收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

癌—睾丸抗原OY-TES-1基因重组、表达及抗体血清学分析

范蓉  
【摘要】: 目的:初步了解OY-TES-1在各种组织的表达及其抗体出现的情况,分析OY-TES-1与肿瘤发生发展以及其抗体与肿瘤和其它疾病的关联,探讨将OY-TES-1用于肿瘤免疫治疗的可能性。 方法:(1)RT-PCR扩增OY-TES-1cDNA序列,构建OY-TES-1原核重组表达质粒,表达和纯化OY-TES-1融合蛋白;(2)对OY-TES-1进行生物信息学分析;(3)制备OY-TES-1多克隆抗体;(4)利用实时定量PCR(qRT-PCR)和免疫组织化学(IHC)技术,从mRNA和蛋白质两个水平研究OY-TES-1的基因表达特点;(5)采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测不同肿瘤、肝硬化、不育症病人及正常人血清中相应的抗体,并对其临床意义做初步的分析。 结果:(1)通过大肠杆菌成功表达出融合蛋白麦芽糖结合蛋白/OY-TES-1(MBP/OY-TES-1),对表达的蛋白行蛋白质飞行质谱仪鉴定,确定与目的蛋白肽段相符。(2)OY-TES-1mRNA在正常组织中广泛表达,以睾丸组织中OY-TES-1的相对表达量最高,约为其他正常组织90倍以上;在HCC、脑膜瘤和胶质瘤中,OY-TES-1mRNA表达水平明显高于癌旁组织和对应的正常组织,并与肿瘤临床指标无关。(3)免疫组织化学(IHC)显示在所检测的多种正常组织和细胞中(10例睾丸组织、8例结肠、7例肝、6例骨骼肌、5例胃、5例晶状体、3例外周血白细胞和1例肾),除1例肾组织中的肾小管外,其余均未见OY-TES-1蛋白阳性反应;在非肿瘤病变组织中,1例前列腺炎与2例慢性乙型肝炎均为阴性,4例HCC癌旁的肝硬化组织有1例阳性,50%(4/8)不育症病人睾丸组织呈现OY-TES-1蛋白阳性反应。HCC、结肠癌和胃癌中OY-TES-1蛋白阳性率分别为40%(4/10)、33.3%(1/3)和25%(4/16),而7例肺癌组织均为阴性反应。(4)血清学检测未发现76例正常人和17例肝硬化病人血清中有相应抗体;肿瘤病人血清抗体阳性率为14.9%(56/377),其中食管癌为30%(3/10),HCC为20%(12/58);不育症病人血清抗体阳性率高达70.8%(46/65),并有较高的抗体滴度,统计学分析显示OY-TES-1抗体血清学检测用于诊断不育症有显著意义(P<0.05)。 结论:OY-TES-1是一种限制性表达于正常组织、选择性高表达于肿瘤组织的抗原,属于癌睾丸相关抗原,有望成为用于肿瘤免疫治疗的靶抗原;OY-TES-1抗体的出现与不育症的关系需作深入的研究。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 赵志海,浦清江;鼠疫菌F_1抗原及抗体血清在不同保存条件下对RIP试验的影响[J];中国地方病防治杂志;1989年06期
2 飯野四郎 ,隗斌;有关HBe抗原和HBe抗体的新话题[J];日本医学介绍;1982年10期
3 周学章;于录;李乾学;邓旭明;张艳萍;;金葡菌多重耐药基因norA的原核表达及其抗体制备[J];中国抗生素杂志;2005年10期
4 沙艳萍;杨红樱;;10 033例HIV抗体血清学筛查结果分析[J];中国医药导报;2008年09期
5 袁佩光;原发性乳腺癌微小转移的检测[J];国际肿瘤学杂志;1984年05期
6 周东丰,孙丽丽,管振全,沈渔邨;氟哌啶醇抗体血清的制备及人血浆氟哌啶醇浓度的放射免疫测定[J];北京大学学报(医学版);1990年06期
7 金学洙;因子抗体血清凝集法鉴定念珠菌之研究[J];吉林大学学报(医学版);1989年03期
8 周瑞清,李春慧,崔素芬;公用筷子HBsAg污染调查[J];内蒙古医学杂志;2000年04期
9 冯笑梅,李克延,鲁辛辛,韩晓芳,李哲先,尔秀江,贾保祥;抗HLA-Ⅰ、Ⅱ类抗原的抗体血清的筛选与特异性鉴定[J];中国现代医学杂志;1995年02期
10 季阳!610081成都,黄如欣,秦占芬!610081成都,曹凤!610081成都,贾桂芳!610081成都,马京香,何智,金振良,倪平安,张建华;中国6省区献血者人类嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ、Ⅱ型抗体血清流行病学调查[J];中华传染病杂志;2000年04期
11 赵建玲;高兴政;屈明;;中性粒细胞杀灭阴道毛滴虫作用的研究[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2008年05期
12 陈培珍,董怡,唐福林,张乃峥;Jo-1抗原的制备及其抗体的测定[J];中国免疫学杂志;1989年01期
13 沈瑶杰;徐亚雅;李芳芳;王杨萍;;人血浆LDL的分离纯化及兔抗人apoB-100抗体的制备[J];现代生物医学进展;2009年14期
14 易永忠;张光永;胡可;陈桦;;高浓度梅毒抗体血清样本致携带污染及钩状效应1例[J];中国输血杂志;2006年04期
15 ;C_3抗体血清的制备与临床应用的初步结果[J];江苏医药;1979年Z1期
