收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

蜂王浆超氧化物歧化酶分离纯化及部分性质研究

闵丽娥  
【摘要】: 对意大利工蜂及意大利工蜂蜂蛹、蜂王浆、蜂蜜、荞麦花粉和油菜花粉中超氧化物歧化酶(SOD)的分布进行了研究,发现这几种蜂产品中都含有SOD活性,这些蜂产品SOD活力顺序为:蜂蛹〉蜂王浆〉蜂蜜〉工蜂〉荞麦花粉〉油菜花粉。以蜂王浆为材料,经过硫酸铵分段盐析,DEAE-Sepahrose柱层析和Seohacryl S-200凝胶过滤,得到了纯化SOD。产率2.98%,纯化倍数104.0,比活53.05U/mg,该SOD经PAGE和SDS-PAGE中都显示单一蛋白区带。以邻苯三酚自氧化法为酶活力测定方法,发现该酶最适pH为8.3,研究了Cu~(2+)、Ba~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)等离子对酶活力的影响。发现Cu~(2+)、Ba~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)对SOD有不同程度的激活作用。其中,激活作用最强的是Cu~(2+)。研究了温度对SOD活力的影响,发现该酶在55℃保温15分钟后,酶仍然保留62%的酶活力,在70℃保温15分钟后仍有20%的酶活力。还研究了Cu~(2+)存在下温度对酶活的影响,发现在有Cu~(2+)存在下,70℃保温15分钟后测得的酶活比25℃下所测酶活更高。酶敏感性实验发现该酶对H_2O_2敏感,对乙醇和氯仿稳定,表明该酶为Cu/Zn-SOD。用220FS Atomic Absorption Spectrometer测定了酶液中Cu、Zn、Fe、Mn的含量,发现该酶液中只含有Cu、Zn。经计算,每个亚基含1.6个Cu原子和3.3个Zn原子。用SDS-PAGE测得该Cu/Zn-SOD的相对分子质量为5.0×10~4,考察了BrAC和DTT对酶侧链修饰的情况,发现BrAC明显抑制酶活力,抑制程度与BrAC浓度成正相关。DTT对酶活力的影响可以分为两个阶段,低浓度DTT抑制酶活力,而较高浓度DTT则对酶活有激活作用。脲的加入明显地抑制酶活力。脲的浓度为2mol/L时,酶完全失去活力。 用UV-VIS spectrophometer TU-1800测定了酶的紫外光谱,发现该酶的最大紫外吸收在260nm左右而不是280nm。BrAC对酶的修饰引起酶最大紫外吸 收不断变小。DTT对酶的修饰引起酶的最大紫外吸收不断变大,最大吸收波长 不断发生红移。向酶液中加入眠后,酶的最大紫外吸收变大,但随着眠浓度的 增大,紫外吸收变小。 用 FL4500-iuorence nctrophotometer测定了不同浓度的 BrAC和 D*修 饰后酶的荧光光谱变化。BrAC和DTT修饰后均引起酶的荧光发射峰强度变小, 但并没有引起发射峰位置的显著改变。酶液中加入腺后引起酶的荧光发射峰强 度变小。 用从8*0600C型自动记录分光偏振仪测定了酶的圆二色谱。经计算, 酶的口螺旋和p折叠和无规卷曲的含量分别为26.125%,53.83%和22.02%。 圆盘等电聚焦电泳测得酶的等电点为4.69,4.85和5刀1。NR/R-单向和双向 SDS.PAGE表明该酶含有链内二硫键。用日立835-50型高速氨基酸分析仪测 定了酶的氨基酸组成,发现该酶由约402个氨基酸残基组成,其中ASp、Gly、 LeU、AI*、Gill、Val的含量较高。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 薛国华;;对蜂王浆供需关系周期性规律一文的补充[J];蜜蜂杂志;1993年04期
2 方文富,侯光珊,李传东,彭文君;FWF型电动蜂王浆分离机的研制[J];蜜蜂杂志;1996年12期
3 柏建民,孙凤荣;蜂王浆所含营养素对人体的作用[J];养蜂科技;1996年06期
4 倪亚;蜂王浆治疗外伤15例[J];蜜蜂杂志;1998年01期
5 金圣惜;蜂王浆治病举例[J];蜜蜂杂志;1998年10期
6 王娟丽;蜂王浆与医疗保健[J];山西食品工业;1998年03期
7 郭芳彬;论蜂王浆抗衰老作用机理[J];养蜂科技;1998年04期
8 郭芳彬;蜂王浆防癌抗癌探秘[J];养蜂科技;1998年06期
9 黄坚;蜂王浆尤如美容霜[J];养蜂科技;2000年02期
10 刘克武,杨守忠,葛绍荣,刘晓雯,闵丽娥,张斌,喻东,刘鑫;蜂王浆的抗菌活性研究[J];蜜蜂杂志;2001年02期
11 郭芳彬;运动员的理想食品蜂王浆——从高桥尚子获奥运会女子马拉松冠军说起[J];蜜蜂杂志;2001年06期
12 刘光楚;蜂王浆外用美容法[J];中国养蜂;2001年06期
13 郭芳彬;蜂王浆与肝脏病[J];养蜂科技;2002年01期
14 柴振国 ,杜文义;蜂王浆助我活到耄耋之年[J];中国养蜂;2002年06期
15 倪辉,吉挺,杨远帆;蜂王浆抗菌作用的初步研究[J];蜜蜂杂志;2003年02期
16 尹志国;;小儿盗汗服蜂王浆好[J];蜜蜂杂志;2007年03期
17 黄坚;;浅谈蜂王浆营养与保鲜[J];科学种养;2007年06期
18 胡彦居;;古稀之年话王浆[J];蜜蜂杂志;2007年05期
19 汪红;;《蜂王浆》新国标[J];农产品市场周刊;2008年37期
