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冠状动脉微栓塞致心肌细胞凋亡及心功能损伤的死亡受体途径研究

苏强  
【摘要】: 目的探讨大鼠冠状动脉微栓塞(Coronary Microembolization CME)后心肌细胞凋亡及其死亡受体凋亡途径激活的动态变化规律。 方法采用夹闭升主动脉经左室注射42μM微球(3×104/ml ,3000个)建立大鼠冠状动脉微栓塞模型。设为微栓塞组(CME组,n=63);以注射生理盐水为假手术组(S组,n=55)。每组存活大鼠按不同观察时间点随机分为0h、3h、6h、12h、24h组,每组10例。组织病理切片HE及HBFP染色进行梗死区域测量;应用心脏超声检测心功能指标;末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术(TUNEL)检测心肌细胞凋亡; Western blot检测活化Caspase-3及Caspase-8的表达。 结果CME组3h、6h、12h、24h时间点均可见微梗死灶,分别为(7.98±2.58)%、(8.32±3.27)%、(8.40±3.41)%、(8.52±3.76)%,但各时间点之间的微梗死面积比较无统计学差异(均P0.05);CME前,大鼠的平均LVEF为87.69±4.41%,CME后,除0h组外其余时间点LVEF均较S组明显降低(均P0.05)。伴随着LVEF显著下降,心脏超声表现为左室短轴缩短率(FS)和心排血量(CO)下降及左室舒张期末径(LVEDd)增加(均P0.05);与假手术组比较,微栓塞组各时间点的心肌细胞凋亡指数均显著升高(P0.05),凋亡主要分布在微梗死区及其边缘区,冠状动脉微栓塞组各时间点,以6h组的凋亡指数最高(P0.05),12h组开始下降; Western blot结果显示细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶caspase-3和死亡受体凋亡通路的关键蛋白Caspase-8的表达都是在3h开始升高,6h达高峰(P0.05),12h开始表达减少,24h已显著下降。与相应S组比较,除0h组外CME各组caspase-3、Caspase-8的表达均显著升高(P0.05) 结论冠状动脉微栓塞致心肌细胞凋亡显著增加,且具有动态变化规律。死亡受体凋亡途径可能是冠状动脉微栓塞致心肌细胞凋亡及其心功能损伤的重要机制之一。


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