16 李长荣,陈恩红;肝肾疾患血清中纤维结合蛋白含量的测定[J];中国医科大学学报;1988年02期
17 高白荷;云南省1976~1986年按蚊嗜血习性调查研究[J];医学动物防制;2002年09期
18 杨剑英,张春明,张健,刘燕,罗泽燕,严宇斌;惠州市人群SARS冠状病毒抗体血清学调查分析[J];预防医学情报杂志;2005年04期
19 黄帆;徐康;吴兴刚;马中富;林正;;抗热休克蛋白72多克隆抗体血清的制备和检测[J];中国危重病急救医学;2006年09期
20 李羽;;乙型肝炎表面抗元又发现一新的决定簇[J];河南预防医学杂志;1976年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙广力;孙刚;李书华;郭昭林;杨本;;猪伪狂犬病抗体血清学检测的比较试验[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
2 郭永红;罗金燕;郝志明;;人TGFβ1抗原决定簇与乙肝核心抗原融合疫苗诱导的免疫反应[A];中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编[C];2005年
3 梁晓华;胡荣花;;大连地区免疫产生特异性抗体种类的分析[A];中国输血协会第三届输血大会论文专辑[C];2004年
4 夏育民;徐世正;丁国华;江珊;熊腊元;;IgG型抗双链DNA抗体对体外培养系膜细胞表型转化的影响[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年
5 吴英德;刘由庚;周德南;杨克政;宋向群;甘友全;胡晓桦;李志革;于起涛;康平;贺海平;廖萍;黄秉琰;莫海鹰;黄鼎智;;肝癌的导向治疗(1980-1999年研究总结)[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
6 段文武;朱开明;李立;姜卫星;向秀成;;果子狸细小病毒性肠炎首次诊断及防治初探[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(下册)[C];2001年
7 刘玉生;张耀洲;;Ini的蛋白的克隆表达与抗体制备[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
8 支勇;邢海涛;杨洪涛;曹式丽;;肾苏合剂对系膜增生性肾炎大鼠肾小球细胞外基质影响的研究[A];中华中医药学会第二十一届全国中医肾病学术会议论文汇编(下)[C];2008年
9 宋国萍;皇甫恩;苗丹民;冯学文;;连续不同时间睡眠剥夺后大鼠脑干中c-Fos蛋白的表达[A];加入WTO和中国科技与可持续发展——挑战与机遇、责任和对策(下册)[C];2002年
10 彭军;李顺成;王树明;牛钟相;;孔雀低致病性禽流感病毒株的分离与鉴定[A];山东农业微生物技术学术研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 路慧丽;Mig重组蛋白的制备及其预防化疗骨髓毒副作用的研究[D];上海交通大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁秋丽;血清特异性抗体检测在严重急性呼吸综合征诊断中的意义[D];广西医科大学;2004年
2 张建光;幽门螺杆菌超氧化物歧化酶基因克隆、表达及多克隆抗体制备[D];郑州大学;2009年
3 张德安;AEP多克隆抗体制备及rAAV/AEP表达检测[D];第四军医大学;2007年
4 田智泉;鸡Mx基因表达及其抗体血清制备的研究[D];扬州大学;2010年
5 刘亭岐;锦鲤疱疹病毒抗体血清学检测方法的建立及应用[D];南京农业大学;2012年
6 钟情;重组表达幽门螺杆菌致病岛CagL蛋白及其抗体阻断粘附试验[D];第三军医大学;2008年
7 宾业鸿;肝癌相关抗原SMP-30抗体血清学筛选及其意义研究[D];广西医科大学;2005年
8 曹炬;肺炎链球菌联合多肽疫苗的实验研究[D];重庆医科大学;2007年
9 费小红;欧文氏菌类胡萝卜素合成相关基因遗传转化水稻的初步研究[D];河北师范大学;2009年
10 秦宗华;血浆蛋白纯化技术的研究[D];暨南大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前8条
1 彭勇;治疗性疫苗有望打破乙肝免疫耐受[N];南方日报;2005年
2 实习生 邓茜 杨军辉 本报记者 游雪晴;非典疫苗何时与大众亲密接触?[N];科技日报;2004年
3 陈晓红;SARS与循证医学[N];健康报;2003年
4 李壮;质量先行 硕果累累[N];中国国门时报;2009年
5 辽宁中医学院 吕群 教授;衣原体感染与不孕[N];大众卫生报;2001年
6 志芹;英用新技术培育无脂肪家畜[N];农民日报;2004年
7 本报记者 王宁;狙击人禽流感[N];贵州日报;2009年
8 记者 陈保江;云南国旅艾滋病确证实验室获全国能力验证证书[N];云南日报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978