20 李畔久;;用蜂王浆强身祛病延缓衰老[J];中国蜂业;2009年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李忠谱;;蜂花粉、蜂王浆、蜂蜜等系列产品加工技术转让简介[A];中国自然资源学会全国第二届天然药物资源学术研讨会论文集[C];1997年
2 茹清静;施维群;李天一;章亮;徐珊;;癸烯酸及蜂王浆防治大鼠肝纤维化的实验研究[A];全国第3届中西医结合传染病学术会议暨中国中西医结合学会传染病专业委员会第2届委员会议论文汇编[C];2010年
3 李盛东;姜元姣;;蜜蜂育种提高蜂王浆的产量与品质[A];中国养蜂学会蜜蜂育种专业委员会第四次学术研讨会论文集[C];2007年
4 李敏;邱璐;黄雪强;凌昌全;潘品荣;;中药黄芪对蜂王浆矿物质和维生素C含量的影响[A];中国营养学会第八次全国营养学术会议论文摘要汇编[C];2000年
5 柏鸣;周立;;家蝇抗菌蛋白的分离纯化及部分性质研究[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
6 王胜国;;保健药品的食用禁忌[A];浙江省第十四届农村医学暨乡镇卫生院管理学术会议论文汇编[C];2006年
7 刘中华;梁宋平;;一种海南捕鸟蛛毒素的分离纯化及部分性质研究[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
8 廖海;杜林方;张年辉;;油菜低分子量胰蛋白酶抑制剂的分离纯化与部分性质研究[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年
9 时晓晶;杨炜;赵可怡;杨胜祖;;气相色谱法测定蜂王浆及其制剂中的10-羟基-2-癸烯酸[A];天津市第五次色谱学术交流会论文集[C];1987年
10 苏松坤;沈飞英;戎映君;陈盛禄;李言清;包文涛;;蜂王浆中活性组分的研究[A];2005年中国养蜂学会蜜蜂产品专业委员会、蜜蜂保护专业委员会、蜜蜂授粉专业委员会联合工作会议和学术研讨会论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陆志科;竹叶生物活性成分提取分离及其抗菌活性研究[D];中南林学院;2004年
2 徐金瑞;黑大豆种皮花色苷抗动脉粥样硬化及其抗氧化机制研究[D];西北农林科技大学;2006年
3 韩俊友;牛蛙皮肤抗菌肽分离纯化、基因克隆表达及生物学特性的研究[D];吉林大学;2007年
4 马春玲;海洋酵母普鲁兰类酵母碱性蛋白酶发酵生产、特性研究及基因克隆[D];中国海洋大学;2007年
5 陈杰;高密度培养盘基网柄菌及重组可溶性人Fas配体表达的研究[D];浙江大学;2008年
6 华颖;纤维蛋白溶解酶的发酵制备、分离纯化及酶学性质研究[D];江南大学;2008年
7 赵萍;家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂研究[D];西南大学;2008年
8 王元凤;茶多糖的分离纯化、结构及构效关系研究[D];江南大学;2005年
9 段冷昕;梅花鹿茸多肽的化学结构及其抗肝纤维化作用[D];吉林大学;2007年
10 陶红;金线鱼胃蛋白酶纯化鉴定及结构研究[D];华南理工大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 闵丽娥;蜂王浆超氧化物歧化酶分离纯化及部分性质研究[D];四川大学;2002年
2 刘晓雯;小肠蔗糖酶的分离纯化及部分性质[D];四川大学;2002年
3 刘春芬;纤维素酶高产菌株的选育及酶的分离纯化研究[D];西南农业大学;2005年
4 高秀蓉;人胰岛素固相酶促半合成及其工艺的研究[D];四川大学;2005年
5 张及禄;岩栖蝮蛇去整合蛋白的分离、纯化与抗肿瘤作用研究[D];吉林大学;2008年
6 李燕;新疆鲜蒜中蒜氨酸酶的分离纯化及性质[D];新疆大学;2004年
7 黄爱民;广西菲牛蛭中菲牛蛭素的分离纯化及体内外抗凝血实验[D];广西医科大学;2005年
8 张峰;青稞β-葡聚糖的分离纯化及其理化性质研究[D];西南农业大学;2005年
9 俞志明;抗肿瘤植物的筛选及其有效成分的分离纯化[D];浙江工业大学;2005年
10 王瑞霞;枯草芽孢杆菌B-903菌株的发酵条件及所产抗生素的研究[D];河南农业大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 成春到;怎样提高蜂王浆的产量[N];中国畜牧报;2003年
2 实习记者  肖玮;我国出口蜂王浆遭日本退货[N];北京现代商报;2006年
3 郭艾琳;中国蜂王浆出口遇“寒冬”[N];第一财经日报;2006年
4 本报记者  张悦;输日蜂王浆受挫“药残”关[N];国际商报;2006年
5 健康时报实习记者 李梅浠特约记者 尹琳;热天怎么吃蜂王浆?[N];健康时报;2008年
6 广蜂;低价蜂王浆“三无产品”多[N];中华合作时报;2000年
7 中国农科院蜜蜂研究所;蜂王浆知识知多少[N];科技日报;2003年
8 郭艾琳;蜂王浆出口遭遇日本“肯定列表”寒冬[N];经理日报;2006年
9 邓丽丽;补益良品蜂王浆[N];人民政协报;2006年
10 肖玮;中国蜂王浆企业遭遇“韩国门”[N];北京商报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978