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基于细胞凋亡调节因子Bax、bcl-2的a-细辛醚对癫痫神经元保护机制的研究

刘秋弟  
【摘要】:目的: α-细辛醚是中药石菖蒲(Rhizoma Acori Tatarinowii)的主要活性成分之一,祖国医学认为石菖蒲能化痰开窍益智,镇静止痉,是历代医家治疗癫痫的首选中药,但是作用机制不详。本研究应用KA癫痫大鼠为模型,观察癫痫大鼠空间学习记忆功能和脑电图的变化情况,检测癫痫大鼠海马组织中Bax、bcl-2基因的表达情况,探讨α-细辛醚在抗癫痫方面的作用机制。 方法: 50只雄性SD大鼠随机分为两组,分别为正常对照组(n=10)和癫痫模型组(n=40)。模型组再随机分为4组,每组10只,分别为KA组、α-细辛醚低浓度组(6mg/kg)、中浓度组(12mg/kg)和高浓度组(24mg/kg)。α-细辛醚组连续给药10d,每天经腹腔注射给药一次,第10d取材。癫痫模型组以红藻氨酸(Kainic acid, KA)侧脑室注入诱发大鼠癫痫发作。 1.脑电图(electroencephalogram, EEG)观察:各组大鼠在造模后应用数字化脑电图仪连续进行30min EEG描记。观察各组大鼠EEG痫性丛状放电波发生频率,振幅变化和每一丛状放电波中峰电位数目(number of spikes in each burst, NSEB)的变化情况。 2.行为学观察:采用斜板试验、悬吊试验、Morris水迷宫,分别在24h、10d、30d观察各组大鼠行为学变化情况。 3. Bax、bcl-2检测:应用荧光定量PCR法和免疫荧光化学法检测各组大鼠海马组织中Bax、bcl-2的表达情况。 结果: 1.正常对照组大鼠EEG未描记到痫性放电波,KA组大鼠EEG可观察到明显的痫性波发放,其发放频率、振幅变化和NSEB值较α-细辛醚用药组高(P0.05)。 2.在第30d观察点,KA组大鼠的转体能力、悬吊能力和空间学习记忆能力较正常对照组明显下降(P0.05),α-细辛醚低浓度组次之;α-细辛醚中、高浓度组与正常对照组比较无明显差异(P0.05)。 3.KA组、α-细辛醚低、中浓度组Bax基因的表达明显高于正常对照组(P0.05);KA组大鼠bc1-2基因的表达低于正常对照组(P0.05)而α-细辛醚中、高浓度组的表达则增加(P0.05)。 结论: 1.α-细辛醚可改善KA癫痫大鼠EEG的痫样放电; 2.KA癫痫大鼠存在空间学习记忆能力障碍,α-细辛醚可改善癫痫大鼠的空间学习记忆能力; 3.KA诱发的SD癫痫大鼠海马组织神经元存在Bax、bcl-2的异常表达,α-细辛醚可降低Bax和提升bcl-2的表达。


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