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Toll样受体及炎症因子与胸膜疾病的关系研究

杨海波  
【摘要】: 第一部分Toll样受体在胸腔积液中的水平及其意义 研究背景:Toll样受体(TLR)参与机体抗病原体的感染,并在下呼吸道抗微生物感染免疫中起重要作用。本研究的目的是探讨各种病因所致胸腔积液中TLR的水平及其相互作用,以及胸腔积液TLR的诊断价值。 方法:收集102例(其中结核性胸腔积液36例,恶性胸腔积液36例,细菌性胸腔积液18例和12例漏出液)患者的胸水和外周血标本,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定胸水上清液和血清中TLR1至TLR10的浓度,同时检测外周血、胸水主要的生化指标如乳酸脱氢酶、C反应蛋白、葡萄糖以及胸水总蛋白等水平。 结果:细菌性胸腔积液组中TLR1、TLR3、TLR4、TLR7和TLR9的浓度显著高于恶性胸水组、结核性胸水组和漏出液组。胸水多个TLR水平呈正相关。ROC曲线分析显示TLR1、TLR3、TLR4、TLR7和TLR9水平分别以1.40 ng/ml、1.05 ng/ml、1.26 ng/ml、24.08 ng/ml和14.77 ng/ml为界值时,诊断细菌性胸腔积液的敏感性分别是93.3.6%、73.3%、66.7%、80.0%、80.0%,特异性为62.7%、87.1%、95.2%、87.1%和82.3%(曲线下面积为0.831、0.843、0.842、0.883、0.786)。 结论:TLR1、TLR3、TLR4、TLR7和TLR9在细菌性胸腔积液组的浓度显著高于非细菌性胸腔积液组;检测胸腔积液中上述几种TLR的水平有助于细菌性胸腔积液的诊断;多个TLR具有较好的相关性,表现为相互作用。 第二部分Toll样受体4单核苷酸多态性与结核性胸膜炎的相关性研究 目的:探讨TLR4基因多态性与结核性胸膜炎的相关性 方法:采用错配聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(mispairing PCR-RFLP)及PCR-直接测序法在185例结核患者(其中结核性胸膜炎患者68例)和110例健康自愿者人群中检测TLR4基因Asp299Gly位点和Thr399Ile位点的突变频率。 结果:在结核组、结核性胸膜炎组和正常对照组中均未发现TLR4基因Asp 299Gly位点和Thr399Ile位点的突变。 结论:TLR4基因Asp299Gly位点和Thr399Ile位点多态性与结核及结核性胸膜炎的遗传易感性无关。 第三部分可溶性CD14及趋化因子CXCL9、CXCL10在胸腔积液中的水平及其意义 目的:测定各种病因所致胸腔积液中可溶性CD14(sCD14)及趋化因子CXCL9/MIG、CXCL10/IP-10的水平并探讨其在结核性胸腔积液中的作用,试图寻找相对特异和敏感的生物学指标有助于对结核性胸腔积液的临床诊断。 方法:收集88例胸腔积液患者(其中结核性胸腔积液32例,恶性胸腔积液30例,细菌性胸腔积液15例和11例漏出液)的胸水和外周血标本,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定胸水上清液和血清中sCD14及趋化因子MIG、IP-10的浓度,同时检测外周血、胸水主要的生化指标如乳酸脱氢酶、C反应蛋白、葡萄糖以及胸水总蛋白等水平。 结果:结核性胸腔积液组中,sCD14水平显著高于其他三组(p0.05);MIG水平显著高于恶性肿瘤组和漏出液组(p0.01);IP-10浓度显著高于细菌组和漏出液组(p0.01),与恶性肿瘤组的差别无统计学意义(p=0.051)。结核性胸腔积液组sCD14、MIG、IP-10的浓度显著高于非结核组(p0.01)。胸腔积液IP-10浓度与sCD14浓度(r = 0.551, p0.001)、MIG浓度(r = 0.593, p0.001)呈正相关。ROC曲线分析显示sCD14、IP-10诊断结核性胸腔积液的敏感度相对较高(90.3%,77.4%),而MIG的特异度较高(89.3%)。 结论:sCD14、MIG和IP-10可能参与胸膜抗结核免疫反应,检测胸腔积液中上述三项指标有助于结核性胸腔积液的诊断。


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