘤机制。 结果: 1. PEG-SS-PLL/siVEGF细胞转染率较对照组高,细胞毒性较对照组低,体外诱导明显细胞凋亡率显著增高。给药后细胞内的VEGF mRNA及蛋白水显著降低。 2.体内实验中,PEG-SS-PLL/siVEGF组的平均抑瘤率为50.12%,PCR、免疫组化及Western-blot检测肿瘤组织内的VEGF mRNA及蛋白水平显著降低。 结论: 1.PEG-SS-PLL/siVEGF的细胞转染率高,毒性较小,在体内外均能明显的抑瘤效应。 2.PEG-SS-PLL/siVEGF体内外抑瘤机制可能为VEGF siVEGF进入细胞增多,通过诱导VEGF基因沉默,降低mRNA及蛋白含量,抑制肿瘤的血管生成。


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