收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

同位素相对标记技术(iTRAQ)结合双向液相色谱与质谱联用技术应用于膝骨性关节炎血清差异蛋白的实验研究

梁海波  
【摘要】:膝关节骨性关节炎(Knee osteoarthritis, KOA)是最常见的关节疾患之一,主要表现为关节缓慢发展的疼痛、僵硬、肿大,伴关节功能障碍,甚至发生残疾。随着老龄化社会的到来,KOA对人类的健康和生存质量影响增大,本病的发病率日趋升高,对其的研究已成为医学领域中的重要课题。国内外公认的是膝关节骨关节炎是一种长期的、隐匿的慢性疾病。诊断通常是基于临床症状和影像学变化。然而X线灵敏度、精确度相对比较差,目前临床上的诊断手段不允许0A的早期诊断或关节损伤进展的评估。因此,寻找膝关节骨性关节炎的生物标志物作为0A早期的诊断标准是目前研究的一个热门方向。蛋白质组学能通过对全体蛋白质表达的规模化分析,研究生物过程相关蛋白质的动态表达和功能的改变;对于寻找疾病诊断的特异性标志物以及对疾病的发病机理的研究来说,是一种有效的高通量的研究方法,可以获得传统手段无法得到的蛋白标志物,目前已经成为寻找新的肿瘤蛋白标志物的主要方法。本研究我们首先运用蛋白质组学研究方法及手段,通过对膝骨性关节炎K-LO、Ⅱ、Ⅳ级的3个亚组的血清进行差异蛋白质组学分析,筛选出了一些有潜在诊断价值的差异蛋白质,并对其中部分差异蛋白质进行了验证和进一步分析。目的:通过对膝骨性关节炎K/L分级的各阶段的血清样本进行ITRAQ定量蛋白组学分析检测进行差异蛋白的筛选,以发现膝骨性关节炎各个时期的的潜在分子标志物。方法:收集膝关节骨性关节炎患者60例,参照Kellgren-Lawrence(K-L)分级标准,分为K-L 0、 Ⅱ、Ⅳ级的亚组,每个亚组随机选取10例男性与10例女性。去除血清高丰度蛋白,进行稳定同位素116、117、118的iTRAQ标记、反相色谱柱分离、质谱检测及Swissport数据库检索;再利用生物信息学软件进行分析。对的部分差异蛋白进行Western Blot验证。结果:通过对不同样品的iTRAQ肽段实验标记、Q-star质谱鉴定和MASCOT搜库,共筛选出有意义差异蛋白169个,K-L 0级与K-LⅣ级差异蛋白153个K-L 0级与K-L Ⅱ级差异蛋白153个;K-L II级与K-L IV级差异蛋白145个。Western Blot验证的ADIPOQ、CRP两个差异蛋白与实验iTRAQ定量蛋白组学分析检测的结果相符合。结论:1.应用iTRAQ技术可筛选出与膝关节骨性关节炎发生发展相关的多个差异蛋白。提示iTRAQ技术对于膝关节骨性关节炎蛋白质组学血清生物标记物的研究有很好的应用前景。2. Adiponectin可能是诊断膝关节骨性关节炎早期潜在的血清生物标志物。同时指出脂类代谢紊乱可能才是膝骨性关节炎发病的根本原因。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 贾经汉;彭京;李明;;关节内注射透明质酸钠治疗膝骨性关节炎[J];中国骨伤;2006年07期
2 鱼慧霞;魏玲侠;;推拿配合复方氯唑沙腙治疗膝骨性关节炎96例[J];宁夏医学杂志;2006年09期
3 王远英;刘洪军;;消痛贴治疗膝骨性关节炎41例疗效观察[J];重庆医学;2006年18期
4 师彬;李刚;;复方活血膏治疗膝骨性关节炎(0~Ⅱ期)临床研究[J];中医外治杂志;2006年05期
5 彭美玲;王卉;;中西药结合治疗膝骨性关节炎35例疗效观察[J];云南中医中药杂志;2006年06期
6 郑晓红;燕春山;刘晓光;;综合治疗膝骨性关节炎140例[J];中医外治杂志;2006年06期
7 王智勇;王霞;陈洪安;;中西医结合治疗膝骨性关节炎60例[J];中医研究;2008年12期
8 邓紫玉;郑红梅;;膝骨性关节炎非手术治疗122例分析[J];中国误诊学杂志;2008年15期
9 张晓明;;中西医结合治疗膝骨性关节炎74例[J];现代中医药;2008年03期
10 刘洪波;靖春颖;;推拿配合电针治疗膝骨性关节炎38例临床分析[J];海南医学院学报;2010年06期
11 潘梁;朱航;;保守治疗膝骨性关节炎64例[J];实用中医内科杂志;2010年04期
12 王海有;刘效惠;;中西医结合治疗膝骨性关节炎疗效观察[J];中国误诊学杂志;2011年12期
13 苏风兵;;中西医结合治疗膝骨性关节炎疗效观察[J];内蒙古中医药;2012年02期
14 吕水英;刘德玉;袁普卫;;中西医结合治疗膝骨性关节炎临床观察[J];四川中医;2012年06期
15 杜修军;;40例膝骨性关节炎采用治肾亦即治骨的临床疗效分析[J];中国医药指南;2012年24期
16 赵友红;王伟;;口服盐酸氨基葡萄糖胶囊加针刺经穴治疗膝骨性关节炎66例临床研究[J];内蒙古中医药;2012年15期
17 扶世杰;杨本伍;舒从科;张祖君;;和解少阳治疗膝骨性关节炎合并原发性骨质疏松症的近期疗效观察[J];内蒙古中医药;2012年24期
18 高小平;湛梅圣;;盐酸氨基葡萄糖胶囊联合蠲痹胶囊治疗膝骨性关节炎临床观察[J];山西中医;2012年10期
19 谭亚菊;周正球;金艳;黄佳珉;;骨增合剂配合西药治疗膝骨性关节炎临床观察[J];山西中医;2012年11期
20 雷斌;宋敏;刘宗权;;阶梯疗法在膝骨性关节炎治疗中的指导意义[J];西部中医药;2012年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 熊越海;熊暑霖;;从肝肾辨证治疗膝骨性关节炎60例[A];第十四届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文集[C];2006年
2 张红林;;消痛散外敷治疗膝骨性关节炎[A];甘肃省中医药学会2010年会员代表大会暨学术年会论文汇编[C];2010年
3 潘玉祥;张兆奎;肖亚平;;追风活络液加火疗法治疗膝骨性关节炎的临床观察[A];贵州省中西医结合学会骨伤分会第二次学术交流会议论文汇编[C];2011年
4 李江涛;杨南萍;王玲;陈永涛;王忠明;谢其冰;;国产盐酸氨基葡萄糖片治疗膝骨性关节炎临床观察[A];首届全国中青年风湿病学学术大会论文汇编[C];2004年
5 韩林;;中西医多元疗法治疗膝骨性关节炎[A];第七届中华中医药学会中医外治学术年会论文汇编[C];2011年
6 刘英明;艾发源;白洪文;;杜熟药衣治疗膝骨性关节炎280例疗效观察[A];第九届全国骨质疏松年会暨第六届全国钙剂年会会议文集[C];2003年
7 黄家亮;;推拿配合超激光治疗膝骨性关节炎56例[A];第一届全国骨矿研究年会会议文集[C];2002年
8 李盛华;乔斌;周明旺;敬平福;;中医药防治膝骨性关节炎优势探讨[A];第三届全国中西医结合骨科微创学术交流会论文汇编[C];2013年
9 李珍;田军;李树林;;针刀结合手法治疗膝骨性关节炎43例疗效观察[A];全国第七届农村基层中西医结合学术暨工作交流会论文汇编集[C];2002年
10 周光辉;;电针治疗膝骨性关节炎的临床研究[A];第四届全国康复治疗学术大会论文摘要汇编[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 黄姵慈;中医药治疗膝骨性关节炎的数据挖掘及临床用药疗效分析[D];南京中医药大学;2015年
2 吴凡;关节康治疗早中期膝骨性关节炎的临床研究[D];广州中医药大学;2007年
3 付海燕;步态分析技术在膝骨性关节炎诊断及中医康复治疗中的应用[D];广州中医药大学;2011年
4 曹喜俊;电针联合离子导入治疗膝骨性关节炎的疗效观察[D];广州中医药大学;2015年
5 吴宛容;不同时间间隔对膝骨性关节炎针刺效应研究[D];广州中医药大学;2013年
6 廖佑杰;从心胆论治针灸治疗膝骨性关节炎的临床研究[D];广州中医药大学;2011年
7 莫永豪(Mok Wing Ho);温针灸治疗膝骨性关节炎的临床疗效观察[D];广州中医药大学;2015年
8 王巨;5氟脲嘧啶关节腔内注射治疗兔膝骨性关节炎的实验研究[D];华中科技大学;2006年
9 苏晓川;人参皂甙Rg1对成人软骨细胞及膝骨性关节炎的影响[D];郑州大学;2013年
10 毕荣修;关节止痛胶囊干预实验性膝骨性关节炎的作用机理及临床研究[D];南京中医药大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 巢朝棟;推拿治疗膝骨性关节炎的文献研究[D];暨南大学;2011年
2 于翔;中药溻渍治疗膝骨性关节炎的临床研究[D];长春中医药大学;2011年
3 唐超;广州市部分社区中老年人膝骨性关节炎认知调查及分析[D];广州中医药大学;2012年
4 申成凯;白介素-1β基因多态性与晚期膝骨性关节炎易感性的关联性研究[D];青岛大学;2013年
5 申荆华;针药两步六法治疗膝骨性关节炎的临床研究[D];南京中医药大学;2004年
6 刘永皑;膝骨性关节炎中医证型分类及其与x线改变的相关性研究[D];广州中医药大学;2007年
7 王荣;中医辨证分型推拿治疗膝骨性关节炎的临床疗效观察[D];新疆医科大学;2011年
8 许志宇;腰膝同治治疗膝骨性关节炎的临床研究[D];广州中医药大学;2015年
9 李然赞;三种疗法治疗膝骨性关节炎的临床观察[D];中国中医科学院;2008年
10 司志平;膝骨性关节炎患者体质分类与辨证分型相关性研究[D];南京中医药大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前5条
1 程桯 中国中医科学院望京医院;引膝骨性关节炎“现身”的8大因素[N];中国中医药报;2012年
2 陕西中医学院骨伤研究所 袁普卫 郝阳泉 楚向东;刘德玉治疗 膝骨性关节炎[N];中国中医药报;2010年
3 中国中医科学院望京医院 程桯;膝骨性关节炎的预警信号[N];中国中医药报;2012年
4 贺栋;膝骨性关节炎不用“换关节”[N];人民政协报;2006年
5 陈书连;膝骨性关节炎手术选择有讲究[N];家庭医生报;2005年